血常规分析中的误差因素及血涂片复检规则 北京协和医院检验科

血常规分析中的误差因素及

血涂片复检规则北京协和医院检验科

崔巍多种病理条件对血常规检测的干扰假性血小板减少样品采集环节中的血小板聚集EDTA诱导的血小板聚集血小板卫星现象巨大血小板假性血小板增多红、白细胞碎片的干扰小红细胞对血小板检测的影响多种病理条件对血常规检测的干扰红细胞冷凝集所致假性红细胞减少巨大血小板所致假性红细胞增多白细胞聚集所致假性白细胞减少红细胞溶血不良所致假性白细胞增多有核红细胞所致假性白细胞增多血小板检测的病理性干扰因素末梢取血不顺畅，组织液混入抗凝剂干燥后混匀不好抗凝剂浓度不够，1~1.5mg/mL真空取血管采血后未充分混匀样品采集环节中的血小板聚集WBCLYM%MXD%NEUT%PLTPDWMPVP-LCR5.40.1900.1150.69528811.29.40.213×109/L×109/LfLfLWBCLYM%MXD%NEUT%PLTPDWMPVP-LCR6.30.2310.1180.65127112.09.60.232×109/L×109/LfLfLWL*WL*WL*WL*AG<测量值><WBC直方图><PLT直方图>末梢血组织液混入后所致凝血EDTA诱导的血小板聚集1969年Gowland首先报道可能的发生机制：抗原-自身抗体反应易发条件：抗血小板抗体升高、EDTA抗凝剂、室温或低于室温、体外抗凝血中发病率：0.07%~0.11%EDTA诱导的血小板聚集EDTA可引起血小板糖膜发生改变，改变了血小板膜表面某种隐匿性抗原构象部分病人血浆中存在的某种自身抗体与这种改变构象的抗原结合后的抗原抗体复合物激活了细胞膜中的磷酯酶，使血小板膜水解并释放AA、ADP、5-TH、胶原、凝血酶原等血小板活性物质血小板活性物质不同程度的活化血小板纤维蛋白原受体，促使血小板与纤维蛋白原受体结合后聚集成团，导致血小板假性减少EDTA诱导的血小板聚集假性血小板减少可见于多种疾病，如自身免疫病、慢性炎症、病毒或细菌感染、代谢综合征和肿瘤等，也可见于少数健康人潜在的误诊风险高血小板计数为20×109/L是临床采取预防性血小板输血的医学决定水平误诊为ITP或TTP病人处理方法：形态学复检更换枸橼酸抗凝剂抽血后仪器复查血小板卫星现象血小板卫星现象血小板卫星现象也是由于自身抗体引起的一种免疫反应IgG型抗体可识别中性粒细胞和血小板上的共同抗原结构，靶抗原是血小板的GPIIb-IIIa和中性粒细胞上的FcγRIII片断EDTA诱导血小板凝集和血小板卫星现象的机制不清楚处理方法：形态学复检巨大血小板的检测问题PLT-I32[10^9/L]<PLTFlag>PLTclumps?PLTAbndistribution?Thrombocytopenia?光学法对巨大血小板的检测PLT-O65[10^9/L]红、白细胞碎片的干扰红细胞碎片的产生多见于弥散性血管内凝血微血管病性溶血性贫血心源性溶血性贫血等红细胞破碎综合症其它常见于化学中毒、肾功能衰竭、血栓性血小板减少性紫癜和化疗等白细胞碎片的产生AML、淋巴瘤、严重感染、化疗等排除红、白细胞碎片对血小板干扰排除红、白细胞碎片对血小板干扰多种病理条件对血常规检测的干扰红细胞冷凝集所致假性红细胞减少巨大血小板所致假性红细胞增多白细胞聚集所致假性白细胞减少红细胞溶血不良所致假性白细胞增多有核红细胞所致假性白细胞增多红细胞检测的病理性干扰因素红细胞冷凝集所致假性红细胞减少冷凝集素综合症：在31℃以下时能作用于自身红细胞抗原发生可逆性的红细胞凝集特发性病例和继发病例白血病、恶性淋巴瘤或全身性红斑狼疮肺炎支原体属感染传染性单核细胞增多症血吸虫病、丝虫病、疟疾、非洲锥虫病、肝硬化、非典型性肺炎等冷凝集素综合症的抗体冷凝集素主要为IgM抗体抗I抗体单克隆抗体：含有κ型轻链，4℃时最强，而在37℃时不发生作用，继发于白血病、恶性淋巴瘤或全身性红斑狼疮等滴度常很高，而IgG及IgA值均正常多克隆抗体：含有κ及λ轻链，继发于肺炎支原体属感染者抗体的滴定度常很低抗i抗体多见传染性单核细胞增多症和部分淋巴瘤病例在低温下凝集脐带血中的胎儿红细胞，但在成人中对红细胞的凝集作用极微弱排除红细胞凝集所致干扰RBCHGBHCTMCVMCHMCHCRDW2.231440.249111.764.65780.254×1012/Lg/LfLpgg/LRU*RU*RU*RU*RU**处理方法加温到37OC后再测定白细胞检测的病理性干扰因素<WBC直方图>白细胞的凝集白细胞的凝集易发条件常见于单核细胞增多症、感染性疾病、自身免疫性疾病高滴度冷凝素EDTA抗凝诱导中性粒细胞围绕未成熟细胞形成花环肿瘤疾病产生的粘多糖处理方法：加温到37OC后再测定溶血剂滴下后正常人RBC肝硬化病人RBC红细胞溶血不良病例因脂类代谢异常所致红细胞膜表面与外周血脂类结合形成脂质颗粒保护膜，或红细胞膜表面结构异常，正常浓度的溶血素无法破坏红细胞膜表面常见于以下疾病肝功能低下(肝硬化、肝癌晚期、胆道堵塞)高脂血症高胆固醇制剂输液治疗过程中异常血红蛋白症(Hgb-S症、Hgb-C症)红细胞溶血不良的原因<WBC直方图>WBCLYM%MXD%NEUT%6.90.3430.1940.463×109/LF1*F2*<测量值>肝硬化病人的红细胞溶血不良<WBC直方图><测量值>WBCLYM%MXD%NEUT%90.9-.----.----.---WL*WLWLWL×109/L有核红细胞的存在血液学疾病：急性髓细胞白血病急性红白血病急性淋巴细胞白血病慢性粒细胞白血病慢性淋巴细胞白血病多发性骨髓瘤骨髓增生异常综合征恶性淋巴瘤骨髓转移癌骨髓纤维化原发性血小板增多症血液非肿瘤性疾病缺铁性贫血巨幼细胞贫血溶血性贫血增生性贫血再生障碍性贫血原发性血小板减少性紫癜感染性疾病原发性脾亢脾

