头孢氨苄原料药含量测定

头孢氨苄原料药含量测定第1页/共31页头孢氨苄原料药含量测定

第2页/共31页一、试剂及仪器头孢氨苄原料药头孢氨苄对照品高效液相色谱仪流动相：水-甲醇-3.86％醋酸钠溶液-4％醋酸溶液（742:240:15:3）第3页/共31页高效液相色谱法的应用：定性：保留时间（tR）、相对保留时间（t′R）定量：峰高（h）、峰面积（A）第4页/共31页储液罐控制系统脱气泵进样阀色谱柱检测器收集器数据处理系统自动进样第5页/共31页二、实训内容对照品：头孢氨苄统适应性实验：证明仪器工作良好供试品：头孢氨苄粉末+流动相第6页/共31页测定含量方法外标法：精密称取对照品和供试品，配制成溶液，分别精密取一定量，注入仪器，记录色谱图，测量对照品和供试品溶液中待测成分的峰面积（或峰高），按下式计算含量：含量（Cx）=CRAX/AR

式中：

AX为供试品（或其杂质）峰面积或峰高

Cx为供试品（或其杂质）的浓度

AR为供试品（或其杂质）峰面积或峰高

CR为供试品（或其杂质）的浓度第7页/共31页加校正因子测定供试品中某个杂质或主成分含量，测量对照品和内标物质的峰面积或峰高，按下式计算校正因子：

A<[s]>／C<[s]>校正因子（f）＝───────

A<[R]>／C<[R]>式中A<[s]>为内标物质的峰面积或峰高；

A<[R]>为对照品的峰面积或峰高；

C<[s]>为内标物质的浓度；

C<[R]>为对照品的浓度。

内标法：第8页/共31页取含有内标物质的供试品溶液，注入仪器，记录色谱图，测量供试品中待测成分（或其杂质）和内标物质的峰面积或峰高，按下式计算含量：

A<[x]>含量(C<[x]>)＝f·───────A<[s]>／C<[s]>式中A<[x]>为供试品（或其杂质）峰面积或峰高；

C<[x]>为供试品（或其杂质）的浓度。

f、A<[s]>和C<[s]>的意义同上。第9页/共31页

（按结构与性质）

β–内酰胺类、氨基糖苷类、四环素类、大环内酯类、氯霉素类、多肽类、抗肿瘤类、林可霉素类、其他抗生素类抗生素的分类第10页/共31页

β–内酰胺类抗生素

青霉素类第11页/共31页头孢菌素类第12页/共31页酸性结构与性质Na与碱金属(Na+、K+)成盐

（一）羧基

易溶于水

第13页/共31页（二）手性C

头孢菌素类C6C7青霉素类C3C5C6

旋光性﹡﹡﹡﹡﹡第14页/共31页

（三）共轭体系

头孢菌素类母核有共轭体系

青霉素类母核无明显UV

多数有苯环取代基

UV第15页/共31页青霉素钠UV7-20第16页/共31页头孢氨苄紫外吸收图第17页/共31页（四）β–内酰胺环

水溶液：不稳定

干燥纯净：稳定

不稳定性因素四元环张力大

酰胺键易水解

第18页/共31页K+、Na+反应（一）鉴别

焰色→鲜黄色

+醋酸氧铀锌→↓黄

Na+

焰色→紫色

+0.1%四苯硼钠+Ac→↓白

K+第19页/共31页（二）呈色反应1.羟肟酸铁反应2.与H2SO4-HNO3反应第20页/共31页3.茚三酮反应△

α-氨基第21页/共31页（三）沉淀反应1.遇酸→↓在过量HCl或有机溶剂中溶解↓第22页/共31页2.有机胺盐反应（1）重氮化-偶合反应

重氮化-偶合反应芳伯氨基第23页/共31页2、IR法β-内酰胺环酰胺青霉素钠的红外光吸收图谱第24页/共31页

含量测定第25页/共31页（水解）碘量法（一）1.原理水解产物定量过量剩余β-内酰胺类ChP第26页/共31页

1.水解反应(按化学计算量进行)2.氧化-还原反应(无固定的量关系，受温度、PH值和时间等因素影响，应严格控制反应条件并采用标准品平行对照测定)反应分两步进行第27页/共31页（二）电位配位滴定法（汞量法）1.原理（水解）青霉素族ChP第28页/共31页2.方法

样品NaOH水解HNO3

醋酸盐缓冲液

PH4.6

Hg（NO3）2滴定V样（总