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文档简介

(3)为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性,将分别含有A、B、C、D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置,培养一段时间后,含A的滤纸片周围出现透明圈,说明该致病菌对抗生素A______;含B的滤纸片周围没有出现透明圈,说明该致病菌对抗生素B_________;含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小,说明___________________________________;含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小,且透明圈中出现了一个菌落,在排除杂菌污染的情况下,此菌落很可能是抗生素D的__________________。(4)根据上述实验结果,为达到抗菌目的,最好选用抗生素____。A敏感不敏感该致病菌对C的敏感性比对A的弱耐药菌解析(1)在微生物的培养过程中,常用来分离微生物的方法是稀释涂布平板法和平板划线法。(2)为了使微生物在培养基上能够均匀分布,一般用稀释涂布平板法将微生物接种在培养基上。(3)在抗药性检验过程中,如果在菌落周围出现透明圈,说明此种抗生素可抑制该细菌;透明圈的大小表示此种抗生素抗菌效果的强弱。据此可判断抗菌效果强弱依次是A、C、B;D的透明圈中出现了一个菌落,说明该菌落对此种抗生素具有耐药性。第一页,共25页。2.(2014·四川理综,10)有机农药苯磺隆是一种除草剂,长期使用会污染环境。研究发现,苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分离降解苯磺隆的菌株和探索其降解机制的实验过程如图甲、乙所示。(1)微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、________________四类,该实验所用的选择培养基只能以苯磺隆作为唯一碳源,其原因是_____________________________________________。只有能利用苯磺隆的微生物能正常生长和繁殖氮源和无机盐第二页,共25页。(2)与微生物培养基相比,植物组织培养的培养基常需添加生长素和________________,这些植物激素一般需要事先单独配制成________保存备用。(3)纯化菌株时,通常使用的划线工具是________。划线的某个平板培养后,第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌,第二划线区域所划的第一条线上无菌落,其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有__________________________________________________________________________________________________。(4)为探究苯磺隆的降解机制,将该菌种的培养液过滤离心,取上清液做图乙所示实验。该实验的假设是____________________________________,该实验设计是否合理?为什么?________________________________。细胞分裂素母液接种环①接种环灼烧后未冷却;②划线未从第一区域末端开始目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白质不合理,缺少空白对照第三页,共25页。(时间:10分钟满分:50分)1.如图所示为分离分解纤维素的微生物的实验流程。回答下列相关问题:

(1)图中采集土样时,一般选择________丰富的环境。图中②过程所用的培养基以纤维素为唯一________,选择培养的目的是__________________________。纤维素碳源使纤维素分解菌得到增殖第四页,共25页。(2)图中③过程采用的接种方法为_______________(填“平板划线法”或“稀释涂布平板法”),所用的培养基中的染料是_______,该染料能与纤维素形成______复合物。图中④过程挑选菌落的标准是___________________。(3)常采用______________法对实验中所用的培养基进行灭菌。解析(1)纤维素分解菌大多分布在富含纤维素的环境中,选择培养基应以纤维素为唯一碳源。选择培养的目的是使那些能够适应选择培养基中的营养条件的微生物得到迅速繁殖。(2)将样品用稀释涂布平板法接种到鉴别培养基上。刚果红是一种染料,它可以与纤维素形成红色复合物,挑选菌落时应选那些周围有透明圈的菌落。(3)对培养基常采用的灭菌方法为高压蒸汽灭菌法。稀释涂布平板法刚果红红色菌落周围有透明圈高压蒸汽灭菌第五页,共25页。2.(2016·广东佛山质检)我国规定每升饮用水中大肠杆菌不能超过3个。