微生物学第四章细菌感染的检查方法与防治原则

第四章细菌感染的实验室诊断与防治原则医科大学微免教研室病原菌检测血清学诊断

第一节细菌感染的实验室诊断标本采集与送检的原则形态学检查细菌分离培养与鉴定2采取标本应无菌操作不同情况（如病期、分布、排出部位等）采取不同标本。并尽可能采集病变明显部位的材料采集标本应在使用抗生素之前标本必须新鲜，尽快送检，注意冷藏（少

数应保暖）

一、标本采集与送检的原则病原菌检测二、形态学检查显微镜放大法染色法普通光学显微镜电子显微镜复染色法：用2种以上染料革兰染色抗酸染色负染色法：墨汁负染荧光显微镜（掌握－实验课）4三、细菌分离培养与鉴定

Isolationandidentification病原菌检测细菌的人工培养细菌的鉴定细菌抗原的检测细菌核酸的检测5（一）细菌的人工培养培养基细菌在培养基中的生长情况6培养基cultruemedium用人工方法配制而成的，专供微生物生长繁殖使用的混合营养物制品。71、按营养组成和用途分厌氧培养基基础培养基营养培养基选择培养基鉴别培养基常用培养基种类8常用培养基种类2、按物理性状分：液体培养基+1.5-2.5%琼脂固体培养基+0.3-0.5%琼脂半固体培养基9固体培养基中细菌的生长情况菌落（S型）菌苔

菌落（R型）菌落（colony）：

单个细菌分裂繁殖成一堆肉眼可见的细菌集团。1011液体培养基中细菌的生长情况混浊、沉淀、菌膜沉淀生长混浊生长表面生长12半固体体培养基中云雾状生长沿穿刺线生长有鞭毛细菌无鞭毛细菌13（二）细菌的鉴定

1.

形态学鉴定：显微镜下

2.

生化试验鉴定：检测代谢产物

3.

血清学鉴定：已知抗体检测未知的纯培养菌

4.药物敏感试验

5.

动物试验：测定细菌毒力(半数致死量、半数感染量)

病原菌检测14

（三）细菌抗原的检测

RIA(放射免疫)，ELISA，免疫荧光法，Westernblot，对流免疫电泳（四）细菌核酸的检测

核酸杂交

PCR

基因芯片（genechips）病原菌检测15

用已知细菌或特异性抗原检测血清中的有无

相应特异性抗体及其动态学变化。适用于抗原性较强的细菌或病程较长的感染

性疾病的诊断。

若恢复期血清抗体效价比早期升高

4倍或4倍以上，有诊断意义。

四、血清学诊断16第二节细菌感染的防治原则一、人工主动免疫：主要用于预防（一）疫苗

死疫苗，减毒活疫苗

亚单位疫苗、基因工程疫苗

多肽疫苗、DNA疫苗等（二）类毒素

17死疫苗与活疫苗的比较种类活疫苗死疫苗制备特点减毒或无毒死菌，保持免疫原性制备方法非正常培养理化方法接种次数1次，量小，可在体内增殖，类似轻型感染或隐性感染2-3次，量大，在体内不增殖，发热或局部肿痛反应等免疫类型体液免疫，细胞免疫体液免疫免疫效果好，维持时间长（1-5年）较差，维持时间短（0.5-1年）安全性保存可能毒力回复不易保存好易保存18人工主动免疫免疫原性19二、人工被动免疫：主要用于紧急预防和治疗抗毒素（含抗体的血清）

免疫球蛋白（血清丙种球蛋白等）

细胞因子制剂：IL、IFN-γ、CSF第二节细菌感染的防治原则202122三、细菌感染的药物治疗（一）抗菌药物的种类抗菌药物包括抗生素和化学合成抗菌药物（二）抗菌药物的主要作用机制影响细胞壁的合成:青霉素影响细胞膜的功能:多粘菌素影响蛋白质的合成:链霉素(30S),红霉素(50S)影响核酸代谢: