Agilent1100高效液相色谱仪使用与维护操作规程

可编辑可编辑精品精品Agilent1100高效液相色谱仪使用与维护操作规程已有1792023-7-1713:35起草部门起草部门分发部门质检部质检部被替代文件文件发放编号：目的制定Agilent1100高效液相色谱仪使用与维护操作规程，确保操作人员能正确标准地操作，维护液相色谱仪。适用范围适用于Agilent1100高效液相色谱仪的使用，维护。编写依据Agilent1100职责QC内容安全留意事项本仪器应良好接地，以防止触电及释放静电；本仪器常常处于高浓度的有机蒸汽环防护用品。仪器组成LC-10ATVP泵、7725Agilent1100测器、色谱工作站(N2023日常使用操作步骤开机WindowsCAGBootpServerHPLC1100模块电源，等仪器自检通过，并且与计算机通讯成功〔1～2min〕后，进入Online工作站。系统初始化〔主要目的：排解系统中的气泡〕翻开Purge溶剂比例成试验初始条件，并单击OK关闭Purge系统平衡〔主要目的：平衡、稳定色谱柱、柱温以及灯的能量〕调出本次试验所需方法，保持泵连续工作，以试验初始的流淌相冲洗、平衡柱子一〔一般约30min，可自己依据本人的仪器配置状况计算，要求至少以色谱柱几何体5～10〕在适当时间，开启柱温箱和检测器，使得柱温稳定，检测器灯的能量稳定〔一般20min〕SystemOnView菜单下的OnlineSignalChangeX、Y基线稳定后可以进样分析〔阅历上，基线波动1～2mAU〔常规分析〕或1～0.5mAU〔痕量分析〕就可算是基线稳定〕SampleInformation手动打针进样并切换进样阀泵的操作步骤及旧流淌相的更换流速的设定func“flow”Enter连续按funcEnterFunc至消灭SetSystemParam12〔在主泵上编写：时间(min)流淌相A(%，V/V)流淌相B(%，V/V)0851530010045010050851555STOP初始设定通过专用光纤将两个输液泵连接起来，输液管路连接完毕后，设定主泵〔A泵〕的SystemParam2,设定从泵〔B〕的SystemParam1；设定两泵的ADRS数为8；设定Local参数为1〔本地掌握A泵设定的值只对泵有效，BBAB设定初始条件在初始屏幕，按Func键，设定泵AB流速之和；按conc键，设定流淌相B15%，流淌相A100%-流淌相B%=85%编写程序a 按CE键返回初始屏幕按Edit键屏幕显示已经设定的程序步数和剩余的程序步数；b 按Enter键显示参数设定屏幕光标在Time区闪耀输入时间数值30分钟按Enter键。重复按FuncBCNC100%〔相应地，流淌相A浓度为0%，并且按Enter键确认。Enter键，光标在Time45分钟，按Enter重复按FuncBCNC100%〔相应地，流淌相A浓度为0%，并且按Enter键确认。Enter键，光标在Time50分钟，按Enter重复按Func键，直到显示BCNC15%〔相应地，流淌相A的相对浓度为85，并且按Enter键确认。按Enter键，光标在Time区闪耀，输入时间数值55分钟，按Enter键。i 重复按Func键，直到显示STOP，按Enter键确认。CECE在编程过程或完毕后，如觉察有错，按 BACK键或Enter键显示至出错的步骤按Shift+Ce(del)键即可删除。执行时间程序按下A泵的Run再按下Run键强制停顿时间程序，或程序中插入Stop命令。B泵的流速由ABBPumpBBBPumpBBRun键，否则会执行B时间程序，引起不正确的操作。排液180℃(排液阀旋转不要大于180℃,否则空气将进入排液阀,最终导致空气进入流淌相),按purge5分钟后，再按一下purge，停顿冲洗，关闭排液阀〔将排液阀旋钮顺时针方向留神旋转到底。当用排液的方法仍不能排解气泡时,可翻开排液阀,拔掉吸滤头,用注射器配上专用针头将10-20mL流淌相或纯化水强行从吸液管注入泵内自排液管流出,再装上吸滤头,重排液,即可排解故障.流淌相的更换依据旧流淌相是否互溶及旧流淌相是否为缓冲液选择更换流淌相的方法,如同时也更换色谱柱，则在更换流淌相前应卸下色谱柱。