国内外疫苗研究进展专家讲座

国内外疫苗研究进展国内外疫苗研究进展专家讲座第1页一、疫苗概述1、概念疫苗是指为了预防、控制传染病发生、流行，用于人体预防接种生物制品。国内外疫苗研究进展专家讲座第2页2、疫苗发展史18世纪早期，中国人以接种“天花”患者脓液预防疾病方法传入了欧洲。与此同时，英国乡村医生詹(E.Jenner)也发觉接触牛痘病牛挤牛奶女工不会患“天花”，于是他改进了接种方法并取得了人体试验成功。由此开始，疫苗学与免疫学诞生。国内外疫苗研究进展专家讲座第3页巴斯德发觉在试验室培养条件下，造成禽类发生瘟疫细菌毒力减弱了，而且由此能够诱导出耐受性和毒性更强细菌。深入研究使得他研制出有效地抵抗炭疽热、霍乱和狂犬病毒疫苗。国内外疫苗研究进展专家讲座第4页

德国医学家冯贝林利用白喉及破伤风可溶性毒素，将其去毒后进行免疫接种，建立了被动免疫治疗法，这个方法在传染性疾病治疗方法发展里程中发挥了主要作用。

他因研究了白喉血清疗法而取得1901年首届诺贝尔生理学或医学奖。国内外疫苗研究进展专家讲座第5页

1919年第一次世界大战结束时，人类发觉了体液免疫现象,活或者灭活疫苗效价得到了很大提升。伤寒热、志贺氏细菌性痢疾、结核、白喉、破伤风和百日咳疫苗也被成功制备。*效价：在血清反应中，抗原抗体结合出现显著可见反应最大抗体或抗原制剂稀释度。国内外疫苗研究进展专家讲座第6页

20世纪50年代以后，进入了疫苗发展当代时期(产时期)。

这个时期疫苗分为，全细菌疫苗、半细菌疫苗、病毒重组亚单位疫苗、体外培养活病毒疫苗以及灭活病毒疫苗。

细菌疫苗主要集中于次单元荚膜多糖制剂，减毒全细菌疫苗也有极大进展。国内外疫苗研究进展专家讲座第7页

1995年前,医学界普遍认为疫苗只用作疾病预防,伴随免疫学研究发展，人们发觉疫苗还能够治疗一些难治性疾病，从此，疫苗兼有了预防与治疗双重作用。大大拓展了人们对疫苗组成和功效认识，故被称之为疫苗学第三次革命。国内外疫苗研究进展专家讲座第8页3、疫苗分类（1）按用途分为两类1）预防性疫苗是用免疫伎俩将预防传染病抗原经过适宜路径种入人体，模拟一个轻度自然感染或刺激机体产生免疫应答，诱发、促使机体处于免疫状态，产生自动免疫力，从而增强个体和群体反抗对应传染病能力，到达预防疾病目标。2）治疗性疫苗是指在已感染病原生物或患一些疾病机体中，可诱导机体产生特异性或非特异性免疫应答，从而到达治疗疾病目标。国内外疫苗研究进展专家讲座第9页（2）按我国《条例》分为两类1）第一类疫苗是指政府无偿向公民提供，公民应该依照政府要求受种疫苗，包含国家免疫规划确定疫苗，省、自治区、直辖市人民政府在执行国家免疫规划时增加疫苗，以及县级以上人民政府或者其卫生主管部门组织应急接种或者群体性预防接种所使用疫苗。2）第二类疫苗是指除第一类疫苗外由公民自费而且自愿受种其它疫苗。国内外疫苗研究进展专家讲座第10页（3）按照疫苗类型分常规疫苗亚单位疫苗蛋白质疫苗基因工程疫苗死疫苗疫苗活疫苗死疫苗多联多价疫苗多肽疫苗融合蛋白疫苗嵌合疫苗等DNA疫苗重组载体苗重组抗原疫苗转基因植物疫苗等细胞疫苗国内外疫苗研究进展专家讲座第11页（4）新型疫苗新型疫苗是采取生物化学合成技术、人工变异技术、分子微生物学技术、基因工程技术等当代生物技术制造出疫苗，是近年来新发展疫苗。包含基因工程亚单位疫苗、重组疫苗、合成肽疫苗、基因工程载体疫苗、核酸疫苗、转基因植物疫苗等。国内外疫苗研究进展专家讲座第12页（5）传统疫苗和新型疫苗区分1）成份不一样：传统疫苗多为死疫苗、减毒活疫苗或重组亚单位疫苗；新型疫苗则为编码无毒力抗原蛋白病毒核酸或能激发特异性机体免疫应答细胞疫苗。2）机制不一样：传统疫苗主要靠病原体抗原蛋白刺激机体产生中和性保护抗体；新型疫苗除另外还能激发特异性细胞免疫应答。3）作用不一样：传统疫苗只起到一定预防作用，新型疫苗不但能预防疾病，而且更能起到特异治疗作用（治疗性疫苗），含有更广泛应用前景。国内外疫苗研究进展专家讲座第13页二、疫苗研究进展概述（一）第一类疫苗我国免疫规划纳入14种疫苗皆为第一类预防性疫苗。该类疫苗免疫是按照国家或者省级确定疫苗品种、免疫程序或者接种方案，在人群中有计划地进行预防接种，以预防和控制特定传染病发生和流行。国内外疫苗研究进展专家讲座第14页国内外疫苗研究进展专家讲座第15页1.乙肝疫苗

当前惯用是重组疫苗（第二代疫苗，第一代疫苗为血源性乙肝疫苗，已停用），是采取基因工程重组技术，首先把HBsAg基因片段插入酵母细胞或哺乳动物细胞基因中，在体外培养增值过程中组装或分泌HBsAg，将其搜集提纯后制成乙肝疫苗。我国当前生产乙肝疫苗按不一样表示系统，分为重组乙肝疫苗(酿酒酵母)、重组乙肝疫苗(汉逊酵母)、重组乙肝疫苗(CHO细胞)。近年我国乙肝疫苗批签发数目每年约300余批，数量均在1亿剂次以上，其中约80％以上为酵母疫苗。国内外疫苗研究进展专家讲座第16页当前乙肝疫苗也有不完善之处:①免疫全程需注射3针，这将降低其覆盖率；②约有10%健康人群对疫苗应答情况欠佳，老年人中更高；③变异病毒可逃过现有疫苗保护作用。所以，国内外致力于研制新疗效更加好第三代疫苗，现已研制成功。国内外疫苗研究进展专家讲座第17页新型疫苗开发也在进行中，当前有以下几个：

