外界因素对酶活性的影响

外界因素对酶活性的影响第一页，共十一页，2022年，8月28日(一)pH值对酶活性的影响酶的活性受环境pH的影响极为显著，通常各种酶只有在一定的pH范围内才能表现它的活，一种酶表现其最高活性时的pH值称为该酶的最适pH。高于或低于最适pH值时，酶的活性降低。酶的最适pH值受酶的纯度、底物的种类和浓度、缓冲液的种类和浓度以及环境温度等条件影响。

(二)温度对酶活性的影响每种酶都有其最适温度，高于或低于此温度酶的活性都降低。一般而言，酶处于过高的温度环境中，会使酶活性永久地丧失；而处于极低温度的环境中只会使酶活性受到抑制，一旦温度适宜，酶又会全部或部分地恢复其活性。第二页，共十一页，2022年，8月28日(三)酶浓度对酶促反应速度的影响在其它条件不变的情况下，若反应物浓度大大高于酶浓度时，则反应速度随酶浓度增加而增加，两者间成正比关系，即：V=k[E]

但若反应底物浓度较低，而且酶的浓度足够高时，增加酶浓度，反应速度基本不变。

(四)离子对酶活性的影响就唾液淀粉酶而言，低浓度Cl一可以增加酶活性，高浓度的Cl一或者低浓度的Cu2+则会抑制酶的活性，而低浓度的Na+、SO42-等对酶活性没有影响。不同的酶对不同的离子具有不同的效应。第三页，共十一页，2022年，8月28日

三、实验操作

(一)pH对酶活性的影响1．缓冲溶液的配制取6只洁净的三角烧瓶，按表1编号和加试剂：表1.磷酸氢二钠一柠檬酸缓冲溶液的配制三角烧瓶编号123456pH值5.46.26.87.07.48.00.2mol／L磷酸氢二钠(m1)

11.1513.22

15.45

16.47

18.17

19.45

0.1mol／L柠檬酸(m1)

8.85

6.78

4.55

3.53

1.83

0.55第四页，共十一页，2022年，8月28日2.pH对酶活性的影响

取6支洁净试管，分别编号后，按表2操作：表2pH对酶活性的影响管号

123456pH值

5.46.26.87.07.48.0缓冲液量(m1)

333333含NaCl的0.5％淀粉(m1)

222222稀释100倍唾液(m1)

222222充分摇匀

37℃保温，lmin后，用滴管从3#管中吸l滴反应液，放白瓷板用碘液检验(1滴)。以后每隔1min检验一次。当3#管反应液遇碘液呈淡黄色时，立即向6支管中加碘液

碘液(滴)

222222充分摇匀实验结果

第五页，共十一页，2022年，8月28日(二)温度对酶活性的影响取3支洁净试管，按表3操作：

表3温度对酶活性的影响管号

123pH6.8磷酸缓冲液(m1)

222含NaCl的O.5％淀粉液(m1)

222稀唾液1：50(m1)111立即处理温度0℃100℃37℃

放置15min分别从l、2、3支试管中取出一滴在白瓷板上用碘液检验结果

改变处理温度至

37℃37℃37℃作用时间

15min再分别从1、2、3管中取出一滴在白瓷板上用碘液检验结果

第六页，共十一页，2022年，8月28日(三)酶浓度对酶活性的影响

1．取3支洁净试管，编号，按表4加入淀粉液，缓冲液，加毕后放人37℃恒温水浴中保温5min。表4酶浓度对酶活性的影响

管号

含NaCl的O．5％淀粉液

pH6.8的缓冲液

稀释唾液

褪色时间

105010013ml

2ml

1ml23ml

2ml1ml33ml

2ml1ml第七页，共十一页，2022年，8月28日

2．保温后，快速加不同浓度的稀释唾液，摇匀，立即放入37℃恒温水浴中。计时，并每隔1min从各管中取出1滴，用碘液检验，记录从加进酶液至碘液检验为橙黄色所需时间。第八页，共十一页，2022年，8月28日(四)离子对酶活性的影响取3支洁净试管，编号后按表5操作：表5离子对酶活性的影响管号

1231％NaCl(m1)

10.1％CuSO4(m1)

1蒸馏水(m1)

1O．1％淀粉液(m1)

333100倍稀释唾液(m1)

11137℃恒温15min，然后冷却

碘液(滴)

222结果

第九页，共十一页，2022年，8月28日五、实验建议(1)因各人的唾液淀粉酶活性有所差异，若某一碘液检验结果为全部变为淡黄色，或无一变为淡黄色，则需增大或减少唾液稀释倍数，或者改变酶作用时间。(2)配制缓冲液时，吸量要准确。(3)检验离子对酶活性影响时，切勿吸错或污染了试剂。

第十页，共十一页，2022年，8月28日六实验报告及作业1．以反应速度为纵坐标，pH值、温度或酶浓度为横坐标，作出反应速度和pH，温度或酶浓度的关系图。2．唾液淀粉酶的最适pH和最适温度是多少？如何进一步确定？

3.温度为0℃和100℃两支试管中反应液遇碘呈蓝色，其原因有何不同？若恢复最适温度，其结果为什么有差异？4.如何确定氯化钠中氯离子是激活剂，硫酸铜中