芳酸类药物的分析1

芳酸类药物的分析1第1页/共103页羧酸芳酸第2页/共103页苯甲酸类常见的芳酸及其酯类药物第3页/共103页氨甲苯酸羟苯乙酯第4页/共103页丙磺舒（pKa3.4）布美他尼第5页/共103页常见的芳酸及其酯类药物水杨酸类第6页/共103页第7页/共103页第8页/共103页贝诺酯第9页/共103页其他芳酸类药物氯贝丁酯第10页/共103页第一节结构与性质

一、结构分析包括：芳酸、芳酸酯、芳酸盐

共同点：苯环、羧基

不同点：不同的取代基（如酚羟基、芳伯氨基等）

第11页/共103页二、性质

（一）物理性质

（1）固体具有一定的熔点

（2）溶解性游离芳酸类药物几乎不溶于水，易溶于有机溶剂；芳酸碱金属盐及其它盐易溶于水，难溶于有机溶剂。

第12页/共103页（二）化学性质

1.芳酸具游离羧基，呈酸性，其pKa在3～6之间，属中等强度的酸或弱酸；

—X、—NO2、—OH等吸电子取代基存在使酸性增强第13页/共103页

—CH3、—NH2等斥电子取代基存在使酸性减弱

邻位取代>间位、对位取代，尤其是邻位取代了酚羟基，由于形成分子内氢健，酸性大为增强第14页/共103页2.芳酸酯可水解，利用其水解得到酸和醇的性质可进行鉴别；利用芳酸酯水解定量消耗氢氧化钠的性质，芳酸酯类药物可用水解后剩余滴定法测定含量；芳酸酯类药物还应检查因水解而引入的特殊杂质。3.UV第15页/共103页4.IR5.取代芳酸类药物可利用其取代基的性质进行鉴别和含量测定。如具有酚羟基的药物可用FeCl3反应鉴别；具芳伯氨基的药物可用重氮化—偶合反应鉴别、亚硝酸钠滴定法测定含量。6.色谱法—制剂分析第16页/共103页第二节鉴别试验

一、FeCl3反应

具酚羟基或水解后能产生酚羟基的药物第17页/共103页

直接：水杨酸、双水杨酸酯、对氨基水杨酸钠其分子结构中均具有酚羟基，在中性或弱酸性条件下，与三氯化铁试液作用，生成紫堇色的配位化合物，可供鉴别。第18页/共103页

间接：阿司匹林、贝诺酯其分子结构中均无游离酚羟基，与三氯化铁试液不发生显色反应。但其水溶液加热，或较长时间放置，或加少量碱，由于部分水解产生具有酚羟基的水杨酸，也可与三氯化铁试液作用。

第19页/共103页阿司匹林ChP（2010）[鉴别]（1）取本品约0.1g，加水10ml，煮沸，放冷，加三氯化铁试液1滴，即显紫堇色。第20页/共103页苯甲酸的碱性水溶液或苯甲酸钠的中性溶液，与三氯化铁试液作用生成碱式苯甲酸铁盐的赭色沉淀。

第21页/共103页第22页/共103页二、重氮化—偶合反应

芳香第一胺类鉴别反应具芳伯氨基或潜在芳伯氨基的药物

第23页/共103页

直接：对氨基水杨酸钠、盐酸普鲁卡因、苯佐卡因、盐酸普鲁卡因胺

间接：对乙酰氨基酚（扑热息痛）、醋氨苯砜、贝诺酯

第24页/共103页三、水解反应

阿司匹林分子结构中具有酯键，与碳酸钠试液共热，水解生成水杨酸钠和醋酸钠，放冷后用稀硫酸酸化，析出白色的水杨酸沉淀，并产生醋酸的臭气，可供鉴别。第25页/共103页第26页/共103页氯贝丁酯分子结构中具有酯键，在碱性溶液中可与盐酸羟胺作用生成异羟肟酸盐，在弱酸性条件下与三氯化铁试液作用生成紫色的异羟肟酸铁，可供鉴别。

第27页/共103页羟苯乙酯的乙醇液煮沸后加硝酸汞，生成沉淀，上清液呈红色。第28页/共103页1.分解产物的反应苯甲酸钠可分解生成苯甲酸，苯甲酸具有升华性，可供鉴别。如将苯甲酸钠置于干燥试管中，加硫酸后，加热，不炭化，但析出苯甲酸，随即在试管内壁上端凝结成白色升华物。

