药物分析总结

各论总结芳酸类非甾体抗炎药物结构特征：苯环、游离羧基代表药物：水杨酸（游离羧基）、阿司匹林（酯键、游离羧基）、双水杨酯（酯键、游离羧基）、二氟尼柳（游离羧基）、甲芬那酸（游离羧基）、双氯芬酸钠（酯键）、布洛芬（游离羧基）、酮洛芬（二苯甲酮、游离羧基）、萘普生（酯键）、吲哚美辛（游离羧基）、吡罗昔康（S、酰胺键）、美洛昔康（S、酰胺键）、尼美舒利、对乙酰氨基酚（酰胺键）鉴别实验：三氯化铁反应：水杨酸反应：水杨酸加三氯化铁试液，生成紫堇色配位化合物阿司匹林（水解）、双水杨酯（水解）、二氟尼柳酚羟基反应：对乙酰氨基酚的水溶液加三氯化铁试液，显蓝紫色吡罗昔康、美洛昔康：烯醇式羟基缩合反应（酮洛芬）酮洛芬（二苯甲酮）：乙醇溶解，酸性条件下（硫酸），与二硝基苯肼缩合（加热至沸）生成橙色的偶氮化合物重氮化偶合反应（对乙酰氨基酚：潜在的芳伯氨基）对乙酰氨基酚：稀盐酸加热条件下，与亚硝酸钠试液，再加入碱性β萘酚生成红色偶氮化合物水解反应（阿司匹林）阿司匹林与碳酸钠加热水解，加入过量稀硫酸酸化，生成白色沉淀，并产生醋酸臭气（5）荧光反应（甲芬那酸）溶于硫酸后，与重铬酸钾反应显深蓝色，随即变为棕绿色阿司匹林及双水杨酯中游离水杨酸与有关物质的检查（1）阿司匹林中的有关物质：合成起始原料苯酚及合成中间体与副产物，如游离水杨酸、醋酸苯酯、水杨酸本酯、水杨酰水杨酸、水杨酸酐、乙酰水杨酸本酯、乙酰水杨酸酐游离水杨酸：阿司匹林为乙酰水杨酸，在生产过程中因乙酰化不完全，或在精制过程中及贮藏期间的水解而产生水杨酸。游离水杨酸对人体有毒性，因其分子中所含的酚羟基在空气中易被逐渐氧化生成一系列有色（如淡黄、红棕甚至深棕色）醌型化合物而使阿司匹林成品变色，因而需加以控制①阿司匹林中游离水杨酸的检查（HPLC）检测方法：稀硫酸铁铵溶液显色反应注：药典采用1%冰醋酸溶液制备供试品溶液，以防阿司匹林水解，同时采用HPLC检查，C18作填充柱②双水杨酯中游离水杨酸的检查（紫外）检测方法：铁盐比色法（水杨酸可与三价铁生成有色配位化合物）注：为避免双水杨酯的水解，以三氯甲烷为溶剂，采用水相萃取比色法对乙酰氨基酚中对氨基酚和对氯苯乙酰胺的检查①对氨基酚及有关物质对氨基酚同时含有酚羟基和氨基，具有酸碱两性，在反相色谱条件下易出现峰拖尾和峰分裂的现象，可使用离子对色谱法消除这一现象检测方法：以四丁基氢氧化铵为离子对试剂，采用离子对反相HPLC法检查含量测定（1）原料药的测定：阿司匹林：酚酞作指示剂①直接滴定法：药物溶于中性乙醇，以酚酞为指示剂，用NaOH滴定液直接滴定（专属性较差，易受阿司匹林的水解及其产物、有机酸类稳定剂的干扰，不适于阿司匹林制剂；原料药测定时，也需要注意规范操作，避免水解引起的偏差）②剩余量滴定法：用定量过量的NaOH滴定液溶解后，用盐酸滴定液回滴定剩余的NaOH滴定液③水解后剩余量滴定法：加入定量过量的NaOH，加热使酯键水解后，再用硫酸回滴剩余的NaOH滴定液（可显著提高准确度和精密度）【阿司匹林原料药】优点：准确、避免了酯键水解的干扰缺点：但无法消除药物里本身酸性物质的干扰④两步滴定法：第一步中和酸性水解产物及稳定剂，以消除干扰；第二步为水解后剩余量滴定【阿司匹林制剂】制剂当附加成分显著影响主成分测定时，可采用：两步滴定法、柱分配色谱-紫外分光光度法