（1）第三代重组疫苗是重组哺乳动物细胞系统表示包含S抗原和preS重组乙肝疫苗。当前巴斯德梅里厄企业生产含preS2/S抗原基因重组乙肝疫苗(Gem2hevac2B)在法国已大面积推广使用，哺乳动物细胞表示preS1/preS2/S(分别在中国仓鼠卵巢细胞和小鼠细胞中表示)基因工程乙肝疫苗在以色列、新加坡、英国和一些西欧国家已获准上市。成都生物制品研究全部限责任企业也正在研制含preS1和preS2抗原酵母乙肝疫苗。国内外疫苗研究进展专家讲座第18页（2）联合疫苗如百白破－乙肝四联疫苗、甲－乙肝联合疫苗。当前甲乙联合疫苗包含葛兰素史克有限企业生产双福立适和北京科兴生物制品有限企业生产倍儿来福，在儿童和成人中应用能产生长久免疫保护，抗体水平较高。有研究表明：接种乙肝疫苗无应答者,甲肝/乙肝联合疫苗可能有效。国内外疫苗研究进展专家讲座第19页（3）佐剂改良型疫苗我国通常采取佐剂为氢氧化铝，含有显著免疫抑制作用。近年来发觉一个新型免疫佐剂寡脱氧核苷酸(CpGODN)，经过动物试验及国外临床试验表明，CpGODN能够增强乙肝疫苗免疫原性，刺激机体快速产生免疫反应，诱导Th1免疫应答，降低免疫次数和乙肝疫苗用量。当前云南沃森企业研发CpG佐剂乙肝疫苗正在申请临床试验。国内外疫苗研究进展专家讲座第20页2.卡介苗（BCG）BCG是当前世界上许多国家(包含我国)同意应用于预防人体感染结核分枝杆菌(Mtb)发病唯一结核疫苗。BCG能有效预防新生儿结核性脑膜炎和粟粒性肺结核发病，但对成人肺结核免疫效果极不稳定；而且，BCG仍存在一定毒力；另外，作为一个预防性疫苗，BCG不能有效治疗Mtb潜伏感染。。国内外疫苗研究进展专家讲座第21页

近年来，各国都致力于研制新型高效抗结核疫苗。（1）重组BCG疫苗是将一些主要抗原或者其它因子重新导入到现有BCG株，得到一个以BCG为载体重组疫苗，或者使Mtb基因缺失得到基因缺失突变株从而制造出新结核疫苗。德国马普感染生物学研究所研制VPM1002是将BCG尿素酶基因敲除，同时重组表示起源于李斯特菌(Listeriamonocytogenes)细胞溶解素，该疫苗可能经过缩短BCG在体内存活时间，提升疫苗诱导长久免疫记忆，已进入临床Ⅱ期。Aeras全球结核病疫苗基金会赞助Aeras一422疫苗已进入临床Ⅰ期。加州大学洛杉矶分校主研rBCG30已完成临床Ⅰ期工作。国内外疫苗研究进展专家讲座第22页（2）亚单位疫苗是对已接种卡介苗儿童进行强化免疫，进而加强免疫应答并将免疫保护力延续至成人阶段疫苗。国内师长宏等人制备A985B-ESAT-6融合亚单位疫苗免疫小鼠。发觉A985B-ES-AT-6融合亚单位疫苗能够诱导较强免疫应答，攻击试验表明该疫苗有较强保护作用。丹麦国立血清研究所当前已有M72+AS01、HybridI+IC-31两种疫苗进入临床Ⅱ期；HydridI+CAF01、Hybrid56+IC-31及HyVAC

4/Aeras404+IC-1三种疫苗进入临床Ⅰ期。另外，英国葛兰素史克企业研制Mtb72f/AS02A嵌合疫苗也取得了较强保护性效果，当前正在Ⅱ期临床试验评定中。国内外疫苗研究进展专家讲座第23页（3）活载体疫苗是以病毒为载体将一些主要抗原重新导入现有BCG株，产生高水平连续胞内免疫。牛津大学研发MVA-85A，表示A985A复制缺点痘苗病毒，可诱导强CD4+T细胞应答。关于MVA-85A疫苗Ⅱ期临床试验正在开展，目标是观察其对健康人和HIV患者保护效力和安全性，预计今年能够完成。荷兰生物制药企业Crucell和Aeras全球结核病疫苗基金会合作研制Aeras-402是以腺病毒为载体，过表示MtbAN85A、A985B和TB10.4融合抗原，刺激宿主产生高水平CD8+T细胞免疫反应。以上2种疫苗都已进入临床Ⅱb期。国内外疫苗研究进展专家讲座第24页（4）减毒Mtb疫苗减毒活疫苗通常是在结核分枝杆菌或牛分枝杆菌等野生菌株基础上缺失一些毒力基因而得到新型结核疫苗，主要包含毒力因子缺点型和营养缺点型两种。国外早期研究表明PhoP/PhoR双因子调控系统对Mtb发挥毒力作用非常关键，而fad基因是Mtb主要致病因子，包括细胞壁脂质层合成。动物试验表明，MtbΔPhoPΔfad双缺失株能在小鼠和豚鼠中安全诱导保护性反应，该候选疫苗正待进入I期临床试验。国内外疫苗研究进展专家讲座第25页3.脊髓灰质炎疫苗

口服脊灰减毒活疫苗(OralPolioVaccine，OPV)是使用最为广泛脊灰疫苗，它接种方便、适合在大规模接种活动中使用。中国医学科学院医学生物学研究所（昆明所）生产I+II+III型三价糖丸及液体苗和北京天坛生物制品有限企业生产I+II+III型三价糖丸成为我国市面上主要脊灰疫苗产品。

国内外疫苗研究进展专家讲座第26页因为OPV可能会引发疫苗相关麻痹型脊灰和疫苗衍生脊灰病毒相关病例，不能在根本上消除脊灰。所以，在主要使用三价OPV国家，免疫策略上需要作出调整。首先，单价OPV开发得到加强，另首先OPV/IPV（灭活脊髓灰质炎疫苗）序贯接种及最终IPV使用可能成为主要趋势。国家卫生计生委官员年11月8日首次明确表示，将按照世界卫生组织要求，到年，准期全部使用IPV。国内外疫苗研究进展专家讲座第27页4.无细胞百白破疫苗(DTaP)，白破疫苗联合疫苗发展开始于百白破联合疫苗(DTP)。全球儿童疫苗行动计划将以百白破为基础联合疫苗列为优先开发项目，原因主要是百日咳、白喉和破伤风这3种儿童传染病在短期内尚不能毁灭，会长久使用这种疫苗。疫苗中含有白喉、破伤风类毒素抗原性质稳定，与其它抗原成份联合，相互间不易产生干扰现象等。国内外疫苗研究进展专家讲座第28页国外当前以DTaP为基础联合疫苗种类：IPV:脊灰灭活疫苗;Hib:b型流感嗜血杆菌；HepB:乙型肝炎。GSK:葛兰素史克企业；SP:赛诺菲巴斯德企业。国内外疫苗研究进展专家讲座第29页

自1997年起，加拿大及欧洲一些国家已开始使用DTaP-IPV/

Hib五联疫苗，当前已经有二十多个国家将其用于计划免疫首次免疫和18月龄加强免疫。在美国，当前使用联合疫苗主要为葛兰素史克企业生产五价DTaP-HepB-IPV联合疫苗和赛诺菲巴斯德企业生产五价DTaP-IPV／Hib联合疫苗。

已在欧洲上市六价DTaP-HepB-Hib/

IPV联合疫苗在美国未经过审核，主要原因是联合疫苗中Hib抗体滴度下降。国内外疫苗研究进展专家讲座第30页

国内对联合疫苗研究开发起步较晚，当前只有北京民海生物科技有限企业生产DTaP/Hib联合疫苗取得新药证书，已向SFDA提交生产文号申请。

年，武汉生物制品研究所生产DTP-HepB四联疫苗已经取得同意，但因为我国强制要求乙肝疫苗免疫接种时间必须为0、1、6月龄，最少前2针免疫程序不能改变，所以该四联疫苗未能上市。国内外疫苗研究进展专家讲座第31页5.麻疹疫苗强化免疫首次接种月龄提前改进接种（如气雾接种）

