β内酰胺类抗生素颜色反应快速鉴别系统讲义北京修改

β内酰胺类抗生素颜色反应快速鉴别系统讲义北京修改第1页/共53页β－内酰胺类抗生素包含的品种较多，剂型几乎覆盖了抗生素类药品所能应用的全部剂型。β－内酰胺类抗生素的结构特点（共性）

母核含有四元β-内酰胺环。第2页/共53页结构分类

β-内酰胺类药物按骈合环可分为青霉素（骈合五元氢化噻唑环）、头孢菌素（骈合六元氢化噻嗪环）及碳青霉烯类三类。青霉素类头孢菌素类碳青霉烯类第3页/共53页采用羟肟酸铁反应可直接快速初步区分大部分β-内酰胺类抗生素与其他药物，且根据颜色的差异快速区分青霉素类与头孢菌素药物．可疑的β-内酰胺类抗生素羟肟酸铁反应假药β-内酰胺类抗生素青霉素类

头孢类深红色

桔红色第4页/共53页（一）呈色反应1.羟肟酸铁反应呈色β－内酰胺类NaOHH2NOH羟肟酸衍生物H+Fe3+第5页/共53页羟肟酸铁反应第6页/共53页H+Fe3+/3

（红、棕、褐）第7页/共53页（开环分解）似肽键双缩脲反应β-内酰胺类内酰胺类碱性酒石酸铜¾¾¾¾¾®¾-b碱性酒石酸铜反应蓝紫第8页/共53页碱性酒石酸铜反应第9页/共53页蓝紫色第10页/共53页Β－内酰胺类抗生素口服制剂注射用粉针剂片剂、胶囊颗粒剂、干混悬剂制剂分类按辅料不同第11页/共53页Β－内酰胺类抗生素片剂、胶囊注射用粉针剂辅料成分简单、干扰小制剂特点几乎不含辅料或仅含少量助溶剂，如精氨酸、碳酸钠颗粒剂干混悬剂辅料含量多、成分复杂、干扰大第12页/共53页主药含量少辅料成分多头孢氨苄颗粒【规格】0.125g0.05g香精色素严重干扰颜色反应结果第13页/共53页★β－内酰胺类抗生素

快检系统方法分类

按制剂中辅料的多少及种类分为三类：注射用粉针剂：几乎不含辅料或仅含少量助溶剂，如精氨酸、碳酸钠片剂、胶囊：辅料成分简单、干扰小颗粒剂、干混悬剂：辅料含量多、成分复杂、干扰大第14页/共53页注射用粉针青霉素类头孢菌素类碱性酒石酸铜反应三氯化铁反应H-033H-033颜色反应鉴别薄层色谱系统碱性酒石酸铜反应三氯化铁反应H-036β－内酰胺类抗生素的化学系统鉴别的总体思路羟肟酸铁反应第15页/共53页片剂青霉素类头孢菌素类羟肟酸铁反应碱性酒石酸铜反应三氯化铁反应H-033H-036颜色反应鉴别薄层色谱系统碱性酒石酸铜反应三氯化铁反应H-033第16页/共53页颗粒剂、干混悬剂碱性酒石酸铜(1-5)反应三氯化铁反应颜色反应鉴别薄层色谱系统H-034第17页/共53页羟肟酸铁反应β-内酰胺类抗生素青霉素类头孢类注射用粉针β－内酰胺类抗生素的化学系统鉴别的具体方法与步骤第18页/共53页

碱性酒石酸铜反应青霉素钠氯唑西林钠苯唑西林钠氨苄西林钠/舒巴坦钠阿莫西林钠/克拉维酸钾氨苄西林钠氨苄西林钠/氯唑西林钠阿莫西林钠美洛西林钠青霉素类第19页/共53页三氯化铁反应氨苄西林钠/舒巴坦钠阿莫西林钠/克拉维酸钾