、高效液相色谱法高效液相色谱法：用离子抑制-反相高效液相色谱法测定，用外标法计算含量注：供试品溶液制备里冰醋酸的作用：①抑制阿司匹林的解离，进而消除因色谱柱对阿司匹林的吸附而造成的色谱峰拖尾与分裂的现象②抑制阿司匹林的水解，增加溶液的稳定性苯乙胺类拟肾上腺素药物结构特征：苯乙胺、邻二酚羟基（1）酚羟基①两个酚羟基：肾上腺素、盐酸异丙肾上腺素、重酒石酸去甲肾上腺素、硫酸特布他林、盐酸多巴胺②一个酚羟基：盐酸去氧肾上腺素、硫酸沙丁胺醇、重酒石酸间羟胺③没有酚羟基：盐酸甲氧明、盐酸氯丙那林、盐酸克伦特罗、盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱、盐酸氨溴索脂肪伯胺（可发生Rimini反应）重酒石酸去甲肾上腺素、盐酸多巴胺、重酒石酸间羟胺、盐酸甲氧明、理化性质：酚羟基特性、弱碱性、旋光性、紫外吸收特性鉴别实验与三氯化铁的反应（盐酸去氧肾上腺素、肾上腺素、盐酸多巴胺）：酚羟基与三氯化铁显绿色、碱性条件下为紫红色与甲醛硫酸的反应：肾上腺素显红色、盐酸异丙肾上腺素显棕色至暗紫色、重酒石酸去甲肾上腺素显淡红色氨基醇的双缩脲反应（盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱、盐酸去氧肾上腺素芳环侧脸具有氨基醇结构）盐酸麻黄碱（无酚羟基，极性小）：加水溶解后，加硫酸铜与20%NaOH溶液即显蓝紫色；加乙醚，振摇后放置，乙醚层显紫红色（络合物），水层变成蓝色（Cu2+）盐酸去氧肾上腺素（有酚羟基，极性大）：加水溶解后，加硫酸铜与29%NaOH溶液即显蓝紫色；加乙醚，振摇后放置，乙醚层不显色（络合产物在水层，不在乙醚层）。可与盐酸麻黄碱区别脂肪伯胺的Rimini反应重酒石酸间羟胺：取本品5mg，溶解，加亚硝基铁氰化钠试液2滴、丙酮2滴与碳酸氢钠0.2g，在60℃水浴中加热1min，即显红紫色。特殊杂质与检查酮体：紫外分光光度法光学纯度的检查：色谱法、电泳法有关物质（除盐酸克伦特罗外）：去氧肾上腺素（TLC）、其他（高效液相色谱法）含量测定非水溶液滴定法由于本类药物为弱碱性，在水溶液中用酸滴定液直接滴定没有明显的突跃，终点难以观测，常不能获得满意的测定结果。而在非水酸性溶剂中，只要其在水溶液中的pKb值小于10，都能被冰醋酸均化到溶剂醋酸根水平，相对碱强度显著增强，因而使弱碱性药物的滴定能够顺利进行①对象：有机碱及其氢卤酸盐、磷酸盐、硫酸盐及金属盐类药物②非水溶剂种类：酸性溶剂：冰醋酸碱性溶剂：二甲基甲酰胺两性溶剂：甲醇惰性溶剂：甲苯、三氯甲烷③pKb为8~10：冰醋酸pKb为10~12：冰醋酸与醋酐pKb>12：醋酐④基本原理：强酸置换出与弱碱结合的弱酸BH+A-+HClO4 → BH+ClO4-+HA。⑤酸根的影响：HA在醋酸介质中的酸性：高氯酸>氢溴酸>硫酸>盐酸>硝酸>磷酸如测定有机碱性药物氢卤酸盐时，由于被置换出的氢卤酸盐的酸性相当强，影响滴定终点，不能直接滴定，需进行处理。一般处理方法是加入定量的醋酸汞冰醋酸溶液，使其生成在醋酸中难解离的卤化汞，以消除氢卤酸对滴定的干扰与不良影响⑥终点指示：常用电位法和指示剂法。