DB 6108T 38-2022湖羊人工授精技术规范

ICS65.020B05榆DB6108林市地方标准DBT—2022chnicalRegulationforArtificialInseminationofHuSheep榆林市市场监督管理局发布IDB6108/T38—2022前言本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。本文件由榆林市榆阳区农业投资开发有限公司提出。本文件由榆林市农业农村局归口。本文件起草单位：榆林市榆阳区农业投资开发有限公司、榆林市农产品质量安全中心、榆林学院、陕西新中盛农牧发展有限公司、榆阳区动物疫病预防控制中心、神木市动物疫病预防控制中心、府谷县动物疫病预防控制中心、绥德县动物疫病预防控制中心。本文件主要起草人：翟军军、刘健鹏、姬阳、陈敏艳、张彦飞、魏泽玉、米耀云、贺玉胜、韩斌、袁溶英、刘锦旺、敬晓棋、延庆飞、张利、焦霞、王磊、温志医、苏翠英、崔晓霞、钟巧梅、曹勇、白崇生、王峰、李河林、武燕、郝婷婷、马杰、马飞、薛琳珏、崔珊、刘欢、王雅媛、霍延媛、高艳、张红梅、张艳、王艳凤、苏翠英、张彦、白淑珍。本文件由榆林市榆阳区农业投资开发有限公司负责解释。本文件首次发布。联系信息如下：单位：榆林市榆阳区农业投资开发有限公司电话址：榆林市榆阳区长乐路58号邮编：7190001DB6108/T38—2022湖羊人工授精技术规范1范围本文件规定了人工授精采精准备、采精操作、精液品质要求、精液的稀释与保存、输精等内容。本文件适用于榆林市湖羊人工授精操作。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。NY530—2002牛、羊用采精器3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1通过台羊，利用假阴道等器具人为采集种公羊精液的技术。3.2精液稀释液Semendiluter由双蒸水、精子营养物和精子保护剂等配制而成，用于精液稀释的液体。3.3精子活率Activespermrate精液中直线前进运动的精子数与总精子数的比值。3.4精子密度Spermconcentration单位体积(mL)的精液中所含的总精子数。3.5精子畸形率Spermabnormalityrate精液中畸形精子占总精子数的百分比。3.6台羊Dummy2DB6108/T38—2022种公羊采精时，被种公羊爬跨的支撑羊，包括发情母羊和假台羊。4采精准备4.1场地选择要求房舍宽敞、地面平坦不滑、干净卫生、周围无噪音。露天采精时应选择干燥背风处。4.2假阴道准备假阴道质量应符合NY530—2002的规定。4.3清洗使用前，先用洗涤剂将其洗刷干净，然后用自来水反复冲洗，最后再用蒸馏水冲洗3遍，自然干燥。4.4消毒假阴道接触精液的内胎腔面和集精杯玻璃杯内壁均需要进行消毒，具体可用75%酒精棉球进行擦拭消毒，也可用紫外线照射30min以上进行消毒。紫外线消毒时，应将内胎腔面翻出在外，并保证所有腔面均照射30min以上。4.5安装将消毒好的内胎放入假阴道外壳(光面向里，粗面向外)，两头反转套在外壳上，两端用橡皮圈固定。要求内胎松紧适中、平整、无皱折和扭转。4.6注水充气使用时，一端装上已消毒的集精杯，并根据室内温度，在假阴道夹层内注入50℃左右的热水150mL~180mL，使内胎温度保持在38℃~40℃，同时在内胎腔前1/2段涂以灭菌润滑剂，再吹入适量空气，使内胎一端中央呈“Y”字形，内胎管腔刚好闭合而不向外突出。5采精操作5.1台羊准备将台羊的颈部固定在采精架上，用0.1%高锰酸钾溶液喷洒消毒母羊的外阴部，然后用灭菌纱布或毛巾擦干。5.2种公羊准备用0.1%高锰酸钾溶液喷洒消毒公羊的包皮周围，然后用灭菌纱布或毛巾擦干。5.3采精员准备采精员蹲在台羊右后侧，右手持已准备好的假阴道，使假阴道与地面约呈35°~40°，并气嘴向下。5.4采精3DB6108/T38—20225.4.1当种公羊爬跨台羊而阴茎未触及台羊后驱时，用左手轻轻地将阴茎导入假阴道内，待公羊挺腰抬臀射精完毕后，阴茎自假阴道中自行脱出时，立即将假阴道直立，使集精杯向下，打开气嘴放气，待射出精液全部流入集精杯后取下集精杯，送往实验室进行精液品质评定。5.4.2操作时要避免假阴道内的水流入集精杯。6鲜精品质要求湖羊鲜精品质的评价指标包括有射精量、颜色、气味、精子活率、精子密度以及精子畸形率，合格指标见表1。表1湖羊鲜精品质指标要求指标正常范围指标正常范围射精量0.5mL~2.5mL精子活率≥0.7颜色乳白或淡黄精子密度20亿/mL~30亿/mL气味稍有腥膻味精子畸形率14%7精液的稀释与保存7.1稀释液的配制稀释液一般有以下三种配置方法：agg至100mL，混匀成基础液。基础液经高压灭菌30min后，可放入4℃冰箱保存。用时取基础液80mL，加新鲜蛋黄20mL、青霉素10万IU、链霉素100mg；b)脱脂羊奶。将鲜羊奶煮沸，去除表层乳脂后，装入盐水瓶，高压灭菌30min，置于4℃冰箱中保存；c)果糖0.5g，Tris3.63g，柠檬酸1.99g，加双蒸水至100ml，混匀成基础液。基础液经高压灭IU链霉素100mg。7.2鲜精的稀释精液稀释的最终总体积根据射精量、精子密度和精子活率来计算，要求稀释后的精子密度不低于5亿/mL，计算见公示(1)和公示(2)：稀释精液最终总体积(mL)=射精量(mL)×精子密度(亿/mL)×精子活率÷5亿/mL ()1稀释液的加入量(mL)=稀释精液最终总体积(mL)—射精量(mL) ()27.3稀释方法将与精液等温的稀释液沿管壁缓慢加入精液中，且边加边混合，每次加入的稀释液不得多于原精液的体积。高倍稀释时，可分次进行，直至达到最终的稀释体积。7.4保存4DB6108/T38—2022将装有稀释精液的瓶子包裹上8层~12层纱布缓慢降温，放入4℃冰箱冷藏室保存，时间不超过5天。8输精8.1输精前的准备8.1.1低温精液升温低温保存精液应在35℃左右的温水中升温1min~2min。8.1.2精子活率检查镜检待输的稀释精液，精子活率在0.5以上时，可用于输精。8.1.3输精管消毒手指挤压酒精棉球，将棉球中挤出的酒精液滴入竖直的尾部向上的输精管管腔内，让酒精流过输精管管腔，然后用酒精棉球擦拭输精管外壁。酒精消毒过的输精管管腔需用生理盐水冲洗3遍。8.1.4母羊保定将母羊置于保定架内，前低后高，身体纵轴与地面呈45°。8.2输精8.2.1输精量和有效精子数每次输入的精液量应为0.05mL~0.5mL，有效精子数应≥0.5亿。8.2.2输精时间和输精次数经产母羊第一次输精时间为发情后12小时，间隔12小时进行第二次输精。8.2.3输精方法8.2.