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文档简介

———PCR基因扩增仪的分类众多，如何选择合适自己实验的那个它

什么是PCR

聚合酶链式反应（PCR）是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术，它可看作是生物体外的特殊DNA复制，PCR的最大特点是能将微量的DNA大幅增加。因此，无论是化石中的古生物、历史人物的残骸，还是几十年前凶杀案中凶手所遗留的毛发、皮肤或血液，只要能分离出一丁点的DNA，就能用PCR加以放大，进行比对。这也是"微量证据'的威力之所在。由1983年**Mullis首先提出设想，1985年由其发明了聚合酶链反应，即简易DNA扩增法，意味着PCR技术的真正诞生。到如今2023年，PCR已发展到第三代技术。1976年，中国科学家钱嘉韵，发现了稳定的TaqDNA聚合酶，为PCR技术发展也做出了基础性贡献。

PCR是利用DNA在体外摄氏95高温时变性会变成单链，低温（经常是60C左右）时引物与单链按碱基互补配对的原则结合，再调温度至DNA聚合酶最适反应温度（72C左右），DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5-3)的方向合成互补链。基于聚合酶制造的PCR仪实际就是一个温控设备，能在变性温度，复性温度，延伸温度之间很好地进行控制。PCR基因扩增仪是分子诊断实验室的重要工具，直接影响临床检测结果的准确性、重复性、甚至工作效率。其有着不同的分类与类型，所以我们一定要清楚。

PCR基因扩增仪分类：

1.普通的PCR仪

一次PCR扩增只能运行一个特定退火温度的PCR仪，又叫传统的PCR仪。

用途：主要是做一些简单的、对单一退火温度的目的基因进行扩增。（1）梯度PCR仪

一次PCR扩增可以设置一系列不同的退火温度条件(温度梯度)，通常为12种温度梯度的普通PCR仪。

用途：研究未知DNA退火温度的扩增。

（2）原位PCR

将具有细胞定位能力的原位杂交技术运用于从细胞内靶DNA的定位分析，在细胞内实现基因扩增的普通PCR仪。

用途：用于在细胞的靶DNA所在位置上进行基因扩增。

2.实时荧光定量PCR仪

PCR扩增时加入的引物利用荧光素进行标记，使引物和荧光探针同时与模板进行特异性结合，扩增结果通过荧光信号采集系统实时采集信号并输送到计算机分析处理系统，实时输出量化结果，这样的PCR仪叫实时荧光定量PCR仪。

（1）金属板式实时定量PCR仪

可作为普通PCR仪使用

可带梯度功能

可容纳的样本量大，无需特殊耗材

温度均一性欠佳，有边缘效应，标准曲线的反应条件难以做到与样品完全一致

（2）离心式实时定量PCR仪

温度均一性较好

使用的是同一个激发光源和检测器，随时检测旋转到跟前的样品，有效减少系统误差

可容纳样品量少，有的需用特殊毛细管作样品管，增加了使用成本，也不带梯度功能

（3）各孔控温的定量PCR仪

不同样品槽分别拥有的智能升降温模块，各孔控温，适合多指标快

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