指示剂为结晶紫，酸式色为黄色，碱式色为紫色溴量法（一个酚羟基：盐酸去氧肾上腺素：淀粉作指示剂、重酒石酸间羟胺）在酸性溶液中酚羟基的邻对位活泼氢能与过量的溴定量地发生溴代反应，再以碘量法硫代硫酸钠滴定测定剩余的溴亚硝酸钠法（重酒石酸去甲肾上腺素、盐酸多巴胺、重酒石酸间羟胺、盐酸甲氧明）盐酸克伦特罗分子结构中含有芳伯氨基，在酸性溶液中可与亚硝酸钠定量发生重氮化反应，生成重氮盐，可用永停滴定法指示终点紫外分光光度法及比色法（盐酸克伦特罗栓（芳伯氨基）和盐酸异丙肾上腺素气雾剂（酚羟基））盐酸克伦特罗：处理后加亚硝酸钠，摇匀、加氨基磺酸钠、摇匀、加盐酸奈乙胺、摇匀注：奈乙胺遇亚硝酸钠也能显色，干扰比色测定，所以在重氮化后，应加氨基磺酸铵将剩余的亚硝酸分解除去对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物结构：亲脂性芳香环、中间连接功能基（酯键——对氨基苯甲酸酯类、酰胺键——酰苯胺类）、亲水性胺基鉴别反应重氮化偶合反应（芳伯氨基：苯佐卡因、盐酸普鲁卡因、盐酸氯普卡因、盐酸普鲁卡因胺）芳伯氨基在酸性溶液中与亚硝酸钠反应，加入碱性β-萘酚溶液显猩红色沉淀芳仲胺在酸性溶液中与亚硝酸钠反应，生成乳白色沉淀与金属离子的反应①鉴别盐酸利多卡因：在碳酸钠试液中与硫酸铜反应生成蓝紫色配位化合物，再转入三氯甲烷中显黄色②鉴别盐酸普鲁卡因胺：被浓过氧化氢氧化成羟肟酸，再与三氯化铁反应显紫红色，随即变为棕黑色。【羟肟酸铁的反应】③．盐酸利多卡因在酸性条件下可与氯化钴试液反应生成亮绿色水解产物反应①鉴别盐酸普鲁卡因：加NaOH变为白色沉淀，加热变为油状物，继续加热，生成的气体使湿润的红色石蕊试纸变蓝，加热至油状物消失，加盐酸即析出白色沉淀②鉴别苯佐卡因：加NaOH加热煮沸，再加入碘加热，生成黄色沉淀，并产生碘仿的臭气（水解后，与碘生成黄色沉淀）特殊杂质与检查对氨基苯甲酸类杂质的检查水解生成对氨基苯甲酸类，对氨基苯甲酸随储藏时间的延长或受热，可进一步脱羧转化成苯胺，而苯胺又可被氧化为有色物，使注射液变黄、疗效下降、毒性增加（2）酰苯胺类局麻药中2,6二甲基苯胺及其他杂质的检查（3）盐酸罗哌卡因的光学纯度检查（毛细管电泳法）4.含量测定（1）亚硝酸钠滴定法：苯佐卡因、盐酸普鲁卡因（中性红做指示剂：内指示剂法）、注射用盐酸普鲁卡因、盐酸普鲁卡因胺及其制剂、醋氨苯砜①原理：芳伯氨基或水解后生成芳伯氨基的药物在酸性溶液中与亚硝酸钠定量发生重氮化反应，可用永停滴定法指示终点②测定的主要条件加入适量溴化钾加快反应速度：在不同无机酸中，重氮化反应速度不同，即氢溴酸>盐酸>硝酸、硫酸，由于氢溴酸昂贵，多用盐酸；但为了加快反应速度，往往加入适量的溴化钾，使体系中的溴化钾和盐酸起到氢溴酸的加速作用加过量盐酸加速反应：过量盐酸有利于：1）重氮化反应速度加快；2）重氮盐在酸性溶液中稳定；3）防止生产偶氮氨基化合物而影响测定结果芳胺类药物与酸的摩尔比为：1：（2.5~6）反应温度：重氮化反应的速度与温度成正比，但是生成的重氮盐又随温度升高而加速分解，可在室温（10~30℃），其中15℃以下结果较准确滴定速度滴定时宜将滴定管尖端插入液面以下2/3处，一次将大部分亚硝酸钠滴定液在搅拌条件下迅速加入，然后将滴定管尖端提出液面，用少量水淋洗尖端，再缓缓滴定指示终点的方法：电位法、永停滴定法、外指示剂法（准确度差）、内指示剂法（终点提前，测