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PAGEPAGE5专题5DNA和蛋白质技术过关检测(时间:60分钟,总分值:100分)一、选择题(共25小题,每题2分,共50分)1.以下表达错误的选项是()A.改变NaCl溶液的浓度只能使DNA溶解而不能使其析出B.在沸水浴中,DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色C.用电泳法可别离带电性质、分子大小和形状不同的蛋白质D.用透析法可去除蛋白质样品中的小分子物质答案:A2.在DNA提取过程中,最好使用塑料试管和烧杯,目的是()A.不易破碎B.减少提取过程中DNA的损失C.增加DNA的含量D.容易洗刷答案:B3.以下关于血红蛋白提取和别离的过程及原理的表达,正确的选项是()A.红细胞洗涤过程中要参加5倍体积的蒸馏水,重复洗涤3次B.将血红蛋白溶液放在质量分数为0.9%的NaCl溶液中透析12hC.凝胶装填在色谱柱内要均匀,不能有气泡存在D.蛋白质通过凝胶时,相对分子质量较大的移动速度慢答案:C4.以下有关“血红蛋白的提取和别离〞的相关表达,不正确的选项是()A.可通过SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定血红蛋白的纯度B.将血红蛋白溶液进行透析,其目的是去除相对分子质量较小的杂质C.血红蛋白释放时参加有机溶剂,其目的是使血红蛋白溶于有机溶剂D.整个过程不断用磷酸缓冲液处理,是为了维持血红蛋白的结构答案:C5.以下对有关实验的表达,正确的选项是()A.最先从凝胶色谱柱中别离出来的是相对分子质量大的蛋白质分子B.向初步纯化的DNA中参加二苯胺溶液,可直接观察到溶液呈蓝色C.加酶洗衣粉常用的酶制剂包括碱性脂肪酶、酸性蛋白酶等D.装填凝胶色谱柱时,下端的尼龙管应先关闭后翻开答案:A6.将粗提取的DNA丝状物分别参加物质的量浓度为0.14mol/L的NaCl溶液、物质的量浓度为2mol/L的NaCl溶液、体积分数为95%的冷酒精溶液中,然后用放有纱布的漏斗过滤,分别得到滤液P、Q、R以及存留在纱布上的黏稠物p、q、r,其中由于含DNA少可以丢弃的是()A.P、Q、RB.p、q、rC.P、q、R D.p、Q、r答案:C7.假设选择的实验材料为植物细胞,破碎细胞时要参加一定量的洗涤剂和食盐。参加食盐的目的是()A.利于DNA的溶解B.别离DNA和蛋白质C.溶解细胞膜D.溶解蛋白质答案:A8.下面不能影响DNA粗提取含量的是()A.选材B.洗涤剂的用量C.二苯胺的用量D.搅拌和研磨的程度答案:C9.粗提取DNA的最后一步用到冷却的酒精溶液,DNA会以白色丝状物的形态析出,其中每一根白色丝状物是()A.一条脱氧核苷酸链B.一个DNA分子C.扭结在一起的多个DNA分子D.一条染色体答案:C10.DNA的双螺旋结构解开的温度范围是()A.10~20℃ B.80~C.20~30℃ D.40~答案:B11.以下有关PCR技术的说法,不正确的选项是()A.PCR技术是在细胞外完成的B.PCR技术是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术C.PCR技术的原理与DNA复制的原理不同D.PCR技术的前提是有一段的目的基因的核苷酸序列答案:C12.关于DNA的复制,以下表达正确的选项是()A.DNA聚合酶不能从头开始合成DNA,只能从5'端延伸DNA链B.DNA复制不需要引物C.引物与DNA母链通过碱基互补配对进行结合D.DNA的合成方向总是从子链的3'端向5'端延伸答案:C13.PCR一般要经过三十屡次循环,从第二轮循环开始,上一次循环的产物也作为模板参与反响,由引物Ⅰ延伸而成的DNA单链作模板时将()A.仍与引物Ⅰ结合进行DNA子链的延伸B.无需与引物结合,在酶的作用下从头合成子链C.同时与引物Ⅰ和引物Ⅱ结合进行子链延伸D.与引物Ⅱ结合进行DNA子链的延伸答案:D14.PCR利用了DNA的热变性原理,PCR仪实际上也是一种能自动调控温度的仪器。