四、特殊反应第29页/共103页2.氧化反应含硫的药物第30页/共103页3.异羟肟酸铁反应

六、IR五、UV第31页/共103页第三节特殊杂质检查

一、阿司匹林中水杨酸的检查

1.杂质来源原料残存（生产过程中乙酰化不完全）、水解产生（贮存过程中水解产生）第32页/共103页阿司匹林中游离水杨酸的检查①杂质来源a.生产过程中反应不完全b.贮存过程中阿司匹林水解第33页/共103页紫堇色（有酚羟基）②

检查原理阿司匹林+Fe3+×（无酚羟基）水杨酸+Fe3+第34页/共103页2.检查方法对照法

反应原理水杨酸与高铁盐反应限量原料：0.1%；阿司匹林片：0.3%；阿司匹林肠溶片：1.5%；阿司匹林栓：1.0%（HPLC法）第35页/共103页其他杂质：乙酰水杨酸酐（ASAN）、乙酰水杨酰水杨酸（ASSA）、水杨酰水杨酸（SSA）

第36页/共103页二、对氨基水杨酸钠中间氨基酚的检查1.杂质来源原料残存、脱羧产生2.检查方法ChP（2010）含量测定法（双相滴定法）。第37页/共103页

利用对氨基水杨酸钠不溶于乙醚，间氨基酚溶于乙醚的性质，使二者分离后，在乙醚中加水适量，用盐酸滴定，控制盐酸滴定液体积以控制间氨基酚杂质限量。第38页/共103页三、羟苯乙酯中有关物质的检查BP（2011）反相TLC

第39页/共103页四、甲芬那酸中特殊杂质的检查铜盐有关物质五、氯贝丁酯中对氯酚及挥发性杂质的检查GC第40页/共103页第四节含量测定一、酸碱滴定法1.直接滴定法

pKa3～6第41页/共103页阿司匹林ChP（2010）取本品约0.4g，精密称定，加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）20ml，溶解后,加酚酞指示液3滴，用氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）滴定。每lml的氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）相当于18.02mg的C9H8O4。第42页/共103页第43页/共103页滴定度（T）：指每1ml某摩尔浓度的滴定液所相当的被测药物的重量。滴定度的计算：被测药物（B）与滴定液（A）之间按一定的摩尔比进行反应：第44页/共103页（1）测定方法及计算反应摩尔比为1∶1

（2）讨论①中性乙醇溶解阿司匹林且防止酯键水解。“中性”是对中和法所用的指示剂而言。第45页/共103页②优点：简便、快速缺点：酯键水解干扰（局部碱性过大，不断搅拌、快速滴定）酸性杂质干扰（如水杨酸）③适用范围：不能用于含水杨酸过高或制剂分析，只能用于合格原料药的含量测定第46页/共103页例

称取阿司匹林供试品0.3955g，溶于中性乙醇，用酚酞为指示剂，以氢氧化钠滴定液（0.1015mol/L）滴定到终点时，消耗氢氧化钠滴定液（0.1015mol/L）21.56ml，每lml的氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）相当于18.02mg的C9H8O4。计算阿司匹林的百分含量。第47页/共103页第48页/共103页2.水解后剩余滴定法酯的一般含量测定方法阿司匹林第49页/共103页USP（33）方法：取本品约1.5g，精密称定,加入氢氧化钠滴定液（0.5mo1/L）50.0m1，混合，缓缓煮沸10min，放冷，加酚酞指示液，用硫酸滴定液（0.25mo1/L）滴定剩余的氢氧化钠，并将滴定结果用空白试验校正。每1ml的硫酸滴定液（0.25mol/l）相当于45.04mg的C9H8O4。第50页/共103页2NaOH（过量）＋H2SO4

＝Na2SO4＋2H2O剩余滴定：水解：第51页/共103页

优点：消除了酯键水解的干扰缺点：酸性杂质干扰第52页/共103页原料药含量测定结果的计算A、直接滴定法

第53页/共103页B、剩余滴定法

T——滴定度，每1ml滴定液相当于被测组分的mg数

V——滴定时，供试品消耗滴定液的体积（ml）

V0——滴定时，空白消耗滴定液的体积（ml）F——浓度校正因子

w——供试品的质量

第54页/共103页3.两步滴定法阿司匹林片、阿司匹林肠溶片氯贝丁酯

如阿司匹林片的测定：第55页/共103页

取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于阿司匹林0.3g），置锥形瓶中，加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）溶解后，振摇使阿司匹林溶解，加酚酞指示液3滴，滴加氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）至溶液显粉红色，再精密加氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）40m1，置水浴上加热15分钟并时时振摇，迅速放冷至室温，用硫酸滴定液（0.05mol/L）滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每lml的氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）相当于18.02mg的C9H8O4。

