妇产科资料贡献

妇产科资料贡献第1页/共48页2研究背景卵巢癌是女性三大生殖道恶性肿瘤之一，发病率为2.4%-5.6%，仅次于宫颈癌和宫体癌卵巢深居盆腔，早期临床症状不明显发展迅速，极易出现盆腹腔播散和淋巴结转移，手术或化疗后的高复发率也是造成死亡率高居不下的原因之一寻找卵巢癌特异性标志物，早期诊断及防止卵巢癌的扩散、转移及复发成为当今防治卵巢癌的关键第2页/共48页3研究背景基底膜和胞外基质的降解是当今肿瘤学研究的重点和难点。（图1）多种蛋白酶在分解细胞外基质和基底膜中起着极其重要的作用，尤其是基质金属蛋白酶类和丝氨酸蛋白酶类

MMP-7和uPA分别属于基质金属蛋白酶类和丝氨酸蛋白酶类第3页/共48页4

LamininRⅣMMP7ＵPＡＵＰＡＵＰＡMMP7MMP7第4页/共48页5MMP-7概述MMP-7是基质金属蛋白酶家族中唯一的由上皮性肿瘤细胞特异表达的酶MMP-7是一种锌离子依赖性的蛋白水解酶MMPs是一多基因家族，目前已经分离并鉴定出这一家族约有13个成员，作用底物不尽相同第5页/共48页6

分型MMP序号

底物间质胶原酶MMP-1、-8、-13、-18Ⅰ～Ⅲ型胶原及Ⅶ和Ⅹ型胶原Ⅳ型胶原酶（明胶酶）MMP-2、-9Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型胶原，切割天然Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅺ型胶原基质溶解素MMP-3、-7、-10纤粘蛋白、层粘蛋白、弹性蛋白和多糖核心蛋白膜型MMPsMMP-14、-15、-16、MT5-MMP直接降解基质，激活MMP-2和MMP-13其它类MMP-4、-5、-6、-20未知StetlerStevenson将MMPs分类及底物特性总结如下表第6页/共48页7MMP-7的独特性MMP-7不含有类血红素结合区，血管内皮细胞不分泌MMP-7MMP-7主要由纤维母细胞、巨噬细胞、肿瘤细胞所分泌MMP-7活化第7页/共48页8MMP-7Pro-MMP-7TC巨噬细胞TCTC纤维母细胞巨噬细胞纤维母细胞ECM、BM降解PLGPLMMMPs第8页/共48页9uPA概述uPA是PA的一种，与肿瘤浸润转移相关uPA由两条二硫键相连，N端包括表皮生长因子（EGF）功能区，它介导uPA与肿瘤细胞上uPAR结合，降解ECM、BM第9页/共48页10uPA的独特性uPA自身直接降解BM、ECMuPA通过激活纤溶酶降解纤维蛋白、纤维连接蛋白、蛋白多糖、板层素等uPA通过激活的纤溶酶激活基质金属蛋白酶参与ECM、BM降解第10页/共48页11TCuPA内皮细胞纤维母细胞巨噬细胞Pro-upa纤溶酶纤溶酶原uPA-RTCTCECM、BM降解TC第11页/共48页12本实验研究的内容和意义

采用免疫组化法检测正常卵巢组织、卵巢浆液性肿瘤中MMP-7和uPA的表达探讨MMP-7、uPA与卵巢浆液性囊腺癌浸润转移的关系及其相关性为卵巢浆液性囊腺癌术后的腹腔化疗及残存癌灶的复发提供可靠的理论依据第12页/共48页13

材料和方法取2000年至2006年兰大二院妇科手术切除并病理证实为卵巢浆液性肿瘤库存标本68例，年龄20-70岁.其中46例卵巢浆液性囊腺癌（恶性组），12例卵巢浆液性囊腺瘤（良性组），10例正常卵巢（正常组）临床分期：Ⅰ期--Ⅱ期14例；Ⅲ期--Ⅳ期32例病理分级：高分化10例，中分化16例、低分化20例经查阅患者病例将卵巢浆液性囊腺癌组分为：有盆腔浸润，腹膜淋巴转移组42例，无盆腔浸润，无腹膜淋巴转移组4例第13页/共48页14

主要仪器

低温冰箱、烘箱、微波炉、光学显微镜、显微照相系统、水浴振荡器、电热炉带盖的保湿器、耐高温塑料染色架、切片架、染色缸、吸水纸等第14页/共48页15实验方法本实验依照免疫组化的步骤进行第15页/共48页16

结果判定采用三个参数（即染色强度、阳性细胞数、和两者积分的乘积）的半定量的计数方法，着色强度记分标准：基本未着色,染色与背景相似者为0分;着色浅,略高于背景者为1分;中度着色,明显高于背景者为2分;强染,着色深棕色者为3分。阳性细胞数0%为0分，1%-10%为1分，11%-50%为2分，51%-80%为3分，＞80%为4分。染色强度记分与阳性细胞数记分之积为最后得分：0分为（-），1-2分为（+），3-4分为（++），＞4分为（+++）。第16页/共48页17