以下对PCR过程中“温度的控制〞的说法,错误的选项是()A.PCR反响需要高温,是为了确保模板链是单链B.延伸的温度必须高于复性温度,而低于变性温度C.要用耐高温的DNA聚合酶D.需要耐高温的解旋酶答案:D15.复性温度是影响PCR特异性的较重要因素。变性后温度快速冷却至40~60℃A.由于模板DNA比引物复杂得多B.引物和模板之间的碰撞结合时机远远高于模板互补链之间的碰撞C.参加引物的量足够多而模板链数量少D.模板链加热解旋已经变性不可能再次结合答案:D16.在PCR过程中,一般进行自动控制的是()A.引物的设计B.反响成分的配制C.移液器枪头的更换D.温度由94℃→55℃→答案:D17.为了提取血红蛋白,从学校附近的屠宰场索取新鲜的猪血,对猪血处理的正确操作是()A.要在采血容器中预先参加抗凝血剂柠檬酸钠B.取血回来后,马上进行高速长时间离心C.将离心后的血细胞参加清水缓慢搅拌D.重复洗涤直到上清液呈红色为止答案:A18.利用离心法纯化蛋白质主要是利用了蛋白质的 ()A.结构与组成B.种类和数量C.大小和密度D.所携带电荷的多少答案:C19.有资料显示,在非洲,作为镰刀形细胞贫血症基因携带者更能适应于当地的环境。有人认为这种人的血红蛋白可能与正常人或镰刀形细胞贫血症病人的有一定差异。为证实这种猜测,需对携带者的血红蛋白进行实际的检测,而欲要检测,就必须别离得到这种血红蛋白。试想别离提纯镰刀形细胞贫血症携带者(Aa)的血红蛋白时,用不到的药品或仪器是 ()A.琼脂糖 B.磷酸缓冲液C.离心机 D.自来水答案:D20.以下有关PCR技术的表达,错误的选项是()A.PCR技术一定需要解旋酶和DNA聚合酶B.DNA聚合酶不能从头开始合成DNA,而只能从引物的3'端延伸DNA链C.PCR的引物的根本单位是脱氧核苷酸或核糖核苷酸D.扩增DNA时,需要参加两种引物答案:A21.以下关于高中生物学实验的根本原理,表达不正确的选项是()A.噬菌体须在活菌中增殖培养是因其缺乏独立的代谢系统B.提取组织DNA是利用不同化合物在溶剂中溶解度的差异C.成熟植物细胞在高渗溶液中发生质壁别离是因为细胞壁具有选择透(过)性D.PCR呈指数扩增DNA片段是因为上一轮反响产物可作为下一轮反响模板答案:C22.对含血红蛋白的样品透析和洗脱均用到磷酸缓冲液。磷酸缓冲液的pH依次为()、8.0 B.8.0、5.0C.7.0、8.0 D.7.0、7.0答案:D23.在血红蛋白别离过程中,如果红色带区歪曲、散乱、变宽,与其有关的主要是()A.样品的处理B.凝胶色谱柱的装填C.洗脱过程D.凝胶色谱柱的制作答案:B24.下表是关于DNA的粗提取与鉴定实验中所使用的材料、操作及其作用的表述,正确的选项是()试剂操作作用A柠檬酸钠溶液与鸡血混合保持细胞形状B蒸馏水与鸡血细胞混合防止血液凝固C蒸馏水参加到溶解有DNA的NaCl溶液中析出DNA丝状物D冷却的酒精参加到过滤后含DNA的NaCl溶液中产生特定的颜色反响答案:C25.以下图甲是用DNA测序仪测出的某人DNA片段的碱基排列顺序。图乙是DNA测序仪测出的另外四个DNA片段的碱基排列顺序,请认真比拟这四幅图,其中与所给样本碱基排列顺序最相似的是()答案:C二、非选择题(共4小题,共50分)26.(8分)关于“DNA的粗提取与鉴定〞的实验装置如以下图。 (导学号52260068)(1)实验材料选用鸡血细胞液,而不用鸡全血,主要原因是鸡血细胞液中含量较高。
(2)在图A所示的实验步骤中,加蒸馏水20mL的目的是。通过图B所示的步骤取得滤液,再在滤液中参加物质的量浓度为2mol/LNaCl溶液的目的是。图C所示实验中加蒸馏水的目的是。
(3)为鉴定实验所得丝状物的主要成分是DNA,可用在沸水浴的条件下呈现。
