免疫耐受专题知识专家讲座

¤免疫耐受（immunologicaltolerance）：机体免疫系统接触某种抗原后形成特异性无应答状态，又称负免疫应答。¤耐受原（Tolerogen）：诱导免疫耐受抗原。¤含有免疫应答基本特征：诱导性，特异性和记忆性。¤不一样于免疫抑制（非特异性低反应）和免疫缺点（无反应）。第十五章免疫耐受免疫耐受专题知识专家讲座第1页Ag2→→

T、B细胞不活化，IR(-)耐受

无效应物

→

不排斥Ag2(耐受原)Ag1→

→

T、B细胞活化，IR(+)

免疫效应物→

排斥Ag1(免疫原)机体免疫耐受专题知识专家讲座第2页第一节免疫耐受形成第二节免疫耐受机制第三节免疫耐受与临床医学免疫耐受专题知识专家讲座第3页第一节免疫耐受形成一、胚胎期及新生期接触抗原所致免疫耐受1、胚胎期嵌合体形成中耐受Owen于1945年首先报道了胚胎期接触同种异型抗原所致免疫耐受现象。这种耐受含有抗原特异性。2、在胚胎期人工诱导免疫耐受Owen和Medawar等构想，可能是在胚胎期接触同种异型抗原诱导而诱导了免疫耐受产生。免疫耐受专题知识专家讲座第4页免疫耐受专题知识专家讲座第5页新生期成年期移植Balb/c皮肤A系A系CBA

A系CBA成年期移植CBA皮肤新生期CBACBABalb/cCBA天然特异免疫耐受形成免疫耐受专题知识专家讲座第6页

结论:

处于早期发育阶段免疫细胞接触抗原(本身或同种异型)可诱导免疫耐受。机制：胚胎期免疫系统还未发育成熟，抗原异物刺激造成抗原特异性免疫细胞克隆被排除，从而产生免疫耐受。此期所形成耐受含有特异性、持久性。免疫耐受专题知识专家讲座第7页二、后天接触抗原造成免疫耐受

（一）抗原原因1.抗原剂量

1964年Mitchison试验,牛血清白蛋白（BSA）剂量在:

10-8mol/L------10-7~10-6

mol/L------10-5

mol/L

耐受有应答,抗体生成耐受免疫耐受专题知识专家讲座第8页

低带耐受：TDAg量过低，不足以诱导有效应答而引发T细胞耐受。APCMHC-Ag肽须达10～100以上才能有效提呈并激活T细胞(单一TCR结合产生活化信号不足以活化T细胞)。

高带耐受：抗原剂量太高，则诱导应答细胞凋亡，或可能诱导调整性T细胞活化，抑制免疫应答，展现为特异性负应答状态，致T/B细胞耐受。

免疫耐受专题知识专家讲座第9页免疫耐受专题知识专家讲座第10页低剂量→低带耐受→仅使T细胞耐受。高剂量→高带耐受→T、B细胞均耐受。TI-Ag需高剂量才能诱导B细胞耐受；TD-Ag低剂量和高剂量均可诱导耐受。低剂量TD-Ag可诱导T细胞耐受（低带耐受）；高剂量TD-Ag同时诱导T、B细胞耐受（高带耐受）。

T细胞耐受易于B细胞耐受。免疫耐受专题知识专家讲座第11页免疫耐受专题知识专家讲座第12页耐受T细胞＋正常B细胞正常T细胞耐受B细胞＋HGG

检测应答（抗HGG）HGG

检测应答（抗HGG）X射线照射受者耐受原（HGG）不一样时间免疫耐受专题知识专家讲座第13页T细胞和B细胞耐受特点比较

T

细胞B

细胞抗原TDAg剂量高

/低TIAg剂量高诱导期短

1—2天长

数十天维持时间长，数月至多年短，数周耐受形成易难免疫耐受专题知识专家讲座第14页2.抗原类型及剂型抗原单体分子易形成免疫耐受，其原因是因为蛋白单体不易被巨噬细胞吞噬处理，不能被APC提呈,T细胞不能被活化；可溶性抗原，不易诱发免疫应答；抗原联合佐剂使用或蛋白聚合体，可诱导正免疫应答。3.抗原免疫路径静脉注射及口服易致全身耐受；经皮内或皮下免疫，激活特异T细胞免疫应答。4.抗原连续存在