排除NRBC对白细胞检测的干扰人工镜检高端仪器临检是实验室风险最大的部门自动化形态学A(blood)smearcampaignBlood,1April2003,101(7),2453-2453

血涂片复检所存在的问题使用血液分析仪后涂片复检率过低<5%缺乏本实验室使用仪器的筛选标准操作人员识别细胞形态的能力不高常规镜检率>30%才能使漏检率达到临床认可水平*LaboratoryProductivityandManualPeripheralBloodSmears.ArchPatholLabMed-Vol130,May2006国际复检规则标准化状况国际血液学复检专家组推荐的41条规则BerendHouwen博士，2002年6个国家，20名专家，调查17个实验室通过对83条规则，13298例（15个实验室）血液标本进行验证，合并成41条规则与CBC、细胞体积和血红蛋白浓度相关的规则15条与白细胞分类相关的规则7条与仪器警报提示相关的规则17条与网织红细胞相关的规则2条41条规则检测的真值表

NumberPercentageTruePositive148311.20%FalsePositive247618.60%TrueNegative895367.30%FalseNegative3862.90%Totalnumberofsamples13298推片复检率26.7%国内复检规则标准化状况SysmexXE-2100的27条镜检规则*与全血细胞计数相关（10条）与白细胞分类相关（6条）与仪器IP信息报警相关（11条）与DeltaCheck相关（0条）*中华检验医学杂志，July2008,V31,N7,P752-75727条规则检测的真值表

NumberPercentageTruePositive49413.75%FalsePositive115632.16%TrueNegative187252.09%FalseNegative722.0%Totalnumberofsamples3594推片复检率45.91%SysmexXE-2100规则1：[WBC]<4OR[WBC]>302：[PLT]<100OR[PLT]>10003：[HGB]<70OR[HGB]>1804：[MCV]<75OR[MCV]>1055：[MCHC]>3806：[MCHC]<300AND[MCV]>807：[RDW]首次结果>