解析:(1)鸡血细胞中含较多的DNA,而血浆中不含DNA,因此,实验材料应用鸡血细胞液而不用鸡全血。(2)要明确区别两次加蒸馏水的目的,第一次目的是让鸡血细胞吸水涨破,释放出DNA;第二次加蒸馏水是为了降低NaCl溶液的浓度,使溶解于物质的量浓度为2mol/LNaCl溶液中的DNA析出。(3)此题考查DNA的鉴定,可以加二苯胺,在沸水浴的条件下变蓝色。答案:(1)DNA(2)使血细胞吸水涨破,释放出DNA使滤液中的DNA溶于盐溶液使DNA析出(3)二苯胺蓝色27.(12分)PCR(多聚酶链式反响)技术是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术,以下图表示合成过程,请据图分析答复以下问题。(1)A过程高温使DNA变性解旋,对该过程的原理表达,正确的选项是()A.该过程用到耐高温的解旋酶破坏氢键B.该过程用到限制酶破坏磷酸二酯键C.该过程不需要解旋酶的作用D.该过程与人体细胞的过程完全相同(2)C过程要用到的酶是。这种酶在高温下仍保持活性,因此在PCR扩增时可以参加,(需要/不需要)再添加。PCR反响除提供酶外,还需要满足的根本条件有
。
(3)如果把模板DNA的两条链用15N标记,游离的脱氧核苷酸不做标记,控制“95℃~55℃~72℃〞温度循环3次,那么在形成的子代DNA中含有15(4)如果模板DNA分子共有a个碱基对,其中含有胞嘧啶m个,那么该DNA复制10次,需要参加胸腺嘧啶脱氧核苷酸个。
(5)PCR中由碱基错配引起的变异属于。假设对一个DNA进行扩增,第一次循环时某一条模板链上发生碱基错配,那么扩增假设干次后检测所用DNA的扩增片段,与原DNA相应片段相同的占。
解析:(1)高温所起的作用类似于解旋酶,使双链DNA变为单链。(2)C过程为PCR技术的延伸阶段,当系统温度上升至72℃左右,溶液中的四种脱氧核苷酸在DNA聚合酶的作用下合成新的DNA链。Taq(3)PCR技术遵循半保存复制的特点。经过三次循环,共产生23个DNA分子,其中有2个DNA分子含有15N标记。(4)在一个双链DNA分子中,C+T占碱基总数的一半,故T的数目为a-m,复制10次,相当于新增加了(210-1)个DNA分子。故需补充T的数目为(210-1)(a-m)。(5)基因中的碱基对改变属于基因突变。对一个DNA进行扩增,第一次循环时某一条模板链上发生碱基错配,第二次以后按正常配对方式进行扩增,错配链作模板扩增的都是错误的DNA分子,原正常链扩增得到的DNA分子都是正常的DNA分子,故假设干次后检测所用DNA的扩增片段,与原DNA相应片段相同的占3/4。答案:(1)C(2)TaqDNA聚合酶一次性不需要DNA模板、引物、四种脱氧核苷酸、适当的温度(3)25%(4)(210-1)(a-m)(5)基因突变75%28.(14分)下面是凝胶色谱法别离蛋白质时样品的参加(图Ⅰ)和洗脱(图Ⅱ)示意图,请据图答复以下问题。(1)在加样示意图中,正确的加样顺序是
。
(2)用吸管加样时,应注意正确操作,分别是:①;
②;
③。
(3)等样品时,才参加缓冲液。
(4)别离血红蛋白时,待接近色谱柱底端时,用试管收集流出液,每mL收集一管,连续收集。
解析:进行凝胶色谱操作加样时,加样前,翻开色谱柱下端的流出口,使柱内凝胶面上的缓冲液缓慢下降到与凝胶面平齐,用吸管小心地将1mL透析后的样品加到色谱柱的顶端,注意不可破坏凝胶面。吸管应贴着管壁加样,待样品完全进入凝胶层后才可关闭下端出口,参加缓冲液,待红色的蛋白质接近色谱柱底端时,用试管收集流出液,每5mL收集一管,连续收集。答案:(1)④→①→②→③(2)不要触及破坏凝胶面贴着管壁加样使吸管管口沿管壁环绕移动(3)完全进入凝胶层(4)红色的蛋白质529.(16分)如今人类已跨入了蛋白质时代,对蛋白质的研究和应用,首先需要获得高纯度的蛋白质。请答复以下问题。 (导学号52260069)(1)蛋白质的提取和别离一般分为四步:、、 和纯度鉴定。
(2)如果要从红细胞中别离出血红蛋白,实验前取新鲜血液要在采血容器中预先参加柠檬酸钠,这样做的目的是。
(3)血红蛋白的提取又可以细分为:红细胞的洗涤、、别离血红蛋白溶液和。其中别离血红蛋白溶液时需要用到(仪器)别离出下层红色透明液体。
(4)装填凝胶色谱柱时,要注意色谱柱内不能有气泡存在,一旦发现有气泡必须重新装。这是因为
。
(5)欲探究色谱柱的高度是否是影响蛋白质别离的因素,应把
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