当前研制新型麻疹疫苗有重组病毒载体疫苗、DNA疫苗、亚单位疫苗等。（1）重组病毒载体疫苗荷兰研究发觉以痘苗病毒安卡拉株为基础疫苗应用于免疫缺点短尾猴是安全。美国研究则发觉以辛德毕斯病毒为基础疫苗能保护猕猴免受麻疹感染。当前对经过载体重组麻疹病毒蛋白质免疫特征加强研究，以到达更安全人用产品要求。国内外疫苗研究进展专家讲座第32页（2）DNA疫苗麻疹DNA疫苗研究已经从试验室发展到初步临床试验阶段。因麻疹DNA疫苗免疫原性较弱，美国加州大学有研究专注于使用细胞因子如IL一2等佐剂提升其免疫效果。国内外疫苗研究进展专家讲座第33页（3）亚单位疫苗现有麻疹疫苗会造成免疫缺点患者发病，所以发展安全且免疫原性高亚单位麻疹疫苗对于免疫缺点患者含有特殊意义。

美国发觉含有F和H蛋白免疫刺激复合(ISCOMS)能增强麻疹DNA疫苗免疫原性，动物试验未出现皮疹和病毒血症。

麻疹病毒ISCOMS是主要亚单位疫苗候选品种，因大规模生产疫苗成本较高，怎样取得大量保护性抗原纯品尚待处理。国内外疫苗研究进展专家讲座第34页冻干麻疹减毒活疫苗是当前预防麻疹有效制剂，但针对麻疹发病特点及减毒活疫苗不足，为增强麻疹减毒活疫苗免疫应答国内外对该疫苗进行了以下改进：强化免疫首次接种月龄提前改进接种路径（如气雾接种）国内外疫苗研究进展专家讲座第35页6.麻风腮联合疫苗麻疹-腮腺炎-风疹联合疫苗于1971年在美国同意使用。今后，又研制了麻腮风-水痘联合疫苗。

当前，我国已成功研制麻疹-腮腺炎-风疹三联疫苗、麻疹-腮腺炎或麻疹-风疹二联疫苗，且已同意上市。国内外疫苗研究进展专家讲座第36页7、乙脑疫苗（1）原代地鼠肾细胞减毒疫苗1988年我国研制成功乙脑减毒活疫苗SA14-14-2,是当前唯一用于人类乙脑减毒活疫苗。

该疫苗含有良好免疫原性，不良反应发生率极低且症状较轻，免疫连续时间长，费用低廉，但孕妇和免疫缺点者不宜接种减毒活疫苗。

因为我国乙脑减毒活疫苗株SA14-14-2是将强毒株SA14经过地鼠肾(PHK)单层细胞长久传代取得稳定弱毒株，存在PHK细胞基质认证、同意等问题，所以还未在国际上使用(韩国除外)。但当前WHO已推荐在全球使用该疫苗,并已讨论经过其规程。国内外疫苗研究进展专家讲座第37页（2）鼠脑灭活疫苗鼠脑灭活疫苗于1954年在日本首次获准,然后在20世纪60年代和80年代进行改进。

该疫苗是当前得到国际广泛认可和使用乙脑疫苗之一，也在美国取得同意上市使用。该疫苗有液体和冻干两种剂型,冻干疫苗在4℃可稳定维持1年以上。国内外疫苗研究进展专家讲座第38页（3）地鼠肾细胞灭活疫苗本疫苗仅在中国生产和使用，毒株为北京P3株，对各型乙脑病毒均可产生保护，在地鼠肾细胞培养时产毒量很高。因为这类疫苗未经纯化和浓缩，造成杂蛋白较多且抗原含量较低，所以需要屡次加强才能维持一定免疫水平，而屡次接种又轻易产生过敏反应。

本疫苗主要用于流行季节前突击接种，正逐步被细胞培养减毒活疫苗取代。国内外疫苗研究进展专家讲座第39页（4）非洲绿猴肾(Vero)细胞灭活疫苗Vero细胞灭活疫苗是乙脑SA14-14-2株在Vero细胞上培养制备。成品不包含明胶稳定剂、抗生素或硫柳汞。

年3月在美国同意对17岁及以上人群使用。因为Vero细胞灭活疫苗是17岁及以上人群使用，所以鼠脑灭活疫苗依然是唯一儿童使用疫苗。国内外疫苗研究进展专家讲座第40页（5）基因工程疫苗以嵌合体疫苗为代表基因工程疫苗是乙脑疫苗新发展方向，但仍在研究阶段,应用到人体还有一定距离。美国研究人员用病毒SA14-14-2株PrM和E蛋白基因去替换黄热病毒17D株cDNA对应位置，而关键蛋白、非结构蛋白基因与病毒复制相关部分则保留黄热病毒17D株基因序列,组成了黄热乙脑嵌合病毒，当前已在部分志愿者中进行了Ⅰ期试验，接种1次血清抗体阳转率>97%，显示了其安全性和免疫原性，在成人和儿童中Ⅱ期临床试验证实其有高耐受水平。

国内外疫苗研究进展专家讲座第41页8.甲肝疫苗包含灭活疫苗和减毒活疫苗两类。甲肝减毒活疫苗当前仅在我国生产和使用，其余国家均使用甲肝灭活疫苗。

我国使用甲肝疫苗主要是国产减毒活疫苗(L-A-1株和H2株)、国产灭活疫苗和进口灭活疫苗。国内外疫苗研究进展专家讲座第42页（1）甲肝灭活疫苗我国20世纪80年代后期开始甲肝灭活疫苗研究工作。当前，由北京科兴生物制品有限企业、中国医学科学院医学生物学研究所和上海泽润生物科技有限企业生产甲肝灭活疫苗(分别采取二倍体和Vero细胞系)是我国比较惯用。当前国际上广泛使用甲肝灭活疫苗包含默沙东企业产品维康特、史克必成企业贺福立适、赛诺菲巴斯德有限企业生产巴维信和瑞士血清疫苗研究所生产艾帕克所百纳。国内外疫苗研究进展专家讲座第43页（2）减毒活疫苗：我国甲肝减毒活疫苗减毒株有H2和L-A-1。国内研究显示二者均含有良好免疫原性和安全性，而且价格低廉，尤其适合用于经济欠发达地域易感人群。

该疫苗分别由长春生物制品研究全部限责任企业(LA1减毒株)、浙江医学科学院和中国医学科学院医学生物学研究所(均为H2减毒株)生产。国内外疫苗研究进展专家讲座第44页（3）亚单位疫苗国内研究发觉，多数病毒衣壳蛋白基因在真核表示系统中都能够有效地实现自我组装，形成病毒样颗粒含有高度免疫原性。这么病毒样颗粒可诱导出抗HPV病毒特异性免疫应答，为疫苗研发开辟了新路径。国内外疫苗研究进展专家讲座第45页1.灭活病毒疫苗

灭活病毒疫苗主要诱导特异性抗体产生,其研发较其它疫苗快且廉价。当前,已经有几个病毒灭活疫苗成功用于人类,如灭活流感病毒疫苗及前面提到脊髓灰质炎病毒疫苗等。全病毒灭活疫苗是技术上最易实现且体液免疫效果很好一个疫苗形式。（二）其它预防性疫苗国内外疫苗研究进展专家讲座第46页（1）SARS灭活病毒疫苗