定结果偏低）非水溶液滴定法（盐酸布比卡因弱碱性氮原子）将供试品溶于冰醋酸-醋酐溶液中，用高氯酸滴定至终点；以电位法指示滴定终点注：加入醋酐的目的是：增强布比卡因的碱性，使滴定突跃明显二氢吡啶类钙通道阻滞药物结构与性质结构：苯基、1,4-二氢吡啶母核典型药物：硝苯地平、尼莫地平、非洛地平、尼索地平理化性质二氢吡啶的还原性：铈量法硝基的氧化性（亚铁盐反应、重氮化-偶合反应）二氢吡啶环氨基质子解离性：丙酮溶液与氢氧化钠反应显橙红色弱碱性：与氯化汞生成白色沉淀光不稳定性：避光操作旋光性：外消旋体UV化学鉴别亚铁盐反应：苯环硝基具有氧化性，可与氢氧化亚铁发生反应，生成红棕色沉淀重氮化-偶合反应：硝基具有氧化性，在酸性条件下被锌粉还原为芳伯氨基，可用重氮化-偶合反应鉴别（硝苯地平）有关物质与检查：避光操作、名字①硝苯地平中有关物质的检查杂质I：2,6-二甲基-4（2-硝基苯基）-3,5-吡啶二甲酸二甲酯杂质II：2,6-二甲基-4（2-亚硝基苯基）-3,5-吡啶二甲酸二甲酯②苯磺酸氨氯地平杂质I：2-[(2-氨基乙氧基）]甲基）-4（2-氯苯基）6-甲基-吡啶-3-羧酸乙酯-5-羧酸甲酯

含量测定：硝苯地平：邻二氮菲做指示剂铈量法（硝苯地平）铈量法也称为硫酸铈法，是以Ce（SO4）2为标准溶液的氧化还原反应滴定法。由于酸度较低时Ce4+易水解，故本滴定在强酸条件下进行。Ce4+位黄色，Ce3+无色，自身可做指示剂，但不够灵敏，常用邻二氮菲做指示剂。铈量法优点：Ce（SO4）2标准溶液稳定Ce4+还原为Ce3+是单电子转移，不产生中间价态的产物，反应简单，副反应少大部分有机物不与Ce（SO4）2作用，不干扰测定。因此本法特别适合于糖浆剂巴比妥及苯二氮卓类镇静催眠药物巴比妥类结构与性质结构：环状丙二酰脲代表药物：巴比妥（barbital）、苯巴比妥（phenobarbital、苯基）、司可巴比妥（secobarbital、双键）、戊巴比妥（pentobbarbital）、异戊巴比妥（amobarbital）、硫喷妥钠（thiopentalsodium，C2上S取代）理化性质：弱酸性：酮式烯醇式互变：二元酸水解反应：与碱液共沸水解，释放出氨气与金属离子的反应：与银盐的反应：在碳酸钠溶液中生成钠盐而溶解，再与硝酸银反应，先生成一银盐，硝酸银过量时再生成二银盐（一银盐溶解二银盐不溶）铜盐：在吡啶溶液中生成烯醇式异构体，再与铜-吡啶试液反应，生成紫色配位化合物（鉴别含S巴比妥类药物，呈绿色）钴盐：碱性溶液中与钴盐反应，生成紫堇色配合物汞盐：与硝酸汞或氯化汞反应，生成白色沉淀，沉淀在氨试液中溶解与香草醛反应：在浓硫酸存在下，与香草醛发生缩合反应，生成棕红色产物UV：原性药物在酸性溶液中无UV吸收(5,5-二取代，1,5,5-三取代)碱性溶液中电离：5,5-二取代巴比妥类药物pH10：一级电离：240nmpH13：二级电离：255nm1,5,5-三取代巴比妥类药物：只发生一级电离：240nm⑥显微结晶：巴比妥为长方形结晶；苯巴比妥开始结晶是球形，后成花瓣状鉴别实验1）丙二酰脲反应银盐反应：与碳酸钠、硝酸银反应，生成白色沉淀，沉淀振摇即溶解，硝酸银过量时不溶解铜盐反应：在吡啶溶液中溶解后，与铜吡啶试液反应，显紫色特征基团反应硫元素：在NaOH溶液中与铅离子反应，生成白色沉淀不饱和取代基：分子结构中含有丙烯基，可与I2、Br2、KMnO4发生加成反应，使其褪色（可作为司可巴比妥的专属性鉴别）特殊杂质的检查项目：酸度（甲基橙指示剂）、乙醇溶液的澄清度、中性或碱性物质（提取重量法）、有关物质（6）含量测定①．