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文档简介
第三章工业菌种的选育工业菌种的育种:是运用遗传学原理和技术对某个用于特定生物技术目的的菌株进行的多方位的改造
目的:强化现存的优良性状去除不良性质增加新的性状亚硝基胍诱变曲霉菌
N—甲基—N‘-硝基-N-亚硝基胍(NGN,MNNG或TG)对真核或原核微生物都有强烈的诱变作用。其精确的作用机制尚不很清楚,据认为是伴随着重氮甲烷的生成及在酸性条件下生成亚硝酸,直接作用于细胞内的DNA复制系统,从而诱发了变异。MNNG的诱变作用随pH的升高而增强。(二)操作步骤1.单孢子悬液制备取斜面,加入6ml0.1mol/LpH6.0的磷酸缓冲液,用接种环刮下孢子,振荡试管,立即通过带滤纸漏斗过滤,由此制得单孢子悬液,若孢子液浑浊状,其孢子浓度可达l06个/ml,此为待处理孢子悬液。2.MNNG溶液的制备用分析天平称取2mg,加入2ml0.1mol/LpH6.0磷酸缓冲液,于暗处振荡溶解。第二节营养缺陷型的选育营养缺陷型是指通过诱变而产生的缺乏合成某些营养物质如氨基酸、维生素和碱基等的能力,必须在其基本培养基中加入相应的营养成分才能正常生长的变异株。与营养缺陷型对应的是野生型。能满足野生型菌株正常生长的培养基称基本培养基(MM);在基本培养基中加入相应的营养成分的称补充培养基(SM);能满足各种营养缺陷型生长的称完全培养基(CM),如牛肉膏蛋白胨培养基、麦芽汁培养基等。营养缺陷型的用途
营养缺陷型在生产上和科学研究上用途很大。目前生产氨基酸、核苷酸的菌种都是各种类型的缺陷型。要研究代谢途径,育种技术都必须有营养缺陷型的菌株为材料。在育种工作中,很多突变高产菌株是营养缺陷型菌株。筛选营养缺陷型的步骤诱变淘汰野生型检出缺陷型确定生长谱第四节筛选新的代谢产物
一、开发新的代谢产物的途径
(1)从自然界分离新的微生物菌株,或采用新的检阅方法筛选新的代谢产物。(2)对已知微生物的代谢产物进行化学修饰。(3)利用微生物转化改造代谢产物的结构。(4)通过原生质体融合获得新的代谢产物。(5)DNA重组技术。突变型菌株的筛选
一、产量性状突变株的筛选
三、筛选微生物代谢产物的目标
筛选克服抗生素抗性菌株的活性物质;筛选抗肿瘤、抗病毒的活性物质;研究有药理活性的酶抑制剂及免疫调节剂;寻找食品工业最好的酵母培养物;筛选降解有害物质的微生物以及治疗上具有低毒、长效的化学药物等。(二)间接方法筛选医用抗生素,可用细茵、真菌、病毒或肿瘤模型,寻找抗细菌、抗真菌、抗病毒、抗肿瘤抗生素、酶抑制剂
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