氨苄西林钠氨苄西林钠/氯唑西林钠氨苄西林钠/舒巴坦钠阿莫西林/克拉维酸钾氨苄西林钠氨苄西林钠/氯唑西林钠第20页/共53页TLC阿莫西林钠/克拉维酸钾氨苄西林钠/舒巴坦钠氨苄西林钠/舒巴坦钠阿莫西林钠/克拉维酸钾第21页/共53页氯唑西林钠苯唑西林钠三氯化铁反应1%醋酸反应氯唑西林钠苯唑西林钠微桔红色或浅桔红色混浊或沉淀,有颗粒挂壁第22页/共53页碱性酒石酸铜反应头孢他啶头孢曲松钠头孢唑肟钠头孢拉定头孢唑林钠头孢噻吩钠头孢呋辛钠头孢哌酮钠头孢哌酮钠/舒巴坦钠蓝色变墨绿色溶液墨绿色变棕黄色美洛培南亚胺培南/西司他丁头孢菌类第23页/共53页三氯化铁反应头孢他啶头孢曲松钠TLC头孢曲松钠头孢他啶头孢唑肟钠头孢拉定头孢他啶头孢曲松钠头孢唑肟钠头孢拉定墨绿色变棕黄色第24页/共53页头孢唑林钠头孢噻吩钠头孢呋辛钠头孢哌酮钠头孢哌酮钠/舒巴坦钠蓝色变墨绿色溶液三氯化铁反应头孢唑林钠头孢噻吩钠TLC头孢唑林钠头孢噻吩钠头孢呋辛钠头孢哌酮钠头孢哌酮钠/舒巴坦钠H-033第25页/共53页TLC头孢呋辛钠头孢哌酮钠头孢哌酮钠/舒巴坦钠头孢呋辛钠头孢哌酮钠头孢哌酮钠/舒巴坦钠H-033第26页/共53页TLC美洛培南亚胺培南/西司他丁H-033美洛培南

亚胺培南/

西司他丁三氯化铁反应第27页/共53页片剂胶囊β-内酰胺类抗生素羟肟酸铁反应阿莫西林阿莫西林/克拉维酸钾氨苄西林青霉素V钾头孢拉定头孢氨苄头孢羟氨苄头孢呋辛酯盐酸头孢他美酯头孢泊肟酯头孢克洛第28页/共53页阿莫西林阿莫西林/克拉维酸钾氨苄西林青霉素V钾碱性酒石酸铜反应青霉素V钾阿莫西林

阿莫西林/

克拉维酸钾

氨苄西林第29页/共53页三氯化铁反应

氨苄西林TLC阿莫西林阿莫西林克拉维酸钾H-035阿莫西林

阿莫西林/

克拉维酸钾

氨苄西林第30页/共53页头孢拉定头孢氨苄头孢羟氨苄三氯化铁反应头孢拉定头孢氨苄头孢羟氨苄TLC头孢拉定头孢氨苄第31页/共53页头孢呋辛酯盐酸头孢他美酯头孢泊肟酯碱性酒石酸铜反应头孢呋辛酯盐酸头孢他美酯头孢泊肟酯第32页/共53页颗粒剂干混悬剂β-内酰胺类抗生素三氯化铁反应头孢氨苄/甲氧苄啶头孢拉定头孢氨苄头孢羟氨苄头孢克洛阿莫西林阿莫西林/克拉维酸钾头孢克肟头孢泊肟酯头孢地尼第33页/共53页头孢氨苄/甲氧苄啶头孢拉定头孢氨苄头孢羟氨苄头孢克洛阿莫西林阿莫西林/克拉维酸钾头孢克肟碱性酒石酸铜反应（1→5）头孢氨苄/甲氧苄啶头孢氨苄头孢拉定头孢克洛阿莫西林阿莫西林/克拉维酸钾头孢克肟深蓝紫色浅墨绿色头孢羟氨苄墨绿色深红色深棕色第34页/共53页头孢克洛阿莫西林阿莫西林/克拉维酸钾TLC头孢克洛阿莫西林阿莫西林克拉维酸钾H-034第35页/共53页操作要点及注意事项颜色反应第36页/共53页颜色反应鉴别