银量法：在滴定过程中，巴比妥类药物首先形成可溶性的一银盐，当被测供试品完全形成一银盐后，继续用硝酸银滴定液滴定，稍过量的银离子就与巴比妥类药物形成难溶性的二银盐沉淀，使溶液变浑浊，以此指示终点【ChP采用甲醇和无水碳酸钠溶剂系统，以银-玻璃电极电位法指示终点】溴量法：司可巴比妥中的不饱和建可与溴定量发生加成反应苯二氮卓类：硫酸荧光反应结构：苯环、七元含氮杂环1位N上无取代基的有：奥沙西泮、劳拉西泮、氯硝西泮，可发生醇式-烯醇式互变，具有酸碱两性性质：弱碱性（N）、水解性（在强酸溶液中生成二苯甲酮衍生物）、UV鉴别实验化学鉴别法①沉淀反应：遇碘化铋钾生成橙红色沉淀②硫酸荧光反应芳伯胺反应：1位N上无取代者，与盐酸共热水解后，生成芳伯胺，可发生重氮化-偶合反应如奥沙西泮的盐酸溶液，缓慢加热煮沸，放冷，依次加入亚硝酸钠和碱性β-萘酚试液，生成橙红色沉淀。有关物质与检查氯氮卓：二苯甲酮含量测定非水溶液滴定法（原料药的测定）①非水碱量法：本类药物多为碱性，高氯酸滴定液②非水酸量法：奥沙西泮及劳拉西泮，氢氧化四丁基铵滴定液，二甲基甲酰胺为溶剂吩噻嗪类抗精神病药结构：硫氮杂蒽母核，2、10位有取代基理化性质：①弱碱性（N）②易氧化性（光照时易氧化变色，避光保存）③与金属离子配合呈色（硫与钯离子配合呈色），其氧化物亚砜和砜则无此反应④UV：205、254（最强）、300nm，双波长分光光度法鉴别实验与生物碱沉淀剂反应：与三硝基苯酚反应生成沉淀氧化显色反应（硫氮杂蒽母核具有还原性）与钯离子配合呈色：硫氮杂蒽母核与钯离子配合呈色的反应可用于吩噻嗪类药物及其制剂鉴别。（盐酸异丙嗪）由于配合反应发生在硫氮杂蒽母核的硫元素与钯离子之间，该反应不受硫氮杂蒽母核氧化物亚砜和砜的干扰，专属性强如葵氟奋乃静与氯化钯反应生成红色沉淀题：有氧化产物存在时，吩噻嗪类药物的鉴别或含量测定方法为钯离子比色法吩噻嗪类药物与钯离子反应，需在pH2±0.1酸性条件下进行含卤素取代基的反应焰色反应：奋乃静（氯）：绿色显色反应：吩噻嗪类的2位有含氟取代基时，可经有机破坏使共价结合的氟元素分解成氟化物，在酸性条件下与茜素锆试液反应，溶液颜色改变。有关物质与检查名字：有个吩噻嗪含量测定非水溶液滴定法：弱碱性，高氯酸为滴定液（2）提取后双波长分光光度法：消除辅料及氧化物的干扰（3）钯离子比色法（盐酸异丙嗪）：同上性质（4）HPLC：由于本类药物具有弱碱性及紫外吸收特性，主要采用反相色谱和离子对色谱进行分离、紫外检测器进行检测①反相高效液相色谱法：扫尾剂：含氮碱性竞争试剂：醋酸铵、三乙胺、二乙铵、乙腈②离子对高效液相色谱法极性较强的吩噻嗪类药物在反相色谱固定相中的保留较弱，有时调整流动相的pH抑制其解离也不能使这些药物的色谱行为得到改善。离子对高效液相色谱法（RP-HPLC）通常在反相色谱流动相的水中加入与待测组分离子电荷相反的离子对试剂，使之在洗脱中与待测组分离子形成离子对，以增强待测组分在非极性固定相中的保留（离子对的非极性部分越大，离子对在非极性固定相中的保留越强），从而改善待测组分的色谱保留行为与分离行为弱碱性吩噻嗪类药物常用烷基磺酸盐阴离子对试剂，如戊烷磺酸钠、庚烷磺酸钠、十二烷磺酸钠等。