更换互溶的流淌相200mL100mL器，并将其放入装有流淌相的烧杯中，边摇动边清洗吸滤器以混匀流淌相；翻开排液阀，启动Purge闭排液阀；设定流速2～3mL/min；按Pump启动泵，以更换手动进样器中的流淌相；连接色谱1-2mL/min，按Pump更换不相溶的流淌相“A更换互溶的流淌相”中的步骤进展。更换缓冲液流淌相过滤纯化水置换整个管路，然后更换成的流淌相。这样可以防止缓冲液中的盐析出。色谱柱的安装色谱柱时应留意流向,以免安错；使用柱支架时，柱出口应向上。流路是否堵塞。紫外检测器的操作步骤power波长的设定230nm:首先按CE。显示初始屏幕。按一下func后,屏幕显示[LAMBDA](设定测量波长)*波长参数输入区闪耀,提示输入波长值。输入2,3,0并且按enter测量量程的设定:将AUXRANGE设为3AGILENT1100与维护操作规程)，按CE键返回初始屏幕；按数次func后,屏幕显示[AUXRANGE]输入3，按enterCE键返回初始屏幕。器启动后(等待稳定时)的检查将流速调整至分析用流速，按Pump键启动泵，对色谱柱进展平衡大约30分钟，漏液检查用枯燥滤纸片的边缘检查柱管各连接处应无渗漏,否则,要把漏液处紧固或更换零件。泵的压力检查输液泵的压力依据需要的压力和流淌相种类的不同有所差异,但变动的幅度应在0.5Mpa以内。在压力变动大时,再清洗一次,如还是不行,则应考虑单向阀内部、管路及色谱柱是否污染或堵塞，应以异丙醇清洗管路或请有阅历的修理人员拆开管路予以修理。基线检验待泵压力及基线稳定后，可开头分析测试操作，如为线性梯度洗脱，用初始比例的流淌相对色谱柱进展平衡。N2023翻开色谱数据工作站后，选择相应的串行口和通道。”键确认。按“试验信息”填写有关试验信息。按“数据采集”进入分析实时显示图框,即可查看基线。待基线稳定后,便可进展分析测试。测定操作检测器按zero数据,洗脱完毕后,按停顿采集。完毕记录色谱图。六通阀式进样器进样方法loa射器，再抽取适量，如用定量环载样，则注射器抽取量应不少于定量环容积的5倍，用微量注射器定容进样时，进样量不得多于环容积的50%，在排解气泡前方能向进样器中注入供试品溶液；把注射器的平头针直插至进样器的底部,注入供试品溶液，除另有规定外，注射器不应取下。把手柄转至注样位置injec，定量环内供试溶液即被流淌相带入流路。管路及色谱柱的冲洗谱柱及柱塞杆和柱塞杆密封圈的后部进展充分的冲洗。10〔150mm15mL〕的低浓度〔10～20%〕甲醇(或乙腈)水溶液冲洗,使色谱柱内的盐完全溶(50%/乙腈-水溶〔80～100%〕0，关泵，进样器也应用相应溶剂〔如，水〕冲洗，可使用进样器所附的专用冲洗接头。柱塞杆和柱塞杆密封圈的后部用大体积的注射器注水冲洗冲洗时将水的流向为右进左出。关机操作检测完后，并且色谱柱已充分冲洗完毕后,依次关闭检测器、高压输液泵、计算机、仪器使用前后状态等。留意事项、维护保养与故障排解留意事项觉察记录基线波动，消灭毛刺等现象，首先应考虑检测器流通池中是否有气泡或污染，如不是流通池引起，可等待氘灯稳定，同时检查仪器的接地是否良好，必要时，换上的氘灯，仪器稳定前方能进展操作。进样前，色谱柱应用流淌相充分冲洗平衡，如系统适用性不符合规定，或填充试验。以硅胶作载体的化学键合相填充剂的稳定性受流淌相pH具体参阅色谱柱说明书，在规定的pH值范围内选用流淌相，一般的pH2.5～7.5。使用高pH并尽可能缩短在高pH维护保养与故障排解色谱流路系统，从泵、进样器、色谱柱到检测器流通池，在分析完毕后，应按5.12项的规定充分冲洗，特别是用过含盐流淌相的，更应留意先用水，再用甲醇-水充分冲洗，如觉察泵漏液等较严峻的状况，应请有阅历的修理人员进展检查、修理。清洗的方法也不同,请参照附录或按柱的使用说明书进展。吸滤器〔次/2〕堵塞现象是吸入流淌相时进液管内持续产生气泡；进一步确认方法：取下装在泵头入口处的进液管，将管向上提起时，管中的液体下流速度慢〔5S。通51.0mL/min10管路过滤器〔次/6〕〔表现为在吸滤管路中形成气泡0.3MPa以上时〔Func功能的“ZeroAdj”进展压力值的零点修正。清洗或更换方法如下:用双扳手把管道过滤器拧松取下。