第56页/共103页第一步中和第57页/共103页第二步水解后剩余滴定水解：第58页/共103页2NaOH（过量）＋H2SO4

＝Na2SO4＋2H2O优点:本法消除了酸性杂质的干扰，降低了酯键水解的干扰

剩余滴定：第59页/共103页片剂含量测定结果的计算

第60页/共103页剩余滴定法

第61页/共103页

例取标示量为0.3g的阿司匹林片10片，称出总重为3.5840g，研细后称取0.3484g，按药典方法测定。供试品消耗硫酸滴定液（0.05015mol/L）23.84ml，空白试验消耗硫酸滴定液（0.05015mol/L）39.88ml。每lml的氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）相当于18.02mg的C9H8O4。求此片剂的标示量%。

第62页/共103页第63页/共103页二、亚硝酸钠滴定法

具芳伯氨基或潜在芳伯氨基（芳酰氨基水解或硝基还原）的药物例:对氨基水杨酸钠第64页/共103页

三.双相滴定法芳酸碱金属盐

如苯甲酸钠ChP(2010)溶剂：水——乙醚第65页/共103页

取本品1.5g，精密称定，置分液漏斗中，加水25m1、乙醚50ml及甲基橙指示液2滴，用盐酸滴定液（0.5mo1/L）滴定，随滴随振摇，至水层显橙红色，分取水层，置具塞锥形瓶中，乙醚层用水5ml洗涤，洗液并入锥形瓶中,加乙醚20m1，继续用盐酸滴定液0.5mo1/L)滴定，随滴定随振摇，至水层显持续的橙红色。每1ml的盐酸滴定液（0.5mol/L）相当于72.06mg的C7H5NaO2。

第66页/共103页乙醚的作用是：萃取反应生成的苯甲酸，使水相中的中和反应进行到底滴定中要强力振摇。随着滴定不断进行，苯甲酸不断被萃取入有机溶剂层，使滴定反应完全，终点清晰。优点：消除了反应产物的干扰第67页/共103页四、紫外分光光度法1.直接紫外分光光度法丙磺舒片Ch.P（2010）第68页/共103页

取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于丙磺舒60mg），置200ml量瓶中，加乙醇150ml与盐酸溶液（9→100）4m1，置70℃水浴上加热30min，放冷，用乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液5ml，置100ml量瓶中，加盐酸溶液（9→100）2ml，用乙醇稀释至刻度，摇匀。于1cm吸收池中，以溶剂为空白，在249nm的波长处测定吸收度，按C13H19NO4S的吸收系数（）为338计算。第69页/共103页片剂，紫外分光光度法的吸收系数法第70页/共103页例.VitB1片UV法含量测定：取本品20片(规格10mg/片)，精密称得重量1.4070g，研细，精密称取0.1551g，置100ml量瓶中，加盐酸溶液(9→1000)约70ml，振摇15分钟，加盐酸溶液(9→1000)稀释至刻度，摇匀，用干燥滤纸滤过，精密量取续滤液5.0ml，置另一100ml量瓶中，加盐酸溶液（9→1000）稀释至刻度，摇匀，在246nm处测得吸收度0.474，按C12H17ClN4OS·HCl的吸收系数为421计算本片的标示量%。第71页/共103页第72页/共103页2.离子交换—紫外分光光度法氯贝丁酯

强碱性阴离子交换树脂吸附酸性杂质后，对照法定量测定氯贝丁酯含量第73页/共103页3.柱分配色谱—紫外分光光度法USP（33）阿司匹林胶囊可同时定量测定阿司匹林和水杨酸（1）水杨酸的限量测定固定相：FeCl3SA保留，冰醋酸洗脱，306nm测水杨酸的量（2）含量测定固定相：NaHCO3