为促进碱性药物质子化，一般使流动相呈酸性。盐酸氯丙嗪的含量测定方法：非水滴定法、紫外法、铈量法喹啉与青蒿素类抗疟药一、喹啉类药物（荧光）结构：喹啉环、奎宁环（N碱性强，与硫酸成盐，2个N与一个硫酸成盐）理化性质：碱性旋光性荧光特性：蓝色荧光（喹啉、甲芬那酸、苯并二氮卓类）：UV鉴别实验荧光：硫酸奎宁和二盐酸奎宁在稀硫酸溶液中显蓝色荧光绿奎宁反应：水溶液中滴加溴试液与氨试液，即显翠绿色有关物质与检查硫酸奎宁：酸度、三氯甲烷-乙醇中的不溶物、其他金鸡纳碱磷酸咯萘啶：酸度、氯化物、水中不溶物、甲醛、四氢吡咯含量测定注意：原料药和片剂消耗高氯酸的摩尔比是不同的二、青蒿素类（无特征UV吸收）1.结构：倍半萜内酯、过氧桥2.理化性质：（1）氧化性：过氧桥（2）旋光性：右旋体（3）水解反应：内酯在碱性条件下水解（4）无特征UV吸收（青蒿素、巴比妥原型药物）鉴别实验过氧桥的氧化反应（碘化钾-淀粉实验）：酸性条件下与碘化钾试液反应，淀粉指示液显蓝紫色羟肟酸铁反应：在碱性条件下与羟胺生成羟肟酸，在稀酸中与高铁离子反应显紫红色（盐酸普鲁卡因胺、青蒿素）香草醛-硫酸实验IR【无特征UV吸收】第十三章莨菪烷类抗胆碱药结构：莨菪醇、苯乙酸性质：水解性：酯键，阿托品可水解成莨菪醇和莨菪酸碱性：N（较强）旋光性：东莨菪碱有旋光性，阿托品为外消旋体无旋光性，可用于区分鉴别实验托烷生物碱类的Vitali鉴别酯键水解后，经发烟硝酸加热，再与KOH醇溶液和固体KOH作用，显深紫色有关物质与检查氢溴酸东莨菪碱：酸度、易氧化物（阿扑东莨菪碱/脱水东莨菪碱，含有不饱和双键，紫外吸收）、其他生物碱（阿扑阿托品/脱水阿托品、颠茄碱，浑浊）硫酸阿托品：莨菪碱（左旋体，利用旋光度检查）含量测定酸性染料比色法：硫酸阿托品原理：在适当pH水溶液中，碱性药物与H+结合成阳离子，而一些酸性染料可解离成阴离子；两种离子定量结合，生成具有吸收光谱明显红移的有色离子对，该离子对可以定量地被有机溶剂萃取，测定有机相中有色离子对特征波长处的吸光度，即可进行碱性药物的含量测定。酸性染料：溴甲酚绿、溴麝香草酚蓝、溴甲酚紫、溴酚蓝影响因素：水相最佳pH：选择一个最佳pH，使有机碱性药物和酸性染料分别全部以BH+和In-的状态存在，是酸性染料比色法至关重要的条件酸件染料比色法中，水相的pH值过小，则酸性染料以分子状态存在酸性染料及其浓度：选用的酸性染料与有机碱性药物定量地结合生成的离子对要在有机相中有较大的溶解度生成的离子对在最大吸收波长处有较高的吸光度染料在有机相中要不溶或很少溶浓度太高，会产生严重的乳化层有机溶剂的选择应选择对有机碱性染料与酸性染料形成的离子对萃取效率高、能与离子对形成氢键，不与或极少与水混溶的有机溶剂作为萃取溶剂，一般用三氯甲烷水分的影响：水相中有过量的酸性染料，水分的混入又可能会使有机相浑浊，从而影响比色测定的准确性，所以在萃取过程中应严防水分混入有机相。可加入脱水剂或干燥滤纸过滤酸性染料中的有色杂质：可在加入供试品之前将缓冲液与酸性染料的混合液先用所选用的有机溶剂萃取弃去，以便除去酸性染料中的有色杂质第十四章维生素类药物脂溶性维生素：ADEK；水溶性维生素：B、C、盐酸、叶酸（一）维生素A1.