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流行病与卫生统计学论文:食物过敏BN大鼠肠道通透性紧密连接蛋白【中文摘要】近年来,食物过敏(Foodallergy,FA)的发病率呈逐步上升趋势,已被视为一种严重的公共卫生问题。但到目前为止,FA的发生机制还没有完全被阐明,尤其是食物过敏过程中肠粘膜屏障功能的损伤机制还不清楚。在机械和生化等条件的作用下,肠粘膜屏障的完整性有可能遭到破坏,使TJs发生结构重排或缺失,进而导致肠道通透性的异常改变。研究表明,肠道通透性的异常改变是FA发生的一个重要诱因。但对于FA过程中肠道屏障功能变化的分子基础,国内外尚未见深入的研究报道。因此,研究食物过敏时肠道屏障功能的变化,并寻找与FA相关的肠道紧密连接分子显得尤为重要。研究食物过敏时肠道屏障功能的变化,并寻找与食物过敏相关的肠道紧密连接结构基因,为RA的预防、诊断和治疗提供新的理论基础。方法构建挪威棕色(BrownNorway,BN)大鼠的食物过敏动物模型:实验组每天给予1mg/mL的卵清蛋白(Ovalbumin,OVA)1mL灌胃;对照组每天给予0.1mmol/L的PBS1mL灌胃,共6周。建模期间,每7天1次分别给予每只大鼠一定量的乳果糖(Lactulose,L)和甘露醇(Mannitol...【英文摘要】Inresentyears,foodallergyhasbeenrecognizedasacommonworldwidehealthproblem,anditsincidenceseemstobeincreasing.Butsofar,themechanismoffoodallergyisnotfullyclearespeciallytheinjurymechanismofintestinalbarrierfunctioninprocessoffoodallergyisunclear.Undertheinfluenceofthemechanicalandbiochemicalconditions,theintegrityofintestinalmucosalbarriermaybedisrupted,sothatcausesTJstructureschange,deletion,leadingtoabnormalchangesinintestinalpe...【关键词】食物过敏BN大鼠肠道通透性紧密连接蛋白【采买全文^内】139938848138113721同时提供论文写作定制和论文发表服务•.保过包发.【说明】本文仅为中国学术文献总库合作提供,无涉版权。作者如有异议请与总库或学校联系。【英文关键词】FoodallergyBNratsIntestinalpermeabilityTightjunctionprotein【日录】食物过敏大鼠肠道屏障功能的变化 摘要4-7Abstract7-9图表索引14-15引言15-17 第一部分食物过敏动物模型的建立及评价31 1材料18-19 1.1建模动物18 1.2皮肤被动过敏试验(Passivecutaneousanaphylaxis,PCA)动物18 1.3主要仪器设备18 1.4主要试剂及材料19 1.5主要试剂配方19 2方法19-22 2.1实验动物分组19-20 2.2动物模型20 2.3评价指标20-22 2.3.1血清OVA-IgE检测20 2.3.2血清OVA-IgG检测20 2.3.3PCA试验20 2.3.4肠道病理切片观察20-22 2.4数据的统计分析22 3结果22-293.1模型的评价22 3.2血清OVA-IgE抗体检测22-29结果22-23 3.2.1时间、组别因素以及时间和组别之间的交互作用分析22 3.2.2每个时间点上两个组之间的差异比较结果22-23 3.3血清OVA-IgG抗体检测结果23-25 3.3.1时间、组别因素以及时间和组别之间的交互作用分析24 3.3.2每个时间点上两个组之间的差异比较结果24-25 3.4PCA实验结果25-26 3.5肠道病理切片结果图26-29 3.5.1十二指肠形态结构观察26 3.5.2空肠上段形态结构观察26-27 3.5.3空肠下段形态结构观察27-28 3.5.4回肠上段形态结构观察28 3.5.5回肠下段形态结构观察28-294讨论29-305结论30-31 第二部分食物过敏大鼠肠道通透性的变化研究31-39 1材料31-321.1主要仪器设备31 1.2主要试剂及材料31-322方法32-342.1肠道通透性的检测32-332.11双糖灌胃322.1.2收集尿液322.1.3尿L/M比值测定32-33 2.1.4标准曲线的制作33 2.2血清中OVA抗原含量的检测33-34 2.3数据的统计分析34 3结果34-38 3.1肠道通透性的检测34-37 3.1.1乳果糖的标准曲线图34-35 3.1.2甘露醇的标准曲线图35-36 3.1.3BN大鼠肠道通透性的动态变化检测36-37 3.2血清中OVA的抗原含量检测37-38 4讨论38 5结论38-39 第三部分食物过敏大鼠肠道TJ结构形态学及相关分子变化的研究39-56 1材料39-40 1.1主要仪器设备39 1.2主要试剂及材料40 2方法40-42 2.1肠道TJ结构的电镜观察40 2.2基因芯片检测整个肠道TJ结构所有结构蛋白的变化情况40 2.3选择变化明显的结构蛋白进行验证42 2.3.1肠段总RNA提取40-41 2.3.2cDNA的合成41 2.3.3cDNA的质量检测41 2.3.4实时荧光定量PCR41-42 2.4数据的统计分析42 3结果52 3.1肠道TJ结构的电镜观察42-43 3.2基因芯片检测结果43-45 3.2.1表达变化的基因列表44 3.2.2TJ蛋白信号通路变化44-45 3.3TJ相关蛋白的mRNA水平检测45-52 3.3.1引物设计45-46 3.3.2RNA提取的鉴定46-47 3.3.3cDNA合成质量的
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