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文档简介

储存注意事项:储存于阴凉、通风的地方;远离火种、热源。避免光照。室温不超过30°C,相对湿度不超过80%。包装必须密封,切勿受潮。应与易(可)燃物、还原剂、碱类、醇类、食用化学品分开存放,切忌混储,储区应备有合适的材料收容泄漏物。操作注意事项:尽量在通风橱操作,加强通风,避免粉尘扩散。远离易燃、可燃物,避免与还原剂、碱类、醇类接触,防止包装及容器损坏。EDTA(PH)组分浓度:mol/LEDTA(MW:)配制量:500ml配制方法:称取93gNa2EDTA・2H2O置于500ml蓝盖瓶中。加入400ml的去离子水,置于磁力搅拌器上充分搅拌。用NaOH调节调节pH值至(约需加入20g固体NaOH),当pH接近时,EDTA方可完全溶解,加入去离子水定容至1L。高温高压灭菌后,室温保存半年。5MNaCl组份浓度:5mol/LNaCl(MW:配制量:1L配制方法:准确称取氯化钠,置于1L的蓝盖瓶中。用去离子水溶解并稀释至1L。高温高压灭菌后,常温保存。CaCl2组份浓度:LCaCl2(MW:配制量:50ml配制方法:准确称取氯化钙g于50ml的conicaltube中。2•用去离子水溶解并稀释至500ml,用口m滤膜过滤除菌滤膜过滤除菌到进口的conicaltube。3•贮存于4C。50%甘油组分浓度:50%(V/V)glycerol配制量:100ml配制方法:量取下列试剂,置于250ml蓝盖瓶中:100%glycerol50ml加入50ml去离子水,充分搅拌溶解。3•高温高压灭菌,4C保存。使用时,到超净台分装。Amp-氨苄青霉素(钠盐)放置:置于4°C冰箱配方及配法:配成200mg/ml的1000*溶液储存(40g溶于200ml蒸馏水中),溶解后在超净台用注射器过滤灭菌分装,置于-20°C冰箱第二层,以1*的终浓度(200ug/ml)加入培养基。Kan-卡那霉素(硫酸根)放置:置于试剂柜配方及配法:配成20mg/ml的1000*溶液储存(4g溶于200ml蒸馏水中),溶解后在超净台用注射器过滤灭菌分装,置于-20°C冰箱第二层,以1*的终浓度(20ug/ml)加入培养基。DTT(二硫苏糖醇)放置:置于-20°C冰箱顶层配方及配法:1MDTT的配制:溶解IPTG于50mL水中,溶解后分装成1。5ml管,置于-20°C冰箱第二层使用浓度为1-10MmPMSF(苯甲基磺酰氟)放置:试剂柜PMSF的配制:分子量保存室温保存,配成PMSF溶液后需-20°C保存。配制溶解的PMSF于足量的异丙醇中,定容到50ml。分成小份贮存于一20C。工作浓度1mM注意:有毒,对呼吸道粘膜、眼睛和皮肤有很强的危害性,配制时请在通风橱进行,并穿实验服及戴一次性手套。10XTEBuffer(pH)组份浓度:100mMTris-HCl,10mMEDTA配制量:1L配置方法量取下列溶液,置于1L蓝盖瓶中。Tris-HClBuffer()100mLEDTA()20mL向蓝盖瓶中加入约800mL的去离子水,均匀混合。将溶液定容至1L,高温高压灭菌。室温保存半年。注意:此为贮存液,使用时稀释100倍,用于PCR纯化和质粒提取后产物保存。PIPES(PH)配制量:10ml(MW:)配制方法:称取,加入到15ml塑料离心管内。加8ml的水,搅拌溶解。用5MKOH调PH至4.滤膜过滤,-20C保存。Tris-HCl()组份浓度:mol/LTris-HCl配制量:1L配制方法:1•称取的Tris-base(MW:)置于1L蓝盖瓶中。加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。用浓盐酸调pH值至。将溶液定容至1L。高温高压灭菌后,室温保存半年。Tris-HCl()组分浓度:mol/LTris-HCL配制量:1L配制方法:称取121g的Tris-base(MW:)于1L蓝盖瓶中,加入900ml的去离子水,充分搅拌均匀,用浓盐酸调pH值至,每升约需40-50ml浓盐酸,用水调整终体积至1L。如需其他PH的Tris,根据所要求的pH(25°C下)加一定量的浓盐酸。高温高压灭菌后,室温保存半年。注意:测PH时需使用温度补偿电极,因为温度变化对Tris的PH有很大影响。浓盐酸的体积(ml)14213846566676pH10%SDS组份浓度:10%(W/V)SDS配制量:500mL配置方法1•称量50g高纯度的SDS置于500mL蓝盖瓶中,加入约400mL的去离子水,68C加热溶解。2.滴加数滴浓盐酸调节pH值至。3•将溶液定容至500mL后,室温保存。注意:SDS为固体粉末状,吸入会对肺造成损害,应在通风橱中称取SDS。溶解时,SDS易产生气泡,不要剧烈搅拌。30%APS(过硫酸铵)组份浓度:30%(W/V)APS配制量:1mL配制方法:准确称取APS。加入的去离子水溶解。3•贮存于4C。注意:30%的过硫酸胺溶液在4C保存时间可使用2周左右,超过期限会失去催化作用。10XSDSRunningBuffer配制量:1L配制方法:称量下列试剂,置于1L蓝盖瓶中。Tris20g;Glycine144g;10%SDS100ml加入约700ml的去离子水搅拌溶解。定容至1L,混匀,室温保存。50XTAEBuffer()组分浓度:2MTris-base,100mMEDTA,1M冰乙酸配制量:1L配制方法:1、称取下列试剂,置于1L蓝盖瓶中:Tris-base;EDTA200ml2、加入约600ml的去离子水,充分搅拌溶解,再加入的冰乙酸,混合均匀。3、加去离子水将溶液定容至1L。4、高温高压灭菌后,室温保存半年。6XDNALoadingBuffer(Agarose)组分浓度:%(W/V)溴酚蓝%(W/V)xylenecyanolFF,60%glycerol,60mMEDTA配制量:50ml配制方法:1•称取下列试剂,置于50ml离心管中:溴酚兰

向离心管中30ml去离子水,加热充分溶解。加入15ml甘油,最终用去离子水定容至50ml,混匀,室温保存。4•使用时,分装1ml—管,加入,4°C保存。5Xloadingbuffer(蛋白)1.称量下列试剂置于10ml塑料离心管中。1

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