结构：环己烯、共轭多烯醇侧链2.来源：鱼肝油3.维生素A1又称为视黄醇，鱼肝油中维生素A主要为醋酸酯和棕榈酸酯4.鉴别三氯化锑反应：维生素A在无水三氯化锑的无醇三氯甲烷溶液中显蓝色，渐变为紫红色。（注：反应必须在无水、无醇条件下进行）含量测定：三点校正法维生素B1（氨基嘧啶环与噻唑环）（荧光反应）维生素B1也称为盐酸硫胺（thiaminehydrochloride）鉴别实验：硫色素荧光反应：维生素B1在碱性溶液中可被铁氰化钾氧化成硫色素，硫色素溶于正丁醇中显蓝色荧光（维生素B1的专属性鉴别）方法：加NaOH试液溶解后，加铁氰化钾试液与正丁醇，强力振摇，放置使分层，上面的醇层显强烈的蓝色荧光；加酸使成酸性，荧光即消失，再加碱使成碱性，荧光又显出含量测定：非水溶液滴定法（原料药）、紫外分光光度法（维生素B1片剂和注射液的含量测定）、硫色素荧光法（VB1的专属性反应）维生素C（水溶性抗氧化剂）结构：烯二醇、内酯环理化性质：溶解性：水溶性酸性：一元酸旋光性：2个手性碳，4个对映异构体还原性：烯二醇基具有极强的还原性水解性：Vc因双键使内酯环变得较稳定，和碳酸钠作用可生成单钠盐，不发生水解。但在强碱中，内酯环水解生成酮酸盐糖类性质UV鉴别与硝酸银反应：烯二醇具有强还原性，可被硝酸银氧化，产生黑色金属银沉淀与二氯靛酚钠反应：2,6-二氯靛酚钠在酸性介质中为玫瑰红色，碱性介质中为蓝色。与维生素C作用后生成还原型的无色的酚亚胺方法：取本品，加水溶解。加二氯靛酚钠，试液的颜色即消失杂质的检查溶液的澄清度与颜色检查：糠醛铁、铜离子检查：催化维生素C水解，b<(a-b)草酸的检查：维生素C的降解产物含量测定碘量法原理：维生素C在醋酸酸性条件下可被碘定量氧化，根据消耗的碘滴定液的体积，即可以计算维生素C的含量稀醋酸：维生素C在酸性介质中受空气中氧的氧化速度减慢新沸过的冷水：减少水中溶解的氧对测定的影响注射剂测定前加丙酮：消除抗氧剂/掩蔽剂的干扰（2）二氯靛酚滴定法原理：2,6-二氯靛酚为一染料，其氧化型在酸性溶液中显红色，在碱性溶液中为蓝色。当与维生素C反应后，即转变为无色的酚亚胺（还原型）。因此，维生素C在酸性溶液中可用二氯靛酚标准溶液滴定至溶液显玫瑰红色为终点，无需另加指示剂。（五）维生素D：需要检查麦角甾醇维生素E（脂溶性抗氧化剂）（苯并二氢吡喃）性质溶解性：脂溶性水解性：有乙酰化的酚羟基，在酸性或碱性溶液中加热可水解生成游离的生育酚，常作为特殊杂质检查氧化性：氧化产物为α-生育醌、α-生育酚二聚体UV鉴别实验三氯化铁反应：维生素E在碱性条件下水解生成游离的生育酚，生育酚经乙醚提取后，可被三氯化铁氧化成对-生育醌；同时Fe3+被还原为Fe2+，Fe2+与联吡啶生成血红色的配位离子硝酸反应：维生素E在硝酸酸性条件下水解生成生育酚，生育酚被硝酸氧化为邻醌结构的生育红而显橙红色杂质检查酸度：醋酸生育酚：生育酚具有还原性，可被硫酸铈定量氧化有关物质残留溶剂含量测定气相色谱法：气相内标定量（一定考）HPLC甾体激素类药物的分析结构：环戊烷并多氢菲药理分类：肾上腺皮质激素、性激素（雄激素及蛋白同化激素、雌激素、孕激素）骨架分类：雌甾烷（13）、雄甾烷（10、13）、孕甾烷（10、13、17）结构特征