某兴趣小组尝试对某品牌饮用水的大肠杆菌含量进行检测,操作简图如图甲,伊红美蓝培养基配方如图乙。回答下列相关问题:(1)图甲中滤膜的孔径应________(“大于”或“小于”)大肠杆菌。受此启发,对某些不耐高温的试剂可以怎样除菌?_______________________。小于用滤膜过滤除菌第六页,共25页。(2)配制图乙中的基础培养基时,除了水分、无机盐以外,还应加入________(一种营养成分),以及________。伊红美蓝培养基上生长的大肠杆菌菌落呈现黑色,从功能上划分,该培养基属于________培养基。(3)该小组通过统计________的数目,计算出单位体积样品中大肠杆菌数目。理论上他们的统计值要比实际________(“偏高”或“偏低”),理由是_____________________________________________________________。氮源琼脂鉴别黑色菌落偏低两个或多个大肠杆菌连在一起时,平板上只能观察到1个菌落3.(2016·广东广州考前热身)当水源不洁或供水管道破损等可能导致生活饮用水的污染,因此生活饮用水的微生物安全性日常检测是很重要的,我国生活饮用水水质标准中规定生活饮用水中细菌总数不得大于100个/mL,总大肠杆菌群不得大于3个/L。第七页,共25页。(1)检验细菌的数量时,通常将水样进行一系列的梯度稀释,再将水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养,这种方法称为________________。记录细菌数量除了用活菌计数法,还可以直接取水样用________________________________________法直接进行计数。(2)培养基中应含有碳源、________________和水等物质,若要从水体中分离出纤维素分解菌,则碳源应为______。(3)如分别取0.1mL已稀释10倍的水样分别涂布到四个琼脂固体培养基的表面进行培养,培养基记录到大肠杆菌的菌落数分别为3、2、2、1,则该水样________(符合/不符合)我国生活饮用水标准。(4)纯化大肠杆菌时使用的培养基一般用______________法灭菌,________(可/不可)用加入抗生素的方法防止杂菌感染,原因是_____________________________________________________________________________________。稀释涂布平板法显微镜直接计算(血细胞计数板计数法)氮源、多种无机盐纤维素不符合高压蒸汽灭菌不可大肠杆菌也是细菌,如果加入抗生素也会影响大肠杆菌的生长第八页,共25页。4.(2016·广东江门调研)幽门螺杆菌(Hp)感染是急慢性胃炎和消化道溃疡的主要致病因素,在患者体内采集样本并制成菌液后,进行分离培养。实验基本步骤如下:请回答:(1)在生物学中,将允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生物的培养基,称做____________。(2)配制培养基时,要加入尿素和________指示剂,这是因为Hp含有________,它能以尿素作为________源;若有Hp,则菌落周围会出现________色环带。(3)步骤X表示________。在无菌条件下操作时,先将菌液稀释,然后将菌液________到培养基平面上。菌液稀释的目的是为了获得________菌落。(4)临床上用14C呼气试验检测人体是否感染Hp,其基本原理是Hp能将14C标记的________分解为NH3和14CO2。尿素选择培养基酚红脲酶氮红接种涂布单个第九页,共25页。解析(1)选择培养基是指在微生物学中,将允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。使用选择培养基可以富集筛选目的微生物。(2)由于细菌中合成脲酶,脲酶将尿素分解成氨,会使培养基碱性增强,pH升高,指示剂变红。(3)步骤X表示接种。在无菌条件下操作时,先将菌液稀释,然后将菌液涂布到培养基平面上。菌液稀释的目的是为了获得单个菌落。(4)用14C呼气试验检测人体是否感染Hp,其基本原理是Hp能将14C标记的尿素分解为NH3和14CO2。第十页,共25页。5.在微生物应用中针对所需的特定微生物的选择培养可根据所需分离的微生物的特点,从物理、化学、生物及综合多个方面进行选择,如温度、pH、紫外线、高压、光照、氧气、营养等许多方面。如下图描述了采用选择方法从土壤中分离能降解酚类化合物对羟基苯甲酸的微生物的实验过程。第十一页,共25页。(1)本实验所需培养基为____________,碳源为____________。(2)实验原理是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)①→③重复培养的目的是____________________________________________________。(4)⑤的菌落中大部分是降解________________的微生物。(5)⑥为__________组,⑦为__________组,设置⑥的目的是___________________________________________________。(6)⑤→⑥采用__________________法,接种到⑥的培养基中,在操作过程中为防止污染应注意的事项是_______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。选择培养基对羟基苯甲酸利用以对羟基苯甲酸为唯一碳源的选择培养基,经选择培养,选择出能降解酚类化合物对羟基苯甲酸的微生物增大分解对羟基苯甲酸微生物的浓度对羟基苯甲酸对照实验说明通过选择培养的确得到了欲分离的目标微生物