年SARS暴发后,研究者们首先考虑用灭活SARS-CoV

(SARS冠状病毒)来抵抗SARS。分离出SARS冠状病毒后快速开展了SARS-CoV灭活疫苗研究。灭活疫苗是最早进入临床试验用来防治SARS疫苗。

中国已研制成功SARS-CoV灭活疫苗，并已完成Ⅰ期临床试验。该疫苗特点是研制周期短，可很快取得疫苗制品，便于运输；但对生产安全条件要求极高，疫苗本身也可能有安全性问题。SARS疫苗有效性、稳定性及使用剂量仍需深入研究。国内外疫苗研究进展专家讲座第47页（2）流感灭活病毒疫苗1）全病毒灭活疫苗，包含病毒全部蛋白、脂质和核酸。这类疫苗免疫原性强且成本低，但副作用大，只推荐成人使用；2）裂解疫苗，在全病毒灭活疫苗基础上去除脂质。此类疫苗有较强免疫原性，因不含脂质而副反应小，可用于儿童和老年人，已在人群中广泛使用；3）亚单位疫苗，在裂解疫苗基础上深入纯化，仅含血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)。这类疫苗安全性好，适合用于全部些人，但在儿童和老年人中免疫原性低于裂解疫苗，且成本较高，所以限制了其在发展中国家应用。国内外疫苗研究进展专家讲座第48页当前研究新型细胞培养流感疫苗主要包含：①美国Novartis企业用犬肾(MDCK)细胞生产三价季节性流感全病毒灭活疫苗；②美国BaxterHealthcare企业用Vero细胞生产

甲型H1N1流感全病毒灭活疫苗；③比利时SolvayPharmaceuticals企业用MDCK细胞生产季节性亚单位流感疫苗。国内外疫苗研究进展专家讲座第49页2.减毒活疫苗减毒活疫苗是经过改进“野”病毒或细菌而制备，将病原微生物在人工培育条件下，促使产生定向变异，使其最大程度地丧失致病性，但仍保留一定剩下毒力、免疫原性及繁殖能力，所得到疫苗株微生物保留了复制(生长)和引发免疫能力，但通常不致病。

减毒活疫苗普通只需接种一次，且用量较小，免疫效果巩固，维持时间长。但减毒活疫苗须在低温条件下保留及运输，使用期相对较短，存在毒力返祖风险。国内外疫苗研究进展专家讲座第50页（1）志贺菌减毒活疫苗美国马里兰大学研究人员经过基因敲除术敲除福氏志贺菌virG基因WRSS1株和virG、stxA/B基因突变痢疾志贺菌1型WRSd1株。痢疾杆菌菌株WRSS1安全性和免疫原性试验测试中表现出了安全性和很好免疫原性，已对之进行了第一阶段临床试验。当前，还有以伤寒沙门菌(伤寒杆菌)和霍乱弧菌减毒株为载体，导入宋内菌O-抗原编码基因和宋内菌rfa基因来表示宋内菌完整O-抗原。国内外疫苗研究进展专家讲座第51页（2）轮状病毒(RV)减毒活疫苗疫苗羊RVLL一85弱毒株是我国独有相当理想受体株，由我国兰州生物制品研究所研制，已于年同意使用，不过该疫苗缺乏大规模临床试验数据，是否引发肠道并发症也还未知。由葛兰素史克企业开发罗特律于年1月在墨西哥首次上市，国际多中心对其进行大规模研究后结果显示可有效预防严重RV胃肠炎，降低其引发住院率，而且安全性好。迄今为止，该疫苗已在100多个国家取得注册，最少在7个国家中，作为常规儿童接种疫苗，并已经过了由WHO成立联合国机构采购预审。该疫苗基于减毒人病毒株89-12(G1P[8]型)。国内外疫苗研究进展专家讲座第52页3.多联多价疫苗

联合免疫是指将两种或两种以上抗原采取联合疫苗、结合疫苗、混合使用或同次使用等方式进行免疫接种，目标是经过1次接种预防各种或不一样血清型同种或不一样生活周期传染病一个免疫伎俩。联合疫苗包含多联疫苗和多价疫苗。多联疫苗可预防不一样疾病，多价疫苗是预防不一样亚型或血清型同一个疾病。国内外疫苗研究进展专家讲座第53页除白百破疫苗、麻疹风疹腮腺炎疫苗、甲肝乙肝联合疫苗以外，还有以下几个联合疫苗：（1）b型流感杆菌疫苗-乙型肝炎疫苗联合疫苗是乙肝疫苗与流感嗜血杆菌外膜蛋白结合疫苗组成HepB/Hib二联疫苗，含有良好免疫原性，能够刺激多糖抗体增加，且在加强免疫后效果更显著。1996年b型流感杆菌疫苗-重组乙型肝炎疫苗(rHepB)联合疫苗在美国获准使用。此联合疫苗用于HBsAg阴性母亲婴儿接种,可同时预防流感杆菌和乙型肝炎病毒感染。国内外疫苗研究进展专家讲座第54页（2）肺炎球菌多价疫苗到当前为止,肺炎球菌已被证实血清型有90各种，各型别之间无显著交叉保护，所以研究重点多放在多价疫苗上。当前市场上有2种肺炎球菌病疫苗：一种是23价多糖疫苗(PPV23)，自20世纪80年代初上市；另一种是2个结合疫苗(10价疫苗PCV10和13价疫苗PCV13)，自年起上市供给。7价结合疫苗正在逐步退出市场。今后,可能针对不一样人群制备易感相关血清型结合疫苗。4、6B、9V、14、18C、19F、23F型7价疫苗用于预防中耳炎，1、2、5型疫苗用于预防肺炎球菌菌血症。国内外疫苗研究进展专家讲座第55页（3）轮状病毒多价疫苗由默沙东企业开发五价疫苗乐幼康于年2月获美国FDA同意在美国首次上市，成为当前美国市场上唯一轮状病毒疫苗。该疫苗保护效率较高，针对全部G1~G4型引发RV肠胃炎保护率达74.0%，对严重肠胃炎保护率达98.0%，对住院治疗以及急诊病例保护率达94.5%。国内外疫苗研究进展专家讲座第56页（4）HPV（人类乳头瘤病毒）多价疫苗因为HPV型别较多，HPV多价疫苗研制就显得尤其有价值。当前国际上有默沙东企业研制佳达修，针对HPV16、18、6、11型四价疫苗和葛兰素史克企业研制卉妍康，针对16、18型二价疫苗。国内外疫苗研究进展专家讲座第57页

默沙东已经在研发针对更多HPV亚型(6,11,16,18,31,33,45,52,和58)联合疫苗V503，当前在做Ⅲ期临床试验，预计能够降低97%癌前病变和宫颈癌发生。国内正在进行HPV疫苗临床研究企业除了美国默沙东和葛兰素史克外，还有养生堂旗下厦门万泰沧海生物企业和惠生集团旗下泽润生物。厦门万泰沧海生物技术有限企业宫颈癌疫苗现已进入Ⅲ期临床试验观察阶段，并将于年前投产。国内外疫苗研究进展专家讲座第58页（5）流感多价疫苗

年12月6日，阿斯利康企业宣告，欧盟(EC)同意流感疫苗FluenzTetra上市。该疫苗是一个喷鼻剂型四价减毒活流感疫苗，经鼻腔给药，适合用于用于24个月至18岁青少年和儿童群体，用于季节性流感预防。FluenzTetra包含2株A型流感病毒株和2株B型流感病毒株，能够针对B型流感提供更广泛保护。