：肾上腺皮质激素：——A环有△4-3酮基，有紫外吸收；C17位有α-醇酮基，具有还原性雄激素：A环有△4-3酮基；C17位有羟基孕激素：A环有△4-3酮基；C17位为甲酮基、羟基雌激素：A环为苯环，C3位有酚羟基；C17位有羟基、乙炔基鉴别实验（1）硫酸显色反应：母核特征鉴别，有的有荧光现象（如氢化可的松）（2）C-17甲酮基反应：黄体酮与亚硝基铁氰化钠反应生成蓝紫色产物，该反应作为黄体酮的专属、灵敏的鉴别方法（3）C-17α醇酮基反应：加碱性酒石酸显砖红色沉淀，加氯化三苯四氮唑（四氮唑比色法→醋酸可的松）显红色，加氨制硝酸银显黑色沉淀【用于皮质激素药物的鉴别→醋酸地塞米松】（4）可与重氮苯磺酸作用生成红色偶氮染料的甾体激素类药物是：雌二醇【酚羟基】（5）炔基的沉淀反应：与硝酸银反应生成白色沉淀【炔雌醇、炔诺酮】（6）UV：△4-3酮基：240nmA环具有酚羟基的雌激素：280nm（7）酮基的呈色反应：和羰基试剂如2，4-二硝基苯肼、硫酸苯肼、异烟肼、亚硝基铁氰化钠等反应，形成黄色的腙用于鉴别【黄体酮】有关物质与检查硒：二氨基萘比色法游离磷酸盐：磷钼酸比色法含量测定四氮唑比色法皮质激素类药物的C17-α-醇酮基有还原性，在碱性条件下可以定量还原四氮唑生成有色甲噆，此显色反应可用于皮质激素类药物的含量测定柯柏反应比色法雌激素与硫酸-乙醇反应，显红色，并在520nm附近处有最大吸收HPLC：常用UV抗生素抗生素与化学合成药物相比，其结构、组成更复杂，表现为：化学纯度较低：三多：同系物多、异构体多、降解物多活性组分易发生变异稳定性差β-内酰胺类抗生素：青霉素（penicillins）、头孢菌素（cephalosporins）结构：β内酰胺环、6-氨基青霉烷酸（6-APA）、7-氨基头孢菌烷酸（7-ACA）理化性质：β-内酰胺环的不稳定性（青霉素水溶液在pH6~6.8时较稳定）旋光性：青霉素3个手性C（2、5、6），头孢菌素（6、7）酸性与溶解度：游离羧基，相当强的酸性；青霉素的碱金属盐水溶液遇酸析出白色沉淀UV：头孢菌素类有紫外特性，而青霉素类只有侧链含苯环时才有紫外特性。）鉴别异羟肟酸铁反应青霉素及头孢菌素在碱性溶液中与羟胺作用，β-内酰胺环破裂生成异羟肟酸；在稀酸中与高铁离子呈色有关物质与检查本类抗生素的杂质主要有高分子聚合物、有关物质、异构体等聚合物采用分子排阻色谱法色谱柱：亲水硅胶、凝胶或经过修饰的凝胶如葡聚糖凝胶和琼脂糖凝胶等为填充剂流动相pH：2~8（水溶液或缓冲液），可加入适量的有机溶剂（一般不应超过30%）流速：0.5~1.0ml/min结晶性：第一法：偏光显微镜法第二法：X射线粉末衍射法氨基糖苷类抗生素结构：链霉素（链霉胍、链霉双糖胺）无特征的UV吸收鉴别实验N-甲基葡萄糖糖胺反应（Elson-Morgan反应）经水解后，在碱性条件下与乙酰丙酮、对二甲氨基苯甲醛反应，呈樱桃红色。 麦芽酚反应（Maltol）：链霉素特征反应链霉素在碱性溶液中生成麦芽酚，麦芽酚与高铁离子在微酸性条件下（硫酸铁铵）反应显紫红色坂口反应：链霉素水解产物链霉胍的特有反应本品水溶液加氢氧化钠试液，水解生成链霉胍链霉胍和8-羟基喹啉分别同次溴酸反应，其各自的产物再相互作用生成橙红色化合物方法：本品加水溶解，加氢氧化钠与羟基喹啉，加次溴酸钠，显橙红色