接种环在火焰上灼烧灭菌,烧红的接种环在火焰旁冷却,同时打开皿盖挑取菌落接种到试管中,并塞好棉塞,接种环在火焰上灼烧,杀死残留生物单菌落挑取第十二页,共25页。1.有些细菌可分解原油,从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题。(1)在筛选过程中,应将土壤样品稀释液接种到以________为唯一碳源的固体培养基上。从功能上讲,该培养基属于________培养基。(2)纯化菌种时,为了得到单菌落,常采用的接种方法有两种,即______________和______________。(3)为了筛选出高效菌株,可比较单菌落周围分解圈的大小,分解圈越大说明该菌株的降解能力越________。(4)通常情况下,在微生物培养过程中,实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、______________和______________。无菌技术要求实验操作应在酒精灯________附近进行,以避免周围环境中微生物的污染。原油选择平板划线法稀释涂布平板法强干热灭菌高压蒸汽灭菌火焰第十三页,共25页。解析(1)本实验的目的是筛选出可以分解原油的高效菌株,从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株,使用的培养基应是以原油为唯一碳源的选择培养基。(2)菌种纯化培养时,常采用平板划线法和稀释涂布平板法接种。(3)当固体培养基上长出单菌落后,可通过比较菌落周围分解圈的大小,来判断菌株降解原油能力的大小。一般来说,分解圈越大说明该菌株的降解能力越强,反之则越弱。(4)灭菌的方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌。第十四页,共25页。2.(2016·湖南衡阳模拟)回答有关微生物的培养与应用问题:(1)微生物的培养需要使用培养基,不同培养基的配方不同,但一般都有___________碳源、氮源;在配制从土壤中筛选纤维素分解菌的培养基时,需加入________作为唯一的碳源,该培养基属于________培养基;若将样品接种到鉴别纤维素分解菌的培养基上,在该培养基中需要加入的特殊染料是________,当形成菌落以后可以根据菌落周围是否产生________来筛选纤维素分解菌。(2)若要统计土壤样品中纤维素分解菌的数目,宜采用______________法接种,根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积,统计平板上的__________就能大约推测出样品中的活菌数。(3)一同学在稀释倍数为104的培养基中测得平板上菌落数的平均值为23.4,则每毫升样品中的活菌数是(所用稀释液的体积为0.2mL)____________。水、无机盐纤维素选择刚果红透明圈稀释涂布平板菌落数目1.17×106第十五页,共25页。培养基硝酸铵无机盐淀粉纤维素粉琼脂CR溶液水A++-++++B+++++-+3.实现生态农业,让秸秆回归农田的关键是获得能够高效分解秸秆的微生物。请回答下列相关问题:(1)秸秆的主要成分易被________酶分解;从功能上看,筛选能产生该酶的微生物所用的培养基属于________培养基。(2)甲、乙两组同学设计了两种培养基(成分见下表):注:“+”表示有;“-”表示无;CR为刚果红。A培养基________(填“能”或“不能”)用于分离要筛选的分解菌,原因是________________________________;加入刚果红(CR)的目的是:

______________________________________________________________________________________________________。纤维素选择能纤维素粉是唯一碳源CR可与纤维素形成红色复合物,当纤维素被纤维素酶分解后,培养基上会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈(合理即可)

第十六页,共25页。(3)甲、乙两组同学分别采用稀释涂布平板法和平板划线法接种。甲组同学将1mL水样稀释100倍后,在3个平板上分别接入0.1mL稀释液,经适当培养后,3个平板上的菌落数分别是39、38和37,据此可得出每升水样中的活菌数为____________个;示意图a和b中,________是甲组同学接种培养后得到的结果;乙组同学划线时,总是从上一次划线的末端开始划线,这样做的目的是____________________________________________________________________________________________。