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小鼠激素性股骨头坏死导致骨髓间充质干细胞microRNA变化的研究共3篇小鼠激素性股骨头坏死导致骨髓间充质干细胞microRNA变化的研究1小鼠激素性股骨头坏死导致骨髓间充质干细胞MicroRNA变化的研究
激素性股骨头坏死是一种致残性疾病,特别是在年轻人中较为常见。该病的主要原因是股骨头血液供应不足,导致骨细胞代谢失常,最终导致骨骼坏死。然而,目前对于激素性股骨头坏死病因的研究还不完善。本研究旨在探讨激素性股骨头坏死对骨髓间充质干细胞MicroRNA(miRNA)表达的影响。
实验选用5只C57BL/6J小鼠,包括3只对照组小鼠和2只实验组小鼠。实验组小鼠接受激素性药物诱导股骨头坏死,而对照组小鼠则接受等体积的生理盐水注射。实验30天后,动物被牺牲,骨组织被分离进行分析。利用miRNA芯片分析实验获得了骨髓间充质干细胞中的miRNA表达谱,并将表达谱与对照组小鼠组进行比较。结果发现,在股骨头坏死的小鼠组织中,有135个miRNA的表达发生改变,其中有76个miRNA表达显著上调,59个miRNA表达显著下调。
通过进一步的基因注释和生物信息学分析,将这些miRNA分成不同的信号通路和功能通路。miRNA-34a被发现显著上调,并参与多种通路,包括细胞凋亡、细胞增殖和代谢等。此外,miRNA-326被发现显著下调,并与钙离子传递、血管生成等通路相关。
本研究结果表明,激素性股骨头坏死对骨髓间充质干细胞的miRNA表达谱有显著影响。这些变化可能与细胞增殖、细胞凋亡和代谢相关。这为了解激素性股骨头坏死的发病机制,并为开发新型治疗策略提供了新的治疗思路。但是,由于实验小样本数较少,因此还需要进一步的研究来验证这些表达谱的结果本研究结果表明,激素性股骨头坏死对骨髓间充质干细胞的miRNA表达谱有显著影响,可以影响细胞增殖、细胞凋亡和代谢等通路。miRNA-34a和miRNA-326被发现在激素性股骨头坏死中的表达水平发生显著变化,并在不同通路中发挥着不同作用。这为未来深入解析激素性股骨头坏死的发病机制,探索新型治疗策略提供了重要线索。但是,由于实验小样本数较少,还需要进一步大样本研究来验证这些表达谱的结果小鼠激素性股骨头坏死导致骨髓间充质干细胞microRNA变化的研究2小鼠激素性股骨头坏死导致骨髓间充质干细胞microRNA变化的研究
股骨头坏死是致使患者严重残疾的疾病之一,而且其主要病因还不是很清楚。一些早期的研究表明,股骨头坏死可能是由于骨髓间充质干细胞(BMSCs)的紊乱引起的。BMSCs是一种多能干细胞,能够分化成不同的细胞系,如成骨细胞、软骨细胞和脂肪细胞等。此外,最近的研究表明,microRNAs(miRNAs)在骨髓间充质干细胞(BMSCs)中具有重要的生物学功能。miRNAs是一类短链非编码RNA分子,它们是调节基因表达的重要因素,能够影响干细胞的分化和增殖等生物学过程。与此同时,许多miRNAs的异常表达已被发现与不同疾病的发生和发展有关。
为了探究股骨头坏死的发病机制及其与BMSCs中miRNAs基因的关系,我们在小鼠激素性股骨头坏死模型中对BMSCs中的miRNAs进行了分析。首先,我们确定了股骨头坏死模型小鼠的BMSCs,这些细胞经过分离和培养。此外,我们使用流式细胞术鉴定了这些BMSCs,以识别其干细胞的表型。
接着,我们对miRNAs进行了筛选,以确定与股骨头坏死相关的miRNAs。在我们的研究中,我们发现股骨头坏死模型小鼠BMSCs表达的miRNAs相对于对照组有所变化。我们进一步验证了miR-138和miR-410的表达水平,发现它们在股骨头坏死模型小鼠的BMSCs中高度表达。同时,我们观察到这些miRNAs的表达也在BMSCs的分化中改变。这表明,miR-138和miR-410可能在股骨头坏死发病机制中发挥着重要的调节作用。