一些品种（制剂）的羟肟酸铁反应和三氯化铁反应，反应后溶液的颜色深浅及溶液状态（澄清、浑浊、沉淀等）的判断受实验人员的主观因素的影响较大。为便于判断，标准正文中采用以“或”连接几种颜色、状态的方法进行叙述，举例如下：第37页/共53页注射用粉针剂的羟肟酸铁反应：桔红色、深桔红色或浅桔红色混浊或溶液，照片如下：第38页/共53页注射用粉针剂的三氯化铁反应：微桔红色或浅桔红色混浊或沉淀，照片如下：第39页/共53页颗粒剂、干混悬剂的三氯化铁反应：桔红色、深桔红色或浅桔红色，照片如下：第40页/共53页一些品种（制剂）的碱性酒石酸铜反应，反应现象是颜色渐变的过程，如“深葡萄紫色变深棕色”、“墨绿色变棕黄色”、“蓝色变墨绿色”、“深葡萄紫色变深墨绿色”等，且变化速度的快慢依品种各异。因此，操作该反应时需仔细观察现象。第41页/共53页样品的溶解性对颜色结果的影响注射用亚胺培南西司他丁加水溶解时，发现溶解性不好使供试品溶液出现混浊，但不影响反应现象的观察和结果的判断．第42页/共53页辅料对颜色反应结果的影响

由于注射剂辅料较少直接溶解即可，不需过滤；片剂和胶囊剂过滤与否对结果影响不大，本实验仍以取粉末加溶剂溶解，取上清夜直接加入试剂后观察颜色为主；颗粒剂干混悬剂用普通的过滤方法很难过滤，辅料对实验结果会产生一定影响，大部分颗粒剂仍以取粉末加溶剂溶解，取上清夜直接加入试剂后观察颜色，参考快检手册的图片仔细观察颜色第43页/共53页薄层色谱操作要点及注意事项第44页/共53页展开系统适用的品种和制剂参比药品H-033号

大部分粉针剂头孢唑啉H-036号

注射用头孢拉定、注射用头孢曲松钠、注射用头孢他啶、注射用头孢唑肟钠头孢拉定H-035号

青霉素类片剂、胶囊头孢克洛H-034号头孢菌素类片剂、胶囊全部颗粒剂、干混悬剂头孢克洛操作要点第45页/共53页选择参比物的依据展开系统组分配比参比药品Rf值H-033号乙酸乙酯－丙酮－冰醋酸－水（５：２：２：１）头孢唑啉0.70~0.72H-036号乙酸乙酯－乙醚－二氯甲烷－甲酸（５：４：５：６）头孢拉定0.64~0.69H-035号乙酸乙酯－丙酮－冰醋酸－水（５：２：２：０.５）头孢克洛0.20~0.24H-034号乙酸乙酯－乙醚－二氯甲烷－甲酸（５：４：５：4）头孢克洛0.33~0.42第46页/共53页Rf值的计算Rf值的计算应以UV254nm下检视的斑点位置为准（舒巴坦钠以碘蒸气熏蒸后的斑点位置计），注意从斑点前沿开始测量。以Rf值结合相对Rf值定性的稳定性和重现性比单独以Rf值定性高。第47页/共53页展开剂在展开过程的挥发问题由于本系列的展开剂中有乙醚和甲酸，挥发性较强，在展开过程中一定要注意圆形展开缸的密闭性，解决方案：在展开缸的盖子与缸的接触的地方要均匀涂布真空硅脂，且用夹子夹好．第48页/共53页注意事项舒巴坦钠UV254nm下检视无斑点，经碘蒸气熏蒸后斑点颜色依然较浅，操作时需仔细观察。第49页/共53页

供试品溶液的制备：参照【取样方法参照表】取本品一包，按标示量加入稀乙醇，振摇2～3分钟，制成每1ml约含25mg阿莫西林的溶