免疫耐受专题知识专家讲座第15页5.抗原表位特点如：鸡卵溶菌酶(HEL)蛋白→免疫H-2b小鼠→形成耐受；去除HELN端三个氨基酸（即Treg表位）→免疫H-2b小鼠→耐受解除→Th细胞活化→辅助B细胞产生Ab。将能诱导Treg细胞活化抗原表位，称为耐受原表位（tolerogenicepitope)。

免疫耐受专题知识专家讲座第16页6.抗原变异与免疫耐受病原体发生抗原变异（如HIV、HCV），不但使原有免疫力失效，亦会因变异而产生模拟抗原，这类抗原能与特异应答T及B细胞表示受体结合，却不能产生使细胞活化第一信号，使细胞处于免疫耐受状态。

免疫耐受专题知识专家讲座第17页（二）机体方面原因1、年纪及发育阶段：

胚胎期>新生期>成年期与免疫系统发育成熟度相关。2、生理状态3、遗传背景免疫耐受专题知识专家讲座第18页第二节免疫耐受机制

免疫耐受按其形成时期不一样，分为中枢耐受和外周耐受。

中枢耐受（centraltolerance)是指在胚胎期及出生后T及B细胞在中枢免疫器官发育过程中，遇本身抗原所形成耐受。外周耐受（peripheraltolerance)是指成熟T及B细胞遇内源性或外源性抗原，不产生正免疫应答，而显示免疫耐受。免疫耐受专题知识专家讲座第19页概念：中枢免疫器官(胸腺和骨髓)内，发育中还未成熟T、B淋巴细胞，识别本身抗原细胞克隆被去除而形成本身耐受。

1.胸腺内发育中T细胞阳性选择和阴性选择

识别本身抗原未成熟T细胞凋亡。

2.骨髓内发育中B细胞(表示mIgM未成熟B细胞)

阴性选择识别本身抗原未成熟B细胞克隆消除或处于无反应性(anergy)状态。一、中枢耐受免疫耐受专题知识专家讲座第20页T及B细胞发育阶段经受克隆消除，显著降低出生后本身免疫病发生；诱导胸腺及骨髓中克隆消除本身抗原包含：体内各组织细胞普遍存在本身抗原（ubiquitousself-antigen）与组织特异抗原（tissuespecificantigen）。一、中枢耐受免疫耐受专题知识专家讲座第21页CD3+4+8+γαβδ

CD3－4－8－γ:δCD3+CD4－8－

+α:β4+8++CD3+pTα:β4+8++CD3+CD4+8－CD4－8+CD4－8+CD4+8－DCDC>95%细胞凋亡<5%输出胸腺皮质区髓质区T细胞中枢免疫耐受CD4+CD25+Foxp3+免疫耐受专题知识专家讲座第22页1.克隆去除及免疫忽略克隆去除（deletion）：T细胞克隆TCR对组织特异本身抗原含有高亲和力，且这种组织特异本身抗原浓度高者，则经抗原提呈细胞（APC）提呈，致这类T细胞克隆去除。免疫忽略（immunologicalignorance）：T细胞克隆TCR对组织特异本身抗原亲和力低，或这类本身抗原浓度很低，经APC提呈，不足以活化对应初始T细胞，这种本身应答T细胞克隆与对应组织特异抗原并存，在正常情况下，不引发本身免疫病发生。二、外周耐受免疫耐受专题知识专家讲座第23页免疫忽略动物模型：小鼠试验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)，是由对本身碱性髓鞘蛋白(MBP)多肽特异应答