统计学方法应用SPSS10.0统计软件包进行统计分析组间采用卡方检验，双向有序列联分析例数不足40例采用费歇尔精确检测两指标间采用Spearsman等级相关分析取P<0.05为差异有统计学意义第17页/共48页18MMP-7和uPA在正常卵巢组织和卵巢浆液性肿瘤组织中的表达MMP-7在卵巢浆液性囊腺癌细胞的胞膜、胞浆和间质细胞的胞浆中均有阳性表达；主要表达于深部浸润的癌巢，尤其在浸润的前沿；在卵巢浆液性囊腺瘤细胞的胞浆和间质中也有阳性表达uPA蛋白在卵巢浆液性囊腺癌细胞的胞膜和胞浆中有阳性表达，分布不均,主要在肿瘤与周围正常组织交界处、肿瘤细胞与间质交界处第18页/共48页19MMP-7和uPA在正常卵巢组织和卵巢浆液性肿瘤组织中的表达

分组

例数

MMP-7uPA+%P+%P

正常组10110.0110.0

0.5940.323

良性组12216.7433.3

0.0010.001

恶性组464087.04087.0第19页/共48页20MMP-7和uPA在卵巢浆液性囊腺癌不同临床分期中的表达

MMP-7

uPA

分期例数++++++

++++++Ⅰ-Ⅱ期142210166

Ⅲ-Ⅳ期3287117218第20页/共48页21MMP-7和uPA在卵巢浆液性囊腺癌不同病理分级中的表达

MMP-7

uPA分级例数++++++

++++++

高分化10

6

1

1

521

中分化16

2

6

6

248

低分化20

2

2

14

1215第21页/共48页22MMP-7及uPA与卵巢浆液性囊腺癌浸润转移的关系浸润MMP-7uPA转移例数+%P+%P

有423890.53992.9

0.0220.001

无4250.0125.0第22页/共48页23MMP-7和uPA表达的相关性

经Spearman等级相关分析得r=0.573，P<0.05,说明MMP-7与uPA的表达存在正相关，MMP-7的表达随uPA表达的增高而增高。第23页/共48页24MMP-7和uPA表达的相关性

MMP-7uPA-++++++合计-1822123+281213++12238++++1251624合计241392168第24页/共48页25

结论MMP-7和uPA在正常卵巢组织和卵巢浆液性肿瘤中均有表达MMP-7和uPA在卵巢浆液性囊腺癌表达明显高于卵巢浆液性囊腺瘤，MMP-7和uPA有助于卵巢浆液性肿瘤良恶性的判断MMP-7和uPA的表达随卵巢浆液性囊腺癌病理分级的降低、癌肿及淋巴转移而增高。uPA随临床分期的增高而增高MMP-7的表达强度与uPA的表达强度存在正相关第25页/共48页26MMP-7在正常卵巢生发上皮弱阳性表达S-Px200第26页/共48页27MMP-7在良性卵巢浆液性囊腺瘤中弱阳性表达SPx400第27页/共48页28MMP-7在卵巢高分化浆液性腺癌中弱阳性表达SPx200第28页/共48页29MMP-7在卵巢高分化浆液性腺癌中弱阳性表达SPx400第29页/共48页30MMP-7在卵巢中分化浆液性腺癌中强阳性表达SPx400第30页/共48页31MMP-7在卵巢低分化浆液性腺癌中强阳性表达SPx200第31页/共48页32MMP-7单个肿瘤细胞浸润SPx400第32页/共48页33MMP-7肿瘤细胞在间质浸润时呈强阳性表达SPx400第33页/共48页34图1.MMP-7在卵巢浆液性囊腺癌的强阳性表达SP×400

第34页/共48页35图2.uPA在卵巢浆液性囊腺癌中强阳性表达SP×400

Fig2StrongpositiveexpressionofuPAinOvariansero-uscystadenocarcinoma

第35页/共48页36图3.MMP-7在卵巢浆液性囊腺癌中的阳性表达SP×400

Fig3.PositiveexpressionofMMP-7inOvarianserouscystadenocarcinoma第36页/共48页37图4.uPA在卵巢浆液性囊腺癌中的阳性表达SP×400

Fig4.PositiveexpressionofuPAinOvarianserouscystadenocarcinoma第37页/共48页38图5.MMP-7在卵巢浆液性囊腺癌的弱阳性表达SP×400

Fig5.WeakpositiveexpressionofMMP-7inOvarianserouscystadenocarcinoma第38页/共48页39图6.uPA在卵巢浆液性囊腺癌中弱阳性表达SP×400

Fig6.WeakpositiveexpressionofuPAinOvarianserouscystadenocarcinoma第39页/共48页40图7.MMP-7在正常卵巢组织中的阳性表达

SP×400

Fig7.PositiveexpressionofMMP-7inNormalOvariantissues第40页/共48页41图8.uPA在正常卵巢组织中的阳性表达SP×400

Fig8.PositiveexpressionofuPAinNormalOvariantissues第41页/共48页42图9.MMP-7在卵巢浆液性囊腺瘤中的阳性表达SP×400

Fig9.PositiveexpressionofMMP-7in

ovarianserouscystaden第42页/共48页43图10.uPA在卵巢浆液性囊腺瘤中的阳性表达SP×400

Fig10.PositiveexpressionofuPAinovarianserouscystaden第43页/共48页44攻读硕士学位期间发表文章目