临床微生物标本采集1课件

临床微生物标本的采集检验科：宁丽萍王占科2013.07.28

几个概念1.标本=样品=从整体里取出来的部分物质标本不是整体，但要代表整体2.检验结果准确，严谨地说，是标本内信息表达准确。标本检验结果准确但对病人来说未必准确！3.标本溯源患者体内信息的不确定性！护士，医生，卫勤人员等工作已经参与了检验结果全程质量控制行为！感谢您们！1.为感染的诊断提供依据2.为抗感染治疗提供参考3.临床流行病学调查

微生物检验的一个重要功能就是进行细菌耐药监测，以指导临床合理使用抗生素，并制定合理的用药方案。微生物检验的作用标本的采集和处理原则标本质量的好坏直接影响实验结果的正误。标本采集不当可导致假阴性，假阳性结果的出现。标本的采集，送检，保存等各个环节都要规范操作，严格进行质量控制，是确保实验结果准确可靠的前提。*盛标本容器须经灭菌处理。或为一次性无菌塑料盒。*送检标本应注明来源和检验目的，以便选用相应的培养基和适宜的培养环境，必要时应注明选用何种抗菌药物。临床常见微生物标本类型痰，咽拭子血液，骨髓，胸腹水，穿刺液，关节液，心包液引流液，胆汁中段尿粪便，直肠拭子，褥疮溃疡脓肿伤口分泌物，组织，静脉导管脑脊液，前列腺液，阴道分泌物呼吸道标本

RespiratoryCultures咽拭子1.清水漱口后，将棉拭子擦拭到咽后壁，注意避免触及舌，口腔黏膜和唾液，留取后放入空的无菌管内，及时送检。2.对化脓性扁桃体炎或口腔念珠菌病标本提取时，用棉拭子在病灶部位擦拭数次即可。不要超过2h送检接种。不能及时送检请放于4℃冰箱保存。

目的：培养和鉴定引起咽炎的病原菌，不能反映下呼吸道感染的情况

发报告时间：阴性正常结果两个工作日，阳性结果需要三~四个工作日痰标本质量带血痰唾液or诱导痰(?)脓痰粘液样痰显微镜下不合格痰标本痰标本抗酸染色后镜检一、血培养送检指征1．发热（≥38℃）或低温（≤36℃）2．怀疑有菌血症或脓毒症如休克、寒颤3．白细胞>10×109/L4．血小板减少5．皮肤粘膜出血6．昏迷7．多器官衰竭8．严重的局部感染9．呼吸频率加快等

血培养瓶培养包括血液，骨髓，胸腹水，穿刺液，关节液，心包液，等标本，在采集时的质量直接关系到血液瓶培养的阳性率和准确性皮肤消毒：75%酒精擦拭静脉，注意彻底消毒，因许多微生物，尤其葡萄球菌属通常存在皮肤表面或近表层处，易造成污染培养瓶的消毒：75%酒精消毒培养瓶橡皮塞待60秒采血时机：在发热或寒战时，尽量在使用抗生素之前，若临床怀疑为菌血症的应在24h内再连续采集三次血培养标本采血量：成人5-10ML婴幼儿：1-2ML(除血液之外的正常无微生物部位里体液标本请抽2--5ML,例如：骨髓至少不少于0.5ML注入血培养瓶）血培养瓶培养(续)采集时间：①抗生素使用前②停止用药1-2天后③下次用药前④血药浓度较低时抽取。标本采集后注入无菌小瓶或无菌试管中送检，也可将抽取液直接注入血培养瓶送检

注：血培养申请单上请抽血护士手写抽血时间，将培养瓶上的小条码贴到申请单上，并在血培养瓶上写上科室，姓名，床号。立即常温送检！！！禁止冷藏发报告时间：阴性正常结果五个工作日，阳性：及时报告危急值血培养阳性1.培养出肠球菌，金黄色葡萄球菌，革兰阴性球菌，革兰阴性杆菌等时，多数可以确认为病原菌2.培养出凝固酶阴性葡萄球菌、草绿色链球菌、芽胞杆菌等时，感染？污染？引流液，胆汁采集：用70%酒精消毒导管，用注射器从引流管无菌采集2-3ml，注入无菌容器。常温保存2h内及时送检。标本不能直接从引流袋中放出，因为引流液在袋中的储留时间太长容易生长细菌。造成假阳性结果，误导临床。发报告时间：阴性正常结果三个工作日，阳性结果及时发出。尿培养标本

UrineCulture中段尿在未使用抗生素前采集标本，注意避免消毒剂污染标本，留取清洁中段尿，以晨起第一次中段尿为宜1、避免尿道口污染！先用清水冲洗或消毒湿巾消毒外阴及尿道口周围，再用洁净纸巾等擦干，先排出一部分尿以冲洗尿道口，截留中段尿5ml左右于无菌瓶中。2、标本留取后及时送检，不能立即送检者，可暂存4℃冰箱，但不能超过1小时后送检。3、尿液留置到容器的2/3即可，不要留取太满，瓶盖也不要随便打开，以污染影响检测准确度。