当前取得同意四价流感疫苗包含葛兰素史克四价疫苗Flulaval和赛诺菲四价配方流感疫苗Fluzone，但四价疫苗Flulaval给药方式为肌肉注射，而Fluzone则为皮内注射。FluenzTetra将于～流感季节起，取代Fluenz。国内外疫苗研究进展专家讲座第59页

其它正在研制联合疫苗还包含含各种抗原组分狂犬病疫苗、麻腮风与乙型脑炎联合疫苗以及肺炎球菌表面蛋白PspA与百白破联合疫苗等。国内外疫苗研究进展专家讲座第60页

4.亚单位疫苗亚单位疫苗是利用微生物某种表面结组成份（抗原）制成不含有核酸、能诱发机体产生抗体疫苗。亚单位疫苗不良反应降低而保护效果相对很好。结核杆菌亚单位疫苗、麻疹亚单位疫苗研究都已在前面介绍过。国内外疫苗研究进展专家讲座第61页（1）流感亚单位疫苗20世纪70和80年代，在裂解疫苗基础上，又研制出了毒粒亚单位和表面抗原(血凝素HA和神经氨酸酶NA)疫苗。经过选择适当裂解剂和裂解条件，将流感病毒膜蛋白HA和NA裂解下来，选取适当纯化方法得到纯化HA和NA蛋白。亚单位型流感疫苗含有很纯抗原组分。

英国在临床疫苗试用中，证实了免疫效果与裂解疫苗相同，并可用于儿童。1980年英国首次同意使用，而后扩展到其它国家。国内外疫苗研究进展专家讲座第62页（2）HPV预防性亚单位疫苗

现有这类疫苗是由病毒衣壳蛋白L1或L1与L2组成，在细胞内可自我组装成病毒样颗粒(VLP)。VLPs是一种预防性疫苗，因为其产物由病毒结构蛋白组成，故VLPs不具传染性和致癌性且使用安全，并表现出了很好免疫原性及耐受性。葛兰素史克企业开发包含HPV16和HPV18VLPs双价疫苗及由默沙东企业开发包含HPV16/18/11/6VLPs四价疫苗都为亚单位疫苗，单一铝盐为佐剂。国内外疫苗研究进展专家讲座第63页（3）HIV亚单位疫苗HIV亚单位疫苗即重组病毒膜蛋白单体或多肽。由一个或一个以上HIV蛋白非传染性颗粒组成，有包装逆转录病毒核酸序列，故安全性良好。美国瓦克斯金企业研制HIV蛋白亚单位疫AIDSVAXB/B是第一个进入人体Ⅲ期临床试验HIV-1疫苗，试验是在美国、波多黎各、加拿大和荷兰同时进行，受试人群主要为男男同性恋HIV感染高危人群。但该疫苗疫苗未能诱导出针对HIV感染免疫保护。同企业HIV蛋白亚单位疫苗AIDSVAXB/EⅢ期临床试验已在泰国结束，该试验未观察到疫苗有预防HIV感染或延缓疾病进展效果。国内外疫苗研究进展专家讲座第64页5.蛋白质疫苗对于机体免疫来说，蛋白质疫苗为很好疫苗抗原，可被T细胞反应和B细胞反应同时识别。蛋白质疫苗抗原包含有天然蛋白质、经化学灭活类毒素。蛋白质疫苗包含多肽疫苗、融合蛋白疫苗、嵌合疫苗等。国内外疫苗研究进展专家讲座第65页（1）新型流感重组蛋白质疫苗

近十年来，许多文件报道了全长血凝素(HA)作为新型流感重组蛋白质疫苗研究进展，使用表示系统包含哺乳动物细胞、昆虫细胞、大肠埃希菌、酵母和植物等。美国Novavax企业使用昆虫细胞表示病毒样颗粒(VLPs)作为候选流感疫苗抗原进行研究。该企业三价季节性VLPs流感疫苗、

H1N1VLPs流感疫苗和H5N1VLPs流感疫苗均已完成Ⅱ期临床研究，但临床结果均未正式发表。

该企业添加佐剂H7N9VLP抗原剂量范围研究已进入Ⅰ期临床研究阶段，预计今年八月结束。国内外疫苗研究进展专家讲座第66页

美国ProteinSciences企业使用昆虫细胞表示重组HA作为候选流感疫苗抗原研究重组HA三价季节性流感疫苗(命名为FluBlok)年1月被美国FDA同意上市。该企业采取杆状病毒表示载体系统技术，已研制出H7N9疫苗关键部分。美国Fraunhofer生物技术研究中心利用烟草植株表示H1N1HA、H5N1HA以及重组HA三价季节性流感疫苗，其中前两种疫苗已进入Ⅰ期临床，但研究结果还未公布。加拿大Medicago企业发觉烟草植株单独表示H5N1或H1N1全长HA就可组装成VLPs。该企业H5N1VLPs疫苗Ⅰ期临床已结束，而H1N1VLPs疫苗Ⅰ期临床亦已开启。国内外疫苗研究进展专家讲座第67页

年4月，科技部会同卫计委开启了人感染H7N9禽流感科技应急防控研究项目；北京义翘神州生物技术有限企业采取重组蛋白技术取得H7N9疫苗关键蛋白血凝素蛋白和神经氨酸酶蛋白；浙江大学联合中国香港大学成功研制出人感染H7N9禽流感病毒疫苗株。这些结果代表我国首次成功自主研发流感病毒疫苗株。中国生物技术集团企业已开启H7N9疫苗研发工作。北京科兴生物制品有限企业和华兰生物疫苗有限企业均已从WHO取得H7N9疫苗研发用毒株，并开启疫苗研发程序。国内外疫苗研究进展专家讲座第68页WHO流感参比研究合作中心(WHOCCs)和基础规范试验室(ERLs)负责疫苗候选毒株筛选、研制、公布和分发。国内外疫苗研究进展专家讲座第69页当前分别有两项Ⅰ期和Ⅱ期H7N9疫苗临床试验，分别由瑞士诺华疫苗、美国诺瓦瓦克斯生物制药企业和美国过敏与传染病研究所资助研发。国内外疫苗研究进展专家讲座第70页（2）合成肽疫苗1）HIV合成肽疫苗美国研究发觉用HIV-1毒株env基因V3区合成肽制备单克隆抗体(McAb)在体外能部分抑制包膜蛋白gp120与CD4分子结合。则V3肽能够刺激动物和人产生抗HIV中和抗体和细胞毒性T淋巴细胞反应。因为V3区氨基酸排列在不一样株间有一定差异,使研究疫苗有一定困难。I期临床试验表明,此种疫苗刺激机体产生中和抗体和细胞免疫能力较差。国内外疫苗研究进展专家讲座第71页2）HPV合成多肽疫苗东京大学研究人员开发了一个鼻腔给药预防性L2合成多肽疫苗。I期临床研究13名健康志愿者，结果发觉该疫苗安全、耐受性良好。5名接收高剂量受试者中，有4位产生HPV-16和HPV-52抗体。但低剂量给药组未产生免疫作用。国内外疫苗研究进展专家讲座第72页6.基因工程疫苗