用棉棒把管道过滤器接口处的污垢擦干净。把过滤器浸泡在异丙醇中,用超声波清洗5分钟。d 重安装管道过滤器。1mL/min0.3MPa器直接放在滤片上，用力压下。单向阀污染〔次/年〕假设泵的压力脉动大，在排解泵头内的气泡后，泵的输液压力脉动仍很大(>0.5MPa)时,应疑心单向阀污染，清洗的方法有如下两种:输液中单向阀的清洗储瓶中的溶剂换成异丙醇,放入吸滤器。松开柱两端的公螺母,从流路中取下色谱柱。用阻尼管把连接柱的两个端口接上。2ml/min1〔为了防止由于从泵单元上拆下管路而使流淌相从吸液管或泵头中流出,在卸下管路之前,应把储液瓶放在低于泵入口的位置。使用两个扳手留神松开入口和出口单向阀,并且取下它们，留意勿使宝石球脱出。5分钟。重将其安装在泵头上,用扳手适当紧固。封圈〔1/年〕的方法如下:首先在初始屏幕下不断按funcP-SET，设置为1，pump指示灯亮，然CESUS头的内侧及柱塞密封圈的安装处，用专用装卸工具的无阶梯的一瑞插上的柱塞密封圈。将柱塞密封圈垂直插入泵头上，拔出专用装卸工具。再重装上泵头，检查更换柱塞杆工具插入柱塞杆支架时,要留神,不要损坏柱塞杆。)取出柱塞杆后,用干净的纱布粘少许异丙醇擦净柱塞杆外表附着的密封圈渣末或污垢。(假设重安装时,附着密封圈渣末等污垢时,不能保证密封性。)使用眼睛观看柱塞杆外表是否有可见的划痕和裂痕,假设有,需要更换柱塞杆120L由于长时间的使用,排液阀的垫片或O形环会磨损,引起排液阀密封力量下降，O形环损坏时的现象为：O〔次/3。逆时针方向旋转排液阀的手柄并取下，查看密封垫片和O形环的外表是否损伤，是否干净，不干净时应去除异物，除去后仍旧漏液时应更换旋转轴或O在分析完高浓度的样品后，要用大量的流淌相将其彻底冲出流通池。假设使用缓冲溶液作流淌相,分析完毕后,务必用蒸馏水冲洗流通池和进样阀的针孔,由于缓冲溶液蒸发后会产生结晶而引起流通池和管路堵塞。当确因流通池受到污染,造成基线噪声过大或基线漂移时,要对流通池进展检查和清洗,方法如下:卸下流通池(不要从池室中取下塑料盖),保持管路的连接,使用泵输送流淌相,当流淌相流经管路时,通过池窗观看池室内是否有气泡或灰尘,假设有,清洗流通池。将异丙醇用注射器注入流通池中,清洗流通池,然后再用注射器把流淌相注入流通池中,进一步清洗流通池(清洗时,务必留意不要让任何气体进入管路)。松开并且取下池两边的池窗固定螺丝,同时取下垫圈,使用牙签或类似的工具从池两边取下透镜和池垫圈。使用异丙醇在超声波中清洗透镜5分钟,假设不能去除污物,要更换的透镜。注:⑴使用沾有异丙醇的干净布条清洗池室内外表。⑵拆开流通池后,要更换池垫圈。⑶使用之前肯定要去除垫圈上的灰尘。氘灯使用时间超过其寿命后，能量不够,造成很高的连续噪声,需要定期更换，220nm,连续按Func键直到显示SMPLEN/REFEN，REFEN800，再按数次Func，“/D2TIME2023电源开机自检时有反复预热动作。定期更换保险管〔/3年号的保险管。仪器报警报警信息ERR.LEAKDETECT(检查到漏液)，缘由是泄漏。方法是检查管路，擦净漏液。报警信息CHCKNOGOOD1nm，应用WAVECALIB附录液相色谱柱的使用及保存文件变更历史版本号版本号第一版实施日期变更描述变更人附录液相色谱柱的使用及保存使用前留意事项甲醇/液与待分析样品的流淌相之间是否互溶。有些色谱柱〔如氨基柱或氰基柱，既可用于正相体系，也可用于反相体系，如色谱柱中的贮存液为正相〔环己烷〕而使用条件为反相时，必需用异丙醇先置换掉色谱柱内的储存液，然后再用于反相条件，否则将会明显削减色谱柱的使用寿命。在反相色谱中，假设流淌相中缓冲盐的浓度较高>0.1mmol/10-20〕冲洗10-20mi盐在高浓度的有机相中很简洁析出，从而使色谱柱堵塞，无法恢复。色谱柱使用方向装色谱柱时应使流淌相流路的方向与色谱柱标签上箭头所示方向全都。除另有规定外，不宜反向使用，否则会导致色谱柱柱效明显降低，无法恢复。流淌相流淌相中所使用的各种有机溶剂应尽可能使用色谱纯0.45μm0.22μm的滤膜过滤。另外，装流淌pH2.5～7.5，应参阅色谱柱使用说明书，配制好流淌相后，必要时测定pH值，防止pH样品0.45μm0.2