注：长期插有导尿管的病人，建议拔掉重置，或行耻骨上膀胱穿刺留取标本，切勿在导尿袋中直接留取标本。会造成结果假阳性，错误用药。留置导尿管中采集或清洗不干净的尿液标本（经常被培养出三种以上细菌，疑污染，微生物室会做好登记退回申请单，需要临床科重新留取标本检查）发报告时间：阴性正常结果两个工作日，阳性结果及时发出粪便标本采集的时间腹泻病人在急性期用药前采集；沙门菌感染、肠热症应在2周内采；胃肠炎在急性期6h内采集新鲜脓血便。有腹泻的病人，在送培养标本的同时可以送细菌涂片检查。抗生素相关性腹泻，培养是阴性，但涂片检查却可以看到细菌比例失调，涂片临床意义大于培养。脓肿伤口分泌物，组织，静脉导管1、采集前用无菌盐水或70%酒精彻底清创，擦去表面渗出物和污染杂菌。用无菌注射器穿刺法抽吸深部脓液，或从伤口深处采集渗出分泌物放入无菌容器。如果采集到的标本量比较少时，可以用无菌拭子蘸zhan少许无菌生理盐水，以保持标本湿度，2、在送检小样本组织时一般也需要滴加几滴无菌生理盐水保持湿润，用无菌容器送检。（组织或抽吸物标本送检准确率高于拭子分泌物标本)3、需取深静脉导管培养时，用70%酒精消毒导管周围皮肤，将导管末端约5cm移入无菌管中及时送检。分泌物，组织，静脉导管在常温放置都不要超过1h及时送检.注意事项：①烧伤创面、脓肿标本不应采集表面或表皮组织；②不提倡采集烧伤或动物咬伤12小时内的伤口，除非存在感染指征；③当创伤出血时，敷用药物2h以内不应采集标本，此时获得阳性结果的机会很少。发报告时间：阴性正常报告三个工作日，阳性结果及时报告。脓肿伤口分泌物组织脑脊液，前列腺液，阴道分泌物采集脑脊液一般用腰椎穿刺术获得。第一管脑脊液送培养。采集量一般不低于1ML,置于无菌管内立即送检。脑脊液培养时医生一般会考虑是否为脑膜炎双球菌感染，脑膜炎双球菌对环境温度敏感，不能放置冰箱，需35℃下保温送检。但做病毒检查的脑脊液标本时应放置冰块，可在4℃冰箱保存72小时内送检。以肥皂水和清水清洗尿道口及附近皮肤，直肠按压前列腺获取分泌物以无菌管采集或用无菌拭子送检。阴道分泌物的采集可用无菌棉拭子自阴道深部或阴道穹后部，宫颈2-3cm处，转动并停留10-30秒取分泌物，淋球菌培养同样需要保温及时送检，衣原体，支原体等培养无法及时送检时应该放置冰箱4℃保存。注意事项：恶露标本不作为培养标本。

℃新型隐球菌手工K-B法药敏试验目前我科微生物室尚需开展的项目厌氧菌培养（省内各大医院均未开展，因影响因素太多，）病毒鉴定（需在四级实验室内操作）结核菌培养(培养时间太长需56天才可发报告）（分子生物学技术和免疫学是最佳诊断的方法）

微生物培养还应注意的问题1.培养阳性的分离菌不一定是真的病原菌，特别从有菌部位来的，如痰标本；2.无菌部位培养出来的病原菌应当连续监测，若病原菌发生改变或治疗效果不佳时应考虑更换抗生素；3.细菌的耐药性在治疗过程中可能会发生改变，要注意观察是否有耐药性的变迁。小结1、微生物标本在标本采集前、中、后必须保证无菌，否则无法真实客观地反应病人情况。2、只有保证标本采集的质量，才能为提高微生物及其药敏检测的准确性，为及时、有效的治疗提供实验室依据。3、标本采集后的保存和运输同样重要，保存不当或运输过程中造成污染，都会导致错误的检验结果。4、重视分析前的质量管理，确保病人标本的检测质量这是至关重要的一个环节，对于不合格的标本,采用现代化的检测系统也无法获得可靠的结果。保证检验结果的准确性不仅仅是检验科的责任，临床及病人的配合也是至关重要的，检验科的检验质量离不开临床的帮助。几个常识1.脓液是白细胞死亡破裂的产物，因白细胞本身有杀细菌作用，因此，脓液未必能培养出细菌。3.血细菌培养是培养的活细菌，抗生