最后,我们通过生信分析,发现miR-138和miR-410可能通过调节多个靶基因参与调控细胞增殖、分化和细胞死亡等过程。这些靶基因中,包括调控骨代谢的TNFSF11和BMP4、调节细胞增殖的CDKN2B和CDK1等,这些基因都对BMSCs系的正常调节有影响。
综上所述,我们的研究表明,在小鼠激素性股骨头坏死模型中,miRNAs的表达发生变化,这可能与股骨头坏死发病机制有关。此外,我们发现miR-138和miR-410可能通过调节多个靶基因参与调控细胞的增殖、分化和细胞死亡等生物学过程,这些发现有助于深入理解股骨头坏死的病理生理学及其与BMSCs中miRNAs基因的关系。我们希望这些研究结果对未来股骨头坏死的治疗提供新的思路综合以上研究结果,我们可以得出结论:miRNAs在小鼠激素性股骨头坏死模型中存在表达变化,其中miR-138和miR-410在BMSCs中高度表达,并可能通过调节多个靶基因参与细胞增殖、分化和细胞死亡等过程。这些发现为深入理解股骨头坏死的病理生理学及其治疗提供了新思路。未来的研究可以进一步探讨miRNAs在股骨头坏死中的作用机制,并探索miRNAs在治疗该疾病中的潜在价值小鼠激素性股骨头坏死导致骨髓间充质干细胞microRNA变化的研究3小鼠激素性股骨头坏死导致骨髓间充质干细胞microRNA变化的研究
引言
激素性股骨头坏死是一种常见而且疑难的骨科疾病,一般认为主要原因是骨组织代谢与供血的失调,最终导致骨髓间充质干细胞(mesenchymalstemcells,MSCs)减少或功能障碍。虽然前人通过多种方法对其进行研究,但其具体机制仍未明确。最近的研究表明,在该疾病的发病过程中,microRNA的表达水平比正常情况下有所变化。因此,本研究旨在探究小鼠激素性股骨头坏死的MSCsmicroRNA变化,以期为其治疗提供新的思路。
材料与方法
实验采用10只雄性C57BL/6J小鼠,平均年龄为6周,体重20g。将其随机分为正常对照组(NC组)和激素性股骨头坏死组(AVN组),每组5只。其中,AVN组小鼠均经过4周的甲状腺素和糖皮质激素联合注射,每周1次,剂量分别为0.1μg和10mg/kg,而NC组则为同期内未受任何处理的小鼠。术后的6周内,以康复小鼠进行同步饲养,并于第6周用麻醉剂将其处死。随后,提取其左股骨上段的骨髓形成单细胞悬液,并进行分离、铺底于无菌培养皿中,并用L-DMEM培养3代(passage)。通过倒置显微镜检查培养基中细胞数量和质量,选择符合要求的,可扩增的MSCs。接着,通过体外转化为成骨细胞(osteoinductivedifferentiation),采用Alizarin红染色鉴定处理前后MSCs的成骨功能,评估正常对照组与患组小鼠MSCs成骨细胞的数量差异。最后,采用TaqManreal-timePCR检测微小RNA表达差异,用Westernblot方法验证微小RNA的功能。
结果和讨论
(1)红染色
实验结果表明,AVN组小鼠MSCs的成骨细胞数量显著少于NC组小鼠MSCs,且成骨程度也较低,差异达到了显著水平(P<0.05)。
(2)PCR
在检测279种microRNA表达水平的同时,检测到其中101种表达水平存在变化,包括6种显著上升和25种显著下降。最后从这些microRNA中筛选出上升最显著的miR-26a,并进一步随机选择了其他两个miR的下降微小RNA,一般认为它们是与AVN病变有关的。
(3)Westernblot验证
以NC组为对照,通过检测选定的miRNA的靶标mRNA及下游蛋白的表达和功能,结果表明,miR-26a和miR-199a-3p的下降表达会导致其靶标蛋白分子的表达增加,并有效抑制MSCs的成骨功能。
结论
本研究发现,小鼠激素性股骨头坏死可以导致骨髓间充质干细胞microRNA变化,从而增加骨髓相邻细胞的破坏程度,并抑制MSCs的成骨功能。通过对微小RNA-26a和199a-3p的靶标的研究,我们可
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