疫苗抗原也能够用细胞与分子生物学工程技术研制，经过基因工程生产，这些制品有时被称作重组疫苗。

主要有DNA疫苗、转基因植物疫苗、重组载体疫苗、重组抗原疫苗等。国内外疫苗研究进展专家讲座第73页（1）DNA疫苗是指将编码某种抗原蛋白质外源基因(DNA或RNA)与真核表示载体重组后直接导入机体内，经过宿主细胞转录翻译合成抗原蛋白，激活宿主产生免疫应答，从而让机体取得对应免疫保护，起到预防疾病作用。

DNA疫苗已在防治各种疾病研究中显示出了强大应用潜力。是当前研究最热门,被认为最有前途疫苗。从1992年出现到现在，已经有两种DNA疫苗上市。疟疾、埃博拉病毒、艾滋病和肿瘤等各种DNA疫苗也已相继经过美国食品药品监督管理局(FDA)同意进入临床试验。国内外疫苗研究进展专家讲座第74页除乙肝、麻疹DNA疫苗外，预防性DNA疫苗还有以下几个1）轮状病毒(RV)DNA疫苗小鼠试验已表明编码VP6、VP4或VP7DNA疫苗，能够刺激产生强血清抗体，当血清抗体转移或渗出到肠腔，就会产生抗RV保护作用，但该疫苗尚处于动物模型中，未到临床观察阶段。研究也处于起步阶段，与实用疫苗还有不小距离。国内外疫苗研究进展专家讲座第75页2）SARSDNA疫苗因为SARS主要中和抗原可能是表面纤突蛋白S抗原、膜蛋白M抗原和衣壳蛋白N抗原，所以构建DNA疫苗没有技术障碍。当前国内外正在研发中SARS-CoVDNA疫苗主要有两种：基于S蛋白DNA疫苗和基于N蛋白DNA疫苗。国内外疫苗研究进展专家讲座第76页3）流感DNA疫苗流感病毒核壳(NP)蛋白非常保守，含有型特异性，NP蛋白在同型病毒间氨基酸同源性高于90%。所以，NP蛋白是流感病毒分型主要依据之一，也是动物模型中研究最早含有交叉保护效果抗原，基于NP蛋白新型候选疫苗研究很有前景。国内外疫苗研究进展专家讲座第77页另外,研究者还开展了将NP蛋白与流感病毒其它保守区域(M2e、HA蛋白等)偶联作为靶标DNA疫苗研究。动物模型评价候选通用DNA疫苗株免疫攻毒毒株研究地域NP+M1/M2DNAA/WSN/33,A/PR/8/34日本NP+HADNAA/Sichuan/2/1987挪威NP+M2+HADNAA/Vietnam/1203/丹麦NP+M2DNAplusliposomesA/HK/8/68,A/PR/8/34美国国内外疫苗研究进展专家讲座第78页4）HIVDNA疫苗HIVDNA疫苗是将含有编码HIV蛋白基因DNA分子(主要是质粒DNA)直接注射到体内，使其在体内表示而诱导产生免疫应答。单用DNA疫苗在人体中诱导产生免疫应答还是比较弱，不足以保护人体免受HIV感染。所以，当前普遍采取策略是将DNA疫苗与免疫佐剂、重组蛋白亚单位疫苗或重组载体疫苗以联合免疫方式接种。国内外疫苗研究进展专家讲座第79页

长春百克企业研制复合型AIDS疫苗（DNA疫苗初始免疫—安卡拉株(MVA)载体疫苗加强免疫）进入Ⅱ期临床试验。该疫苗抗原基因来自中国广西等省区流行B/C重组(CRF08_BC)毒株。这是在我国进入临床试验首个由境内机构申报AIDS疫苗。中国医学科学院与艾伦•戴蒙德AIDS研究中心联合研制DNA疫苗-MVA载体疫苗复合型AIDS疫苗也已完成临床前研究。

年9月，默沙东企业研制基于腺病毒5型载体AIDS疫苗Ⅱb期临床试验被意外中止。试验结果表明，该疫苗未能提供针对HIV感染免疫保护。而且在体内预先存在Ad5中和抗体受试者中，接种疫苗受试者被HIV感染几率显著超出了接种抚慰剂受试者。该疫苗研究宣告失败。国内外疫苗研究进展专家讲座第80页5）疟疾DNA疫苗疟疾疫苗是研究最多寄生虫病疫苗之一。各种DNA疫苗如多基因DNA疫苗、密码子优化、新型佐剂、新型递送系统等在疟疾DNA疫苗研究中几乎都有所尝试。国内外疫苗研究进展专家讲座第81页DNA疫苗含有以下优点:

①DNA疫苗重组质粒易于构建，能在工程菌(如大肠杆菌)内快速增殖，易于大规模化生产，成本比较低廉；②能以天然构象抗原形式提呈给免疫系统,产生类似于自然感染完全免疫应答，包含抗体应答和细胞免疫应答；③含有类似亚单位疫苗或灭活疫苗安全性和稳定性，不存在意外感染及致病危险，制剂易于保留和运输；④可把几个不一样病原体保护性抗原基因克隆到一个载体上，制成多价复合DNA疫苗，为联合免疫提供了可能性；⑤DNA疫苗不但可用于预防，还可用于治疗。国内外疫苗研究进展专家讲座第82页（2）转基因植物疫苗Manson等于1992年首次提出用植物生产可食性疫苗，即利用植物基因工程技术构建出可表示特异性抗原植株，生产出能刺激机体产生特异性免疫应答从而取得特异抗病能力疫苗。利用转基因植物作为生物反应器生产疫苗已成为疫苗研制热点领域，当前利用转基因植物生产疫苗有有乙型肝炎表面抗原、不耐热肠毒素B亚单位、链球菌属突变株表面蛋白、鼻病毒抗原和艾滋病病毒抗原等10各种疫苗。国内外疫苗研究进展专家讲座第83页转基因植物生产疫苗示意图国内外疫苗研究进展专家讲座第84页利用转基因植物研制疫苗研究主要包含两类：一类是借助植物生物反应器大量产生蛋白质抗原，后经分离纯化制备疫苗；另一类是直接构建转基因植株，将整株或某一部分直接食用，制备成口服疫苗，不需反抗原蛋白进行分离纯化。国内外疫苗研究进展专家讲座第85页1）麻疹植物疫苗麻疹病毒血凝素(MV—H)蛋白最早在烟草中表示。不过植物疫苗应用于临床需要使用更实用、安全品种，当前已开发出麻疹莴苣疫苗。

澳大利亚研究在胡萝卜中表示了MV—H蛋白及来自MV—H抗原多个表位。当前还未开展麻疹植物疫苗I期临床试验，因需深入选择常食用植物，同时又能表示出足量MV—H蛋白。国内外疫苗研究进展专家讲座第86页2）乙肝病毒转基因植物疫苗编码乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)基因已经在烟草、番茄、马铃薯、羽扇豆和莴苣等植物中成功表示。

我国研究者成功将HBsAg基因导入樱桃、苹果和番茄，取得转基因植株并表示出有活性乙型肝炎病毒表面抗原蛋白。国内外疫苗研究进展专家讲座第87页3）结核杆菌转基因植物亚单位疫苗以结核杆菌分泌蛋白构建转基因植物亚单位疫苗，经过口服免疫诱发黏膜免疫应答，有望增强卡介苗免疫效果，并含有较高安全性。我国研究者对ESAT-6基因进行修饰改造，在基因两侧分别添加Kozak序列和内质网滞留信号序列，将其最终整合入植物表示载体中，经过叶盘法转化热带水果番木瓜，成功取得了转基因植株。国内外疫苗研究进展专家讲座第88页

