临床病原体检测

临床病原体检测第1页，共30页，2023年，2月20日，星期三第一节标本的采集运送、

实验室评价和检查方法临床病原体检查的基本程序1.医生、护士、病人、检验师：正确采集运送标本。2.检验科：直接镜检、免疫学和分子生物检测、病原体分离培养鉴定、药敏实验——报告结果。3.医生：明确诊断、合理用药。第2页，共30页，2023年，2月20日，星期三第一节标本的采集运送、

实验室评价和检查方法一、标本采集和运送标本采集的基本原则1.无菌、及时、按照要求、标注清晰2.根据病史与临床表现确定标本采集的类型与部位，尽量采集病变明显部位标本。3.在发病的早期或急性期采集标本，最好在抗生素使用前（如使用过抗生素应在申请单上注明）。4.采集标本防止污染，并置于无菌容器，加盖密封、立即送检。5.标本必须贴上标签，与检验申请单同时送检。第3页，共30页，2023年，2月20日，星期三第一节标本的采集运送、

实验室评价和检查方法（一）血液1.适应症：疑似菌血症、败血症或脓毒血症的病人。2.一般在抗生素使用前，于发热初期或高峰期采血，已用过抗菌药物治疗者，在下次用药前采集。3.血液与培养基的比例为1：10，一般成人血量10-20ml，婴儿1-5ml，最好在床边接种。第4页，共30页，2023年，2月20日，星期三第一节标本的采集运送、

实验室评价和检查方法（二）尿液1.无菌采集中段尿2.如考虑厌氧菌感染，采取膀胱穿刺法采集标本、无菌厌氧小瓶运送。

3.排尿困难者考虑导尿采集标本。第5页，共30页，2023年，2月20日，星期三第一节标本的采集运送、

实验室评价和检查方法（三）粪便1.自然排便，挑取脓、血或粘液部分于清洁容器中送检。2.排便困难者，采用直肠拭子采集。3.根据细菌种类不同选用合适的运送培养液。第6页，共30页，2023年，2月20日，星期三第一节标本的采集运送、

实验室评价和检查方法（四）呼吸道标本1.类型：鼻咽拭子、痰和经气管采集的标本。2.上呼吸道存在正常菌群，在采集标本与结果分析时应予考虑。3.痰标本：⑴采集时间：晨痰，且在取痰前用清水反复漱口。⑵方法：①自然咳痰②气管镜下采集法③气管穿刺法第7页，共30页，2023年，2月20日，星期三第一节标本的采集运送、

实验室评价和检查方法（五）脑脊液与其它无菌体液1.脑脊液由临床医生采用腰椎穿刺，抽取2-3ml，置于无菌容器中立即保温送检或床边接种。2.胸水、腹水和心包液等标本宜采集较大量标本送检，标本接种于血培养瓶。第8页，共30页，2023年，2月20日，星期三第一节标本的采集运送、

实验室评价和检查方法（六）眼、耳部标本用拭子采样，也可在局部麻醉后取角膜刮屑。第9页，共30页，2023年，2月20日，星期三第一节标本的采集运送、

实验室评价和检查方法（七）泌尿生殖道标本1.男性：无菌采集尿道口分泌物或前列腺液。2.女性：用无菌棉纤采集阴道或宫颈分泌物。第10页，共30页，2023年，2月20日，星期三第一节标本的采集运送、

实验室评价和检查方法（八）创面、组织和脓肿标本1.大面积创伤的创面分泌物：首先清除采集部位的污物，以碘酒、酒精消毒皮肤，再用无菌棉纤多点采取脓液或分泌物，置于无菌试管中送检。2.开放性脓肿及脓性分泌物：用无菌棉纤采取脓液或病灶深部分泌物3.封闭性脓肿：局部消毒后，用注射器抽取，怀疑厌氧菌感染，应隔绝空气采集（九）血清第11页，共30页，2023年，2月20日，星期三第一节标本的采集运送、

实验室评价和检查方法三、检查方法（一）直接显微镜检查（二）病原体特异性抗原的检测（三）病原体核酸的检测（四）病原体的分离培养与鉴定（五）血清学实验第12页，共30页，2023年，2月20日，星期三第一节标本的采集运送、

实验室评价和检查方法革兰氏阳性球菌革兰氏阴性杆菌第13页，共30页，2023年，2月20日，星期三第一节标本的采集运送、

实验室评价和检查方法墨汁染色找新型隐球菌

抗酸染色第14页，共30页，2023年，2月20日，星期三第一节标本的采集运送、

实验室评价和检查方法不染色标本：用于观察病原体的大小、形态与运动等特性。结果评价：部分病原体可借此初步诊断，如暗视野显微镜下见弹簧状螺旋体，应怀疑梅毒螺旋体的感染。第15页，共30页，2023年，2月20日，星期三第一节标本的采集运送、

实验室评价和检查方法明确感染病原体。为临床提供体外抗微生物药物敏感试验结果。第16页，共30页，2023年，2月20日，星期三第三节临床感染常见病原体检查一、流行病学和临床类型（一）流行病学流行病学的特点：（1）疾病谱发生变迁（2）多重耐药株出现（3）器官移植、抗肿瘤化疗和放疗的开展

