无菌和无菌操作技术

项目六无菌和无菌操作技术无菌和无菌操作技术1/29无菌：没有活微生物存在状态。无菌操作技术：用于预防微生物进入无菌范围造成污染操作技术。无菌和无菌操作技术2/29一、无菌环境二、无菌器具、培养基三、无菌操作技术四、基本规则无菌和无菌操作技术3/29一、无菌环境1、无菌室2、超净工作台3、生物安全柜4、火焰周围无菌和无菌操作技术4/291、无菌室标准无菌室要求：房间设置（外面有缓冲室）、空气过滤、墙面、墙角、微生物操作相关设备、紫外灯等。无菌室布局无菌和无菌操作技术5/29如条件有限，可在微生物试验室内专辟一个小房间作为无菌室。能够用板材和玻璃建造，面积4-5平方米即可。板材和玻璃隔出无菌室无菌和无菌操作技术6/292、超净工作台超净工作台是一个提供局部无尘无菌工作环境垂直单向流型空气净化设备。超净工作台无菌和无菌操作技术7/293、生物安全柜生物安全柜外形与超净台类似，也提供局部无尘无菌工作环境。但它设置了风槽，气流不会吹向使用者，能够有效保护使用者。生物安全柜无菌和无菌操作技术8/294、火焰周围通常使用酒精灯、煤气灯，其火焰周围是无菌区域（直径10cm左右）。这并不是利用高温杀死细菌，而是利用向上单向气流形成一个无菌区域。火焰周围是无菌区域无菌和无菌操作技术9/29二、无菌器具、培养基1、玻璃、金属等器具干热灭菌法2、玻璃、金属、含水物品高压蒸汽灭菌法3、金属、玻璃器具火焰灭菌法4、液体或水溶性物质过滤除菌法无菌和无菌操作技术10/291、玻璃、金属等器具--干热灭菌法设备：电烘箱用途：用于玻璃器皿、金属器具等耐热物品烤干和灭菌。条件：160-165℃，灭菌1-2小时。

无菌和无菌操作技术11/292、玻璃、金属、含水物品等--高压蒸汽灭菌法设备：高压蒸汽灭菌锅用途：培养基、生理盐水、废弃物、采样器、纱布、衣物灭菌。条件：121℃水蒸气15分钟

培养基普通使用高压蒸汽灭菌法无菌和无菌操作技术12/293、一些金属、玻璃器具--火焰灭菌法即在火焰外焰上灼烧进行灭菌。用途：接种环、接种针；涂布器；试管管口、锥形瓶瓶口等灭菌。无菌和无菌操作技术13/294、液体或水溶性物质--过滤除菌法器具：细菌过滤器用途：不耐高温液体、水溶性物质除菌。细菌过滤器无菌和无菌操作技术14/29三、无菌操作技术我们经过一定技术来确保目标微生物、培养基不被环境微生物污染，这些技术就是无菌操作技术。包含手部清洁消毒，用接种针、接种环、吸量管、涂布棒等工具进行各种操作等等。无菌和无菌操作技术15/291、手部清洁消毒洗手：手部有可见灰尘时、饭前、便后，用水和肥皂洗手；Handrub（揉手）：手部较清洁时，75%乙醇或者醇基消毒剂揉手。无菌和无菌操作技术16/29动作：手掌-手背-指缝-手指-拇指-指尖-手腕无菌和无菌操作技术17/292、培养皿操作培养皿开合：单手打开和盖上皿盖，包含持皿法和皿加法两种。此操作用于制作培养基平板、接种等。持皿法无菌和无菌操作技术18/29皿加法无菌和无菌操作技术19/293、接种环操作包含灼烧接种环、接种、划线等。无菌和无菌操作技术20/29灼烧接种环先斜放外焰灼烧接种环，然后垂直放置后继续灼烧，再斜烧金属杆。现在红外接种环灭菌器使用也比较广泛。红外接种环灭菌器无菌和无菌操作技术21/29用接种环进行接种无菌和无菌操作技术22/29用接种环进行划线无菌和无菌操作技术23/294、涂布棒操作灼烧灭菌：能够沾酒精然后灼烧，灼烧范围要包含其杆部。无菌和无菌操作技术24/29涂布：将菌液滴在培养基表面中央。右手拿涂布棒将菌液沿一条直线往返推进，然后沿一垂直线来回推进，平板边缘处可改变方向再涂几次。涂布无菌和无菌操作技术25/295、试管操作单试管操作（注意左右手使用）无菌和无菌操作技术26/29双试管操作无菌和无菌操作技术27/29四、基本规则不得留长指甲，头发需扎好；无菌操