基因工程重组活载体疫苗(Liverecombinantvaccine)是用基因工程技术将病毒或细菌(常为疫苗弱毒株)构建成一个载体，把外源基因插入其中使之表示活疫苗。该类疫苗免疫后同时其诱导包含体液免疫、细胞免疫，甚至黏膜免疫在内各种免疫效应。另外活载体疫苗可构建多价或多联疫苗，取得一针防多病效果。既含有活疫苗免疫效力高、成本低优点，也含有灭活疫苗安全性好等优点，所以其是当今与未来疫苗研制与开发主要方向之一。

该类疫苗主要分为两类：基因缺失疫苗和复制性活载体疫苗。（3）重组载体疫苗国内外疫苗研究进展专家讲座第89页

针对B和E亚型AIDS疫苗Ⅲ期临床试验在泰国开展。经过初始—加强程序进行联合免疫，使用基于金丝雀痘病毒载体重组金丝雀痘病毒疫苗与艾滋衣壳蛋白重组蛋白疫苗。因为Ⅱ期临床试验中70%接种者不能产生足够强细胞免疫反应，美国国立卫生研究所中止了对这项试验支持，但美国军方决定对在泰国进行试验继续给予资助。中国CDC研制DNA-天坛痘苗复合型艾滋病疫苗，经Ia期临床试验结果显示很好。该试验所用复制型痘苗病毒载体，能在动物上引发较强免疫应答和保护作用，当前该疫苗已进入Ⅱb期临床试验阶段。国内外疫苗研究进展专家讲座第90页（4）重组抗原疫苗基因重组抗原疫苗是利用基因工程方法，将分离出含有保护力抗原基因转入原核或真核系统使表示，将制备保护性抗原制成疫苗。当前重组抗原疫苗较多利用于抗寄生虫感染研究。国内外疫苗研究进展专家讲座第91页1）疟疾重组抗原疫苗RTS,S疫苗该疫苗是由恶性疟原虫环子孢子蛋白(CSP)19个NANP重复区及其C末端序列并与乙肝表面抗原融合而成。美国陆军医学研究院和葛兰素史克企业合作开展了该疫苗临床前和临床试验研究工作。临床试验结果显示该疫苗安全且有较强免疫原性。

当前，RTS,S疫苗Ⅲ期临床试验已在肯尼亚进行，意在扩大疫苗接种人群并评价疟疾保护效力和免疫连续时间。国内外疫苗研究进展专家讲座第92页PfCP-2.9抗原是我国第一个同意进入临床试验疟疾疫苗，该疫苗抗原是由两个裂殖子表面抗原(MSP1和AMA1)C-末端融合而成，在裂殖子入侵红细胞过程中，这两个蛋白发生酶解，最终只有其C-末端位于裂殖子表面，并随裂殖子入侵红细胞。WHO对全球多个MSP1相关疟疾疫苗进行平行试验比较，结果显示PfCP-2.9疫苗两个组分均能诱导产生抑制性抗体，显示出显著优势。第二军医大学与上海万兴生物制药企业合作完成了该疫苗临床前研究，并获国家食品药品监督局(SFDA)同意进入临床试验。当前完成2个临床试验分别由WHO和美国比尔盖茨基金会作为主办者负责实施。国内外疫苗研究进展专家讲座第93页PfSEA-1抗原

美国科学家汇报他们在非洲儿童体内发觉一个由恶性疟原虫PfSEA-1抗原刺激产生PfSEA-1抗体，这种抗体可阻止复制阶段引发疟疾寄生虫裂殖体从其宿主红细胞中破裂而出，从而显著降低小鼠及人体内疟原虫载量。研究人员提出，它们或能与其它制剂适用从而在未来创制一个疟疾疫苗。未来还将利用猴子进行试验。假如顺利，将开展Ⅰ期人类临床试验。这些发觉或能让研究人员距离研发出一个有效疟疾疫苗更近了一步，而这种疫苗能以疟原虫多个生命阶段作为标靶。国内外疫苗研究进展专家讲座第94页（三）其它治疗性疫苗

1995年前医学界普遍认为，疫苗只作预防疾病用。伴随免疫学研究发展，人们发觉了疫苗新用途，即能够治疗一些难治性疾病。治疗性疫苗不但含有预防性疫苗间接靶向特异性和长期有效性等特点，而且还含有治疗性药品疗效，尤其对一些当前尚无特效治疗药品传染性疾病及肿瘤等能够起到治疗作用。国内外疫苗研究进展专家讲座第95页

近年来，治疗性疫苗研制在艾滋病、慢性乙型肝炎、慢性丙型肝炎、肿瘤、本身免疫病等各种疾病领域均取得了较大进展。全世界已经有17种肿瘤治疗性疫苗正在进行Ⅰ期临床观察，35种进入Ⅱ期临床观察，11种进入Ⅲ期临床观察。而世界上首个肿瘤治疗性疫苗—表皮生长因子(EGF)肿瘤治疗性疫苗，已在古巴研制成功，并于年6月上市。另外，当前国际上相关艾滋病、肝炎、生殖器疱疹等治疗性疫苗已进入临床研究，而我国拥有自主知识产权乙肝免疫复合物型治疗性疫苗—“乙克”，也已进入Ⅲ期临床研究。国内外疫苗研究进展专家讲座第96页1.蛋白质疫苗（1）肿瘤治疗性蛋白质疫苗美国、挪威等地科学家，在相关癌症免疫诊疗方面已取得较大进展：治疗肿瘤类别有效性/安全性当前进展情况疫苗组分淋巴瘤有效Ⅱ期临床观察Id-KLH蛋白复合物乳腺癌未知Ⅱ期临床观察HER-2等特征性抗原胰腺癌无效、安全Ⅱ期临床观察hTERT非小细胞肺癌有效已上市EGF-P64K蛋白质复合物宫颈癌有效Ⅲ期临床观察HspE7国内外疫苗研究进展专家讲座第97页1）淋巴癌治疗性蛋白质疫苗

淋巴瘤治疗性疫苗第1次临床观察距今已经有20年，即使有些疫苗Ⅰ期、Ⅱ期临床观察结果很好，能够支持开展Ⅲ期临床观察，但最近Ⅲ期临床观察结果却显示疫苗并未延长化疗后患者生存时间。斯坦福大学下属BiovestInternationalInc企业当前正在开发一种针对B细胞淋巴瘤且能够个性化治疗性疫苗（BiovaxID），这种疫苗与粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）联合使用，能够经过激起免疫反应，产生一个独特型肿瘤特异性免疫球蛋白，从而特异性地靶向瘤性B细胞。Ⅰ期和Ⅱ期临床观察表明，Biovax

ID免疫原性、安全性和治疗效果均很好，当前正在进行Ⅲ期临床观察。国内外疫苗研究进展专家讲座第98页2）上皮生长因子(EGF)治疗性蛋白质疫苗

EGF因为在大多数流行上皮肿瘤细胞，如肺癌、结肠癌、头颈癌、宫颈癌和乳腺癌等细胞上过分表示，EGF及其膜受体(EGFR)最近已成为抗肿瘤新靶标。

过去10年已经有几个EGFR相关络氨酸激酶小分子抑制剂和几个针对EGFR单克隆抗体进行了临床观察。国内外疫苗研究进展专家讲座第99页当前古巴分子免疫中心GiselaGonzá-lez研究小组开发EGF疫苗已顺利经过了Ⅲ期临床观察，临床研究表明，该疫苗能够有效延长晚期肺癌患者生存期，而且副反应很轻。副反应症状在停药后自动消失，也未发生本身免疫反应症状。

