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文档简介
双向免疫扩散第1页/共9页2009.11.3指可溶性抗原与相应抗体在琼脂介质中相互扩散,彼此相遇,在比例适当处形成沉淀线。根据沉淀线的有无、形状和位置对抗原或抗体进行定性分析,也可用于抗体的半定量检测本次实验利用此原理进行抗体效价的测定。
实验原理第2页/共9页2009.11.3第3页/共9页2009.11.3抗体:抗IgG抗原:IgG巴比妥缓冲液1.5%琼脂(巴比妥缓冲液配制)载玻片、打孔器、微量进样器37℃水浴箱主要的试剂和器材第4页/共9页2009.11.3制板用移液管吸取4-4.5ml的琼脂,将其放到水平放置的载玻片上,待冷凝。打孔打梅花孔,各孔间的距离为0.7-0.8cm。实验步骤1第5页/共9页2009.11.3倍比稀释抗体(见下表)加样用微量进样器在各孔加样品10ul,中央孔加抗原,周围6孔分别加不同稀释度的抗体将玻片放在湿盒中,37℃18-24h123456生理盐水2525252525抗IgG502525252525第6页/共9页2009.11.3在抗原和抗体孔之间会看到白色的沉淀线。实验结果第7页/共9页2009.11.3将出现白色沉淀线的最高血清稀释度作为该抗体的效价。
例:该血清中抗IgG抗体的效价为1:4。
实验结论画出实验结果图并判断效价
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