第17页，共30页，2023年，2月20日，星期三第三节临床感染常见病原体检查（二）临床类型临床常见病原体为：细菌、病毒、支原体、衣原体、立克次体、真菌、螺旋体以及寄生虫等细菌感染是发病率较高的感染性疾病，病原体种类以革兰氏阴性条件致病菌、凝固酶阴性葡萄球菌、耐甲氧西林葡萄球菌和耐药的白色念珠菌为主。病毒感染是人群发病率最高的感染类型第18页，共30页，2023年，2月20日，星期三第三节临床感染常见病原体检查二、检查项目和临床应用（一）细菌感染：⑴检测细菌或其抗原---直接涂片镜检、培养、抗原检测⑵检测抗体⑶检测细菌遗传物质---基因探针技术、PCR技术细菌培养是最重要的确诊方法（二）病毒感染：病毒分离与鉴定、病毒核酸与抗原检测、特异性抗体细胞培养是最常用的病毒分离方法第19页，共30页，2023年，2月20日，星期三第三节临床感染常见病原体检查（三）真菌感染：直接显微镜检查、分离培养、免疫学试验和动物试验、核酸杂交和PCR技术形态学检查是真菌检测的重要手段第20页，共30页，2023年，2月20日，星期三第三节临床感染常见病原体检查（四）寄生虫病：直接显微镜检查是寄生虫感染的主要诊断依据第21页，共30页，2023年，2月20日，星期三第三节临床感染常见病原体检查（五）其它病原体感染1.支原体：分离培养是支原体感染的确诊依据。目前临床多检测支原体抗原与核酸，用于早期快速诊断。2.螺旋体：血清学3.立克次体：血清学、分离培养、核酸检测4.衣原体：直接显微镜检查、分离培养、DNA探针技术和PCR技术，目前临床多检测衣原体抗原与核酸，用于早期快速诊断。5.SARS病毒：免疫学方法检测抗体、基因检测、细胞培养第22页，共30页，2023年，2月20日，星期三第三节临床感染常见病原体检查（六）实验结果分析和临床应用正常人群的无菌体液中检测到细菌，应考虑细菌为感染的病原体。存在正常菌群的标本检测到细菌，应结合细菌的量考虑是否为致病菌。如临床表现支持感染，但培养阴性，应考虑为标本不合格、培养不恰当、病原体为难培养菌或已使用抗生素等因素，尤其是直接镜检找到病原体，而培养阴性，应考虑有L细菌、厌氧菌或苛氧菌感染。第23页，共30页，2023年，2月20日，星期三第三节临床感染常见病原体检查PCR是检测病原体微生物最灵敏的方法，但具有一定的假阳性与假阴性。阳性只表明存在某种病原体的核酸，是否正被感染应结合临床具体分析。血清学试验是目前应用最广泛的感染性疾病检测方法，特异性IgM可作为感染性疾病的早期诊断指标，且可区分原发与复发感染。特异性IgG，尤其双份血清的滴度呈4倍或4倍以上升高，考虑病原体感染。第24页，共30页，2023年，2月20日，星期三第四节病毒性肝炎标志物检测

一、甲型肝炎病毒标志物检测（一）甲型肝炎病毒抗原测定【临床意义】1.HAVAg阳性：见于甲肝患者（二）甲型肝炎病毒抗体测定【临床意义】IgM阳性是特异性早期诊断指标，提示HAV感染期；IgA阳性见于甲肝早期和急性期；IgG阳性出现于恢复期且持久存在，是获得免疫力的标志，提示既往感染。（三）HAV-RNA测定【临床意义】HAV-RNA阳性：对早期诊断具有特异性第25页，共30页，2023年，2月20日，星期三第四节病毒性肝炎标志物检测

二、乙型肝炎病毒标志物检测（一）乙肝六项测定

1.HBsAg【临床意义】

阳性见于乙型肝炎潜伏期和急性期；发病后3个月不转阴，易发展成慢性乙型肝炎或肝硬化；携带者HBsAg也呈阳性。

2.抗HBs【临床意义】是保护性抗体，提示机体有一定免疫力。第26页，共30页，2023年，2月20日，星期三第四节病毒性肝炎标志物检测3.HBeAg【临床意义】阳性表明乙型肝炎处于活动期，是病毒复制活跃，传染性强的指标；持续阳性易转变为慢性肝炎或肝硬化。4.抗HBe【临床意义】出现于急性感染的恢复期，持续时间较长。意味着HBV部分被清除或抑制，复制减少，传染性降低第27页，共30页，2023年，2月20日，星期三第四节病毒性肝炎标志物检测5.

HBcAg:阳性提示有感染性的HBV存在，含量较多表示复制活跃，传染性强，预后较差6.抗HBc：主要包括IgM、IgG、IgA。

(1).抗HBc总抗体：检出率比HBsAg更敏感，可作为HBsAg阴性的HBV感染的敏感指标

(2).抗HBcIgM：是最早出现的特异性抗体，是诊断急性乙型肝炎和判断病毒复制活跃的指标，并提示病人的血液有强传染性。

(3）.抗HBcIgG：是HBV既往感染的指标，不是早期诊断指标第28页，共30页，2023年，2月20日，星期三第四节