高效液相色谱法课件

高效液相色谱概述zhxf概论高效液相色谱法发展史高效液相色谱法在药物分析中的作用高效液相色谱法与其他分离方法的比较色谱类型zhxf高效液相色谱法发展史“色谱”这一术语是根据“chromatography”一次翻译而来由俄国植物学家茨维特(Tsvet)于1903年分离植物色素的过程中首创直到1931年库恩(Kohn)等人才用它分离了胡萝卜素，并开始应用我国于50年代后期开展了这方面的工作，所用名称有色层法或层析法最终于80年代全国统一用色谱法，包括TLC(薄层色谱),GC,HPLC高效液相色谱(HPLC)的发展始于20世纪60年代中后期70年代中后期微处理技术的应用提高了仪器的自动化水平和分析精度80年代新一代色谱仪是智能色谱仪目前HPLC已成为化学、药学、医学、生物化学、环保等学科领域中重要的分离、分析技术，是各种实际分析课题必不可少的工具zhxf美国药典含量测定方法比较（品种数）版本HPLCGCTLCUVIRFLAASNMRTI20版62682546921107221版363142698131727222版87115715542171776578423版1188100449015578280324版138611113741414962775AtomicAbsorptionSpectroscopy原子吸收光谱NuclearMagneticResonance核磁共振Infraredray红外光谱Fluorescencespectrum荧光光谱TI滴定分析法zhxf

药物分析研究方法

以我国分析试验室杂志中的药物分析综述统计分析，在20世纪90年代后，每两年有一篇药物分析综述，每篇综述了两年内国内杂志发表的有关药物分析的论文，见表1992~2000年分析试验室杂志药物分析论文统计/%方法19921994199619982000UV27.727.128.517.616.2HPLC27.029.239.244.540.0GC12.810.37.69.78.0TLC13.416.612.216.121.4HPCE3.25.6电化学8.54.72.5其他10.611.410.09.08.8论文总数553923760870879zhxf高效液相色谱法与其他分离方法的比较项目分馏结晶提取经典柱色谱TLCGCHPLC分离效率低低低低高高高分离速度慢慢慢慢较快快快应用范围窄窄广广广较窄广样品用量多多多多少少少可否用于制备可可可可尚可可可可否用于痕量分析否否否否可可可分析鉴定可可否否可可可分析灵敏度低低--高高高zhxf关于色谱仪北京北分瑞利集团色谱中心

zhxfHPLC的组成输液系统进样系统色谱柱检测系统数据处理zhxf特点四十多年的色谱生产制造经验维修保养方便价格合理模块化的系统组成单元提供应用支持

开放的接口协议zhxfK-1001高压输液泵采用电子脉动抑制技术,液流无脉动丰富的程序可用于梯度及外部事件的控制定时唤醒功能具有程序间的链接功能zhxfK-1001高压输液泵的特点

介质：钛合金、PEEK及特氟隆压力脉动抑制技术，使其压力脉动小于0.1MPa

程序：高压梯度控制低压梯度控制30个程序，其中有20个基本程序，9个链接程序，一个唤醒程序。每个程序可编辑100行外部事件控制：可用于控制馏分收集器、开关阀以及其他外部设备远程控制

GLP记录模/数转换器内置zhxf分析型泵的流速精度及流量稳定性比较K-1001 0.5% 0.1%DionexP580LPG 0.1% ?ShimadzuLC-10TVP 2.0% 0.3%HP1100 2.0% 0.3%Waters600E 0.5% 0.1%SpectraSystem 1.0% 0.2%zhxf具有在线扫描功能可进行波长的编程控制可进行馏分收集的控制可进行峰纯度检测单机模式可同时输出两路信号K-2600快速扫描紫外分光检测器zhxfK-2600紫外分光检测器特点控制模式： 独立模式、外部模拟控制或工作站软件反控检测方式： 独立模式下同时使用两个波长检测 反控模式下同时使用四个波长检测扫描功能： 在线扫描程序功能： 30个程序 01#~20#通用程序，99行/程序 21#~29#链接程序 30#唤醒程序(常用于灯的开启及预热) 可对检测波长及扫描等进行编程 可对外部事件进行编程(如馏分收集等)灯源： 氘灯或钨灯GLP记录模/数转换器内置zhxfK-2600紫外分光检测器

噪声及漂移比较K-2600 ±10.0µAU 500µAU/hDionexUVD1705 ±50.0µAU 500µAU/hShimadzuLC-10AVP ±5.0µAU200µAU/hWaters2487DUAL ±3.5µAU100µAU/hBiotek ±12.0µAU300µAU/h[HP1100(Multi) ±8.0µAU2000µAU/h]zhxfDAD检测器的参数1024个二极管氘灯:190-740nm钨灯:400-1020nm三维色谱图二维及三维谱图峰纯度,光谱存储zhxfDAD的噪声和漂移比较K-2800 ±10µAU300µAU/h[K-2700] ±30µAU1000µAU/hDionexPDA-100 ±10µAU 500µAU/hShimadzuLC-10AVP ±8µAU 1000µAU/hHP1100 ±10µAU 2000µAU/hWaters ±15µAU1000µAU/hMerck ±15µAU1000µAU/hThermoseperation ±3µAU 500µAU/hzhxf自动进样器zhxf色谱柱的应用C18 RP/IPC 水溶性维生素、镇静药、儿茶酚胺、食物防腐剂、 醛、酮、前列腺素、生物碱 表面活性剂、肽,缩氨酸、农药,杀虫剂、药剂,药物 有机和无机阴离子C8 RP 类固醇、核苷、极性药物、抗抑郁药 毒品、胆碱酯酶、青霉素、生物碱、肽,缩氨酸C6H5 RP 芳香族化合物、生物碱

C4 RP 极性化合物、高分子如蛋白质（300Å）Si NP 苯甲醚、黄曲霉素、嘌呤衍生物zhxfDiol NP 类固醇、四环素、蛋白质(300Å)的体积排阻色谱NH2 NP/RP 碳水化合物,醣类、醛类、苯胺类、酯类CN NP/RP 双键化合物、芳香