Th1细胞被活化所致中枢神经组织迟发性超敏反应（DTH）。①碱性髓鞘蛋白MBP为神经组织特异抗原属隐蔽抗原，正常小鼠对其处于耐受状态。但若以适宜剂量本身抗原刺激免疫忽略细胞，仍可致免疫正应答。免疫耐受专题知识专家讲座第24页②人工建立对MBP特异识别TCR转基因小鼠

体内有大量MBP特异性T细胞，但不发生EAE。因外周组织表示MBP量低，只有中枢神经组织MBP浓度高，而该处是免疫隔离部位，初始T细胞不能进入。③MBP+弗氏完全佐剂注入小鼠，则诱发EAE

因外周MBP抗原浓度增高，外周APC被活化，转基因MBP-TCR+T细胞活化，发生免疫应答，其表面所表示粘附分子

（LFA-1,VLA-4）,使其穿越血脑屏障，进入中枢神经组织，与表示MBP细胞结合，致EAE。免疫耐受专题知识专家讲座第25页免疫忽略机制：1）组织特异性抗原浓度低，不足以活化初始T2）免疫隔离组织，初始T细胞不能进入免疫忽略打破：

感染：病原体与本身抗原分子模拟作用；

(异嗜性抗原)

外伤：组织特异性抗原暴露增多；相继APC活化、粘附分子表示增多，活化初始T，效应TH1穿过隔离屏障致本身免疫病。随感染控制及消失，免疫忽略又可恢复。免疫耐受专题知识专家讲座第26页概念：克隆无能指成熟本身反应性T/B细胞遇外周特异性抗原时，表现为不活化状态。转归：克隆无能细胞部分凋亡，部分可长久存活，在IL-2提供下，进行克隆扩增，造成本身免疫病。

2.克隆无能及不活化免疫耐受专题知识专家讲座第27页克隆无能原因

1）不能形成MHC-抗原肽复合物一些组织细胞不表示MHC-Ⅱ类分子。

2）缺乏第二活化信号不成熟DC(iDC)不充分表示B7和MHC-Ⅱ类分子，不产生IL-12；

组织细胞表示本身抗原，但不表示B7、CD40等；

(炎症时可表示，感染可诱发本身免疫病)

外周组织特异抗原浓度适宜时,虽能活化本身应答B细胞,但Th细胞不活化,不能提供B细胞扩增及分化所需细胞因子,B细胞呈免疫无能状态。免疫耐受专题知识专家讲座第28页3.免疫调整细胞作用

CD4+CD25+Foxp3+Treg等细胞含有负调整作用，经分泌IL-10及TGF-β等细胞因子，抑制iDC分化为成熟DC，促进iDC诱导免疫耐受，抑制Th1及CD8+T细胞功效。

与临床关系：含有抑制作用T细胞经产生TGF-β，抑制DC、Th/CTL功效。如瘤型麻风患者，Treg细胞呈优势活化，抑制Th1细胞应答，使得患者细胞免疫↓，Mφ、CTL活性↓，不能杀菌及抑菌，患者虽有抗体，但对细菌无抑制作用，疾病进展快速。

免疫耐受专题知识专家讲座第29页4.细胞因子作用

除上述含有抑制作用T细胞分泌抑制性细胞因子外，细胞存活及生长因子水平，亦包括免疫耐受。外周免疫器官中初始T及B细胞，在未遇外来抗原前，因其对本身抗原低应答，T及B细胞分别在IL-7、B细胞活化因子（B-cell-activating-factor,BAFF）刺激下存活与有限增殖；但如BAFF分泌过多，致B细胞增殖超限，易致本身免疫病如SLE、类风湿性关节炎等。