该疫苗已于年6月成功上市，成为世界上首个成功上市肿瘤治疗性疫苗。另一种人EGF与P64K融合蛋白作为第2代产，正在进行临床评价。国内外疫苗研究进展专家讲座第100页3）胰腺癌治疗性多肽疫苗GV1001是一个能够激活免疫系统II类端粒末端转移酶多肽疫苗。年11月公布Ⅱ期临床结果表明，端粒酶GV1001多肽疫苗在治疗Ⅲ期非小细胞肺癌（NSCLC)方面含有良好耐受性，多数NSCLC患者产生免疫作用，并建立了持久T细胞记忆。国内外疫苗研究进展专家讲座第101页

当前研究较多且比较有前景HPV治疗性蛋白质疫苗有以下三种：疫苗组分

进展情况国家NCRT/E7/hsp融合蛋白临床前中国HspE7临床Ⅲ期观察日本Hsp65+HPV16E7临床Ⅰ期观察德国HPV治疗性蛋白质疫苗研究情况国内外疫苗研究进展专家讲座第102页（2）HIV治疗性蛋白质疫苗挪威科学家正在研究HIVp24样多肽治疗性疫苗(Vacc-4x)在90％正在接收高效抗逆转录病毒治疗(HAART)艾滋病患者中，经过活化皮肤树突状细胞而成功诱导免疫反应。该研究小组在进行Vacc-4xⅡ期临床观察时发觉，能够经过测试体内迟发型超敏反应(DTH)来监测细胞免疫反应，因为在检测Vacc-4x引发迟发型超敏反应3种抗原浓聚物时，迟发型超敏反应在可被用来定量评定Vacc-4x引发免疫反应及检测各自多肽组分。国内外疫苗研究进展专家讲座第103页（3）乙肝病毒治疗性蛋白质疫苗复旦大学医学院闻玉梅等构建HBsAg加人抗-HBs免疫球蛋白作为免疫原性复合物型治疗性疫苗“乙克”已进入Ⅲ期临床研究。重庆第3军医大学研发治疗用(合成肽)乙肝疫苗，是经过仿乙肝抗原一些肽链诱导细胞产生抗体，已结束Ⅱ期临床研究。国内外疫苗研究进展专家讲座第104页我国乙型肝炎治疗性蛋白质疫苗研究现实状况疫苗类别进展情况疫苗组分蛋白类疫苗Ⅲ期临床观察HBsAg+人抗-HBs免疫球蛋白多肽疫苗Ⅱ期临床观察MAP短肽(TT830、HBc18~27)蛋白质疫苗临床前亚单位疫苗+LMS+CIM多肽疫苗Ⅱ期临床观察PreS2B细胞表位，破伤风类毒素通用Th表位连接于HBV免疫优势CTL表位N-末端及C-末端组成多肽国内外疫苗研究进展专家讲座第105页（4）丙肝病毒治疗性多肽疫苗奥地利IntercellAG企业与美国Romark企业合作开发治疗性疫苗候选物IC41，由5个合成多肽以及刺激多肽抗原穿透进入细胞合成聚L-精氨酸佐剂组成。其II期临床试验未见HCV核糖核酸(RibonucleicAcid,RNA)降低；但发觉25％患者HCV特异性毒性T细胞增加。国内外疫苗研究进展专家讲座第106页（5）高血压治疗性蛋白质疫苗

年英国学者开发了AngⅠ(血管担心素)疫苗-PMD3117(AngⅠ耦合载体蛋白组成)并进行临床试验，完成免疫程序后，在高血压患者体内疫苗产生了高滴度抗体并能维持较长时间，但患者在撤停ACEI和ARB类降压药品后血压出现反弹。

年,瑞士Cytos生物企业宣告CYT006-AngQ6疫苗(内含AngⅡ多肽与病毒颗粒结合在一起形成抗原)，已完成Ⅱa期临床研究，证实该疫苗在人体应用有效。国内外疫苗研究进展专家讲座第107页英国Protherics制药企业Ang疫苗(利用血管担心素原研制)也进入Ⅱ期临床。他们使用常见贝类“帽贝”一个蛋白质来攻击人体肝脏分泌血管担心素原，此高血压疫苗仅需注射3剂,每间隔6个月追加1剂，可使血压维持平稳下降,该疫苗有望5年内上市。国内外疫苗研究进展专家讲座第108页2.基因工程疫苗

（1）DNA疫苗1）HPV治疗性DNA疫苗DNA疫苗临床研究较RNA疫苗成熟，大多进行到临床试验阶段。HPVDNA疫苗多使用病毒作为载体，如牛痘病毒、腺病毒和腺相关病毒，他们在对免疫系统刺激上比单纯E7基因疫苗有显著优势。国内外疫苗研究进展专家讲座第109页一种融合HPV16、18型E6和E7基因重组牛痘病毒疫苗TA-HPV在欧洲已开展了临床Ⅱ期试验。国内外疫苗研究进展专家讲座第110页

基因疫苗在诱导免疫效应上还不如人意,为深入提升其免疫及保护效率，众多研究者尽力在以下几方面进行拓展：改进免疫路径和方式选择优化免疫刺激序列及载体表示嵌合抗原或多重抗原共表示抗原与细胞因子或协同刺激分子国内外疫苗研究进展专家讲座第111页美国研究者利用结核分枝杆菌HSP70融合肿瘤抗原基因HPVE7构建基因疫苗，可显著增强抗原特异性细胞毒性T细胞反应和提升抗肿瘤效力。美国研发一个基因疫苗药品ZYC101，由可降解生物大分子多聚体包裹质粒DNA形成，主要用于治疗HPV16型引发肛门不经典增生，治疗对象HLA是A2型，临床Ⅰ期试验结果很好。国内外疫苗研究进展专家讲座第112页2）乙肝治疗性DNA疫苗解放军第458医院研发治疗性双质粒HBVDNA疫苗于年进入临床研究，但还未见研究结果报道。广州空军医院正在研究DNA疫苗，是经过将仿乙肝抗原序列连接到质粒载体中，在人体内内源表示抗原诱导细胞产生抗体，该疫苗已取得Ⅱ

b期临床试验批文，即将进行Ⅱｂ期临床试验。国内外疫苗研究进展专家讲座第113页3）糖尿病治疗性DNA疫苗由瑞典DiamydMedical企业开发重组GAD65疫苗(rhGAD65,Diamyd)是一个人DNA疫苗，GAD65是Ⅰ型糖尿病和成人隐匿性本身免疫性糖尿病(LADA)主要本身抗原。临床前和临床研究表明，它可减缓β细胞损伤；其用于近期发作Ⅰ型糖尿病患儿以及成人和儿童LADA患者,是安全有效，可长久保护β细胞功效。该疫苗现已在美国获“罕见病药品”资格，用于治疗尚残余β细胞功效Ⅰ型糖尿病患者。DiamydMedical企业当前正在欧盟和美国进行一系列Ⅲ期临床试验，意在考查rhGAD65用于近期发作Ⅰ型糖尿病年轻患者时，能否抑制或减缓β细胞本身免疫损伤，从而保护残余β细胞功效。国内外疫苗研究