ASA、SA保留冰醋酸洗脱，280nm测总量第74页/共103页

反相高效液相色谱法中的离子抑制色谱法，内标法定量

五、HPLC1.阿司匹林栓剂、肠溶胶囊、泡腾片Ch.P（2010）第75页/共103页栓剂：第76页/共103页

2.对氨基水杨酸钠

USP（33）离子对反相HPLC内标法定量

3.丙磺舒

USP（33）离子抑制色谱法外标法定量Ch.P（2010）直接滴定法第77页/共103页（一）血清中阿司匹林（ASA）和水杨酸（SA）浓度的高效液相色谱测定法

1.预处理方法血清+高氯酸去蛋白

2.测定方法离子抑制色谱法，内标法定量五、生物样品分析第78页/共103页（二）尿中丙磺舒的固相萃取净化—高效液相色谱分析法

1.预处理方法C8固相萃取柱，先用水洗去生物基质，甲醇洗脱药物和内标物

2.测定方法离子抑制色谱法，梯度洗脱，内标法定量第79页/共103页（三）HPLC法测定人血浆中布洛芬含量

1.预处理方法：血浆+甲醇去蛋白

2.测定方法：加预柱，离子抑制色谱法，内标法定量第80页/共103页小结：1、掌握芳酸及其酯类药物的结构、性质及与分析方法间的关系。2、掌握鉴别反应中与铁盐的反应及特殊鉴别反应，了解其他的鉴别反应。3、熟悉某些药物中特殊杂质的来源及检查方法。4、掌握中和法在芳酸及其酯类药物含量测定中的应用原理、注意事项。熟悉紫外分光光度法、了解高效液相色谱法测定该类药物的方法及原理。了解该类药物的体内分析方法。第81页/共103页98：80．鉴别水杨酸及其盐类，最常用的试液是A.碘化钾B.碘化汞钾C.三氯化铁D.硫酸亚铁E.亚铁氰化钾

第82页/共103页98：134．测定阿司匹林片和栓中药物的含量可采用的方法是A.重量法B.酸碱滴定法C.高效液相色谱法D.络合滴定法E.高锰酸钾法

第83页/共103页99：81.两步滴定法测定阿司匹林片的含量时，每1ml氢氧化钠溶液（0.1mol/L）相当于阿司匹林（分子量=180.16）的量是A.18.02mgB.180.2mgC.90.08mgD.45.04mgE.450.0mg

第84页/共103页反应摩尔比为1∶1T——滴定度，每1ml滴定液相当于被测组分的mg数c——滴定液浓度，mol/LMb——被测物的摩尔质量，g/mol第85页/共103页96：78．苯甲酸钠的含量测定，中国药典（2010年版）采用双相滴定法，其所用的溶剂体系为A.水—乙醇B.水—冰醋酸C.水—氯仿D.水—乙醚E.水—丙酮

第86页/共103页99：83.双相滴定法可适用的药物为A.阿司匹林B.对乙酰氨基酚C.水杨酸D.苯甲酸E.苯甲酸钠

第87页/共103页99x：[121—125]含量测定方法（中国药典2010年版）为A.直接中和滴定法B.两步滴定法C.两者均可D.两者均不可99x：121．阿司匹林片（）99x：122．阿司匹林原料药（）99x：123.对氨基水杨酸钠（）99x：124.阿司匹林栓剂（）99x：125.阿司匹林肠溶片（）

BADDB第88页/共103页例7.阿司匹林加碳酸钠试液加热后，再加稀硫酸酸化，此时产生的白色沉淀应是A.苯酚B.乙酰水杨酸C.水杨酸D.醋酸钠

E.醋酸苯酯

第89页/共103页例8.水杨酸与三氯化铁试液生成紫堇色产物的反应，要求溶液的pH值是A.pH10.0B.pH2.0C.pH7～8D.pH4～6E.pH2.0±0.1

第90页/共103页例9.两步滴定法测定阿司匹林片或阿司匹林肠溶片时，第一步滴定反应的作用是A.测定阿司匹林含量B.消除共存酸性物质的干扰C.使阿司匹林反应完全D.便于观测终点

E.有利于第二步滴定

第91页/共103页例10．对氨基水杨酸钠中的特殊杂质是A.水杨酸B.间氨基酚C.氨基酚D.苯酚

E.苯胺

第92页/共103页例11.能用与FeC13试液反应产生现象鉴别的药物有

A．苯甲酸钠

B．水杨酸

C．对乙酰氨基酚

D．氢化可的松

E．丙酸睾酮

第93页/共103页例12.采用双相滴定法测定苯甲酸钠含量时，加入乙醚的目的是

A.防止反应产物的干扰,使滴定反应完全

B.乙醚层在水上面，防止样品被氧化

C.消除酸碱性杂质的干扰

D.防止样品水解

E.以上都不对

第94页/共103页例13.阿司匹林中含量最高的杂质为A.乙酰水杨酸酐B.乙酰水杨酸水杨酸C.水杨酸D.水杨酰水杨酸

E.以上都不对

第95页/共103页例14.区别水杨酸和苯甲酸钠，最常用的试液是A.碘化钾B.碘化汞钾C.三氯化铁D.硫酸亚铁

E.亚铁氰化钾

第96页/共103页例15.在中性条件下，可与三氯化铁试液反应，生成赭色沉淀的药物是A.水杨酸钠B.对氨基水杨酸钠C.乙酰水杨酸D.苯甲酸钠

E.扑热息痛

第97页/共103页例16.