免疫耐受专题知识专家讲座第30页5.信号转导障碍与免疫耐受在T及B细胞活化过程中，活化信号经信号转导路径最终活化转导因子，开启对应基因，使细胞增殖并分化，表示效应功效。此过程亦受负信号分子反馈调控。假如这些负信号分子表示不足或缺点，会破坏免疫耐受，造成本身免疫疾病。如：Lyn、CD5、PTEN(一个磷酸酶)、CTLA-4和PD-1等负调控分子缺点，均易致本身免疫病。免疫耐受专题知识专家讲座第31页脑及眼前房,胎盘等均为免疫隔离部位。产生免疫隔离部位原因：生理屏障；PD-1负调控作用；抑制性细胞因子抑制Th1类细胞功效。在免疫隔离部位表示组织特异抗原细胞，几乎无机会活化本身抗原应答T细胞克隆，因而这些T细胞克隆处于免疫忽略状态。正常发育个体，主要靠外周耐受机制及免疫调整维持对本身抗原耐受；不然，致本身免疫病。

6.免疫隔离部位抗原在生理条件下不致免疫应答

免疫耐受专题知识专家讲座第32页交感性眼炎

一只眼外伤时，晶体蛋白等眼内蛋白成份外溢，剌激本身应答性T细胞活化，产生效应性T细胞，其粘附分子(VCAM等)↑、血管内皮细胞粘附分子受体表示↑活化效应细胞进入健康眼。

一只眼外伤时，晶体蛋白等眼内蛋白成份外溢，剌激本身应答性T细胞活化，产生效应性T细胞，其粘附分子(VCAM等)↑、血管内皮细胞粘附分子受体表示↑，活化效应细胞进入健康眼，而致免疫损害。血液循环免疫耐受专题知识专家讲座第33页B细胞耐受机制：

1.单体抗原不能使BCR交联，而致B无能；

2.能使B细胞活化抗原浓度，T细胞已耐受,而无Th和细胞因子辅助，B细胞不能活化；

3.B细胞也有免疫忽略，感染时旁路活化Th细胞可致本身免疫。

4.在生发中心，B细胞对外来抗原应答发生高频突变产生本身应答克隆，与大量可溶性本身抗原相遇，造成B细胞凋亡消除。

免疫耐受专题知识专家讲座第34页

第三节免疫耐受与临床医学

免疫耐受与临床疾病发生、发展及转归亲密相关。生理性免疫耐受对本身组织抗原不应答，不发生本身免疫疾病；病理性免疫耐受，对感染病原体或肿瘤细胞抗原不产生特异免疫应答，不能执行免疫防卫功效，则疾病发展及迁徙。为临床治疗目标，打破或建立免疫耐受，多处于临床前试验阶段。免疫耐受专题知识专家讲座第35页

建立免疫耐受治疗移植排斥反应和本身免疫病等1.口服或静脉注射抗原

口服免疫原，可致局部肠道粘膜特异免疫，而抑制全身免疫应答。应用：口服本身碱性髓鞘蛋白(MBP)→缓解EAE口服热休克蛋白HSP65→诱导Treg细胞→

治疗类风湿性关节炎(RA)在器官移植前，静脉注射供者起源血细胞，能在一定程度上抑制受者随即对同种异型抗原免疫应答，延长移植器官存活。免疫耐受专题知识专家讲座第36页免疫耐受专题知识专家讲座第37页

建立免疫耐受2.使用可溶性抗原或本身抗原肽拮抗肽3.阻断共刺激信号4.诱导免疫偏移5.骨髓和胸腺移植供体骨髓细胞输注。6.过继输入抑制性免疫细胞体外扩增Treg,再输入到受者体内。输入耐受性DC、巨噬细胞或间充质干细胞。

免疫耐受专题知识专家讲座第38页APCT细胞免疫原肽拮抗肽活化阻断TCRMHC拮抗肽阻断抗原肽活化信号免疫耐受专题知识专家讲座第39页打破免疫耐受在慢性感染及肿瘤患者中，常因诱导免疫应答条件缺点，致免疫耐受；提供对应条件，可望恢复免疫应答。1.阻断免疫抑制分子

CTLA－4、PD－1等分子封闭抗体。2.激活共刺激信号共刺激分子激动性抗体

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