(4)甲、乙两组同学在微生物接种培养过程中,均留下一个未接种的平板同时培养,目的是_______________________。将聚集的菌体逐步稀释,以便获得单个菌落3.8×107图b作为对照第十七页,共25页。解析(1)秸秆的主要成分是纤维素,易被纤维素酶分解;筛选能产生纤维素酶的微生物的培养基属于选择培养基。(2)从表中培养基的成分来看,A培养基能用于分离和鉴别纤维素分解菌,原因是该培养基是固体培养基,且以纤维素粉为唯一碳源,利用刚果红来鉴定纤维素的分解情况。刚果红可与纤维素形成红色复合物,当纤维素被分解后.无法形成红色复合物,培养基上会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈,可据此来筛选纤维素分解菌。(3)从示意图看,图b是采用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。根据题意得知每升水样中的活菌数为38÷0.1×100×103=3.8×107(个)。图a是采用平板划线法接种培养后得到的结果,划线时总是从上一次划线的末端开始,这样做的目的是通过划线次数的增加,使每次划线时菌体的数目逐渐减少,以便得到单个菌落。(4)为了确定培养基的灭菌是否彻底,应设置空白对照:随机取若干灭菌后的空平板培养一段时间,观察培养基上是否有菌落生成。第十八页,共25页。4.(2016·山东济宁检测)高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉嗜热菌样品中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌,其筛选过程如下图所示:(1)进行①过程的目的是________,②过程所使用的接种方法是________________法。(2)从用途上来说,Ⅰ号培养基属于________培养基,配制时仅以________作为唯一碳源;从物理状态上来说,Ⅱ号培养基属于固体培养基,配制时应加入________作为凝固剂。稀释稀释涂布平板选择淀粉琼脂第十九页,共25页。(3)Ⅰ、Ⅱ号培养基配制和灭菌时,灭菌与调节pH的先后顺序是__________________。一般对配制的培养基采用______________法灭菌。(4)培养一段时间后,应从Ⅰ号培养基上挑出__________的菌落,接种到Ⅱ号培养基上。解析(1)分析题图可知,①过程是梯度稀释,目的是对样品进行稀释;②过程是用稀释涂布平板法进行接种。(2)本题实验的目的是筛选高效产生耐高温淀粉酶的嗜热菌,从用途上来说,Ⅰ号培养基属于选择培养基,本培养基以淀粉为唯一碳源;从物理状态上来说,Ⅱ号培养基属于固体培养基,配制时应加入琼脂作为凝固剂。(3)培养基配制和灭菌时应先调节pH,然后再进行灭菌,如果先灭菌再凋节pH,在调节pH时会污染培养基;一般对配制的培养基采用高压蒸汽灭菌法灭菌。(4)能分解淀粉的嗜热菌在Ⅰ号培养基上生长时可释放淀粉酶,分解培养基中的淀粉,在菌落周围形成透明圈,透明圈越大淀粉酶的活性越强,所以要从Ⅰ号培养基上挑出透明圈大的菌落,接种到Ⅱ号培养基上。先调节pH,后灭菌高压蒸汽灭菌透明圈大第二十页,共25页。KH2PO41.4g纤维素粉5.0gNa2HPO42.1gNaNO31.0gMgSO4·7H2O0.2gNa2HPO41.2g葡萄糖10.0gKH2PO40.9g尿素1.0gMgSO4·7H2O0.5g琼脂15.0gKCl0.5g酵母膏0.5g水解酪素0.5g将上述物质溶解后,用蒸馏水定容至1000mL甲乙5.如表所示甲、乙分别是分离两种土壤中微生物的培养基的配方,图丙所示为相关分离过程,回答下列问题:注:水解酪素,即水解酪蛋白,由酪蛋白水解得到。第二十一页,共25页。(1)从功能上看,甲培养基属于____________。从物理性质上看,甲培养基属于____________。其中提供氮源的物质是________。(2)如果将乙培养基配制成固体培养基,则在该培养基上长出的菌落是否都能分解纤维素?________。如果培养基中加入________可以筛选出具有分解纤维素能力的菌株,同时透明圈越________(填“大”或“小”),表示该菌分解纤维素的能力越强。选择培养基固体培养基尿素否刚果红大第二十二页,共25页。解析(4)4个平板中菌落的平均数量为160个,浓度为1600个/mL,由丙图可知,土壤样液被稀释了125倍,故原始样液中微生物的密度为1600(个/mL)×125=2.0×105(个/mL)。(3)为了计数微生物的数量,图丙采用____________法进行接种培养计数,除此之外,还可以采用________________法进行计数。其中前一种计数方法所得结果要比后一种计数方

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