小檗碱的提取分离及结构鉴定

小檗碱的提取分离及结构鉴定第一页，共15页。药物背景：黄连黄连单株形态药用部位黄连：多年生草本，根茎有分枝，形如鸡爪。叶基生，有长柄；叶片卵状三角形，三全裂，中央裂片棱形，羽毛深裂，边缘有锯齿。花葶1~2条，顶生，聚伞花序有3~8花。功能主治清热燥湿，泻火解毒。用于湿热痞满，呕吐吞酸，泻痢，黄疸，高热神昏，心火亢盛，心烦不寐，血热吐衄，目赤，牙痛，消渴，痈肿疔疮；外治湿疹，湿疮，耳道流脓。第二页，共15页。（1）小檗碱(Berberine，又称黄连素)一种常见的异喹啉生物碱，分子式C20H18NO4。为黄连主要有效成分，其含量约为4%~10%，但根据野生和栽培产地的不同，其含量各异药物背景：小檗碱理化性质第三页，共15页。（2）小檗碱是黄色针状结晶体，能缓慢溶于水（1:20），乙醇（1:100），较易于溶于热水，热乙醇，微溶于丙酮、氯仿、苯、几乎不溶于石油醚中。药物背景：小檗碱理化性质第四页，共15页。（3）小檗碱的结构式以稳定的季铵盐为主。在自然界，多以季铵盐形式存在，其盐酸盐、氢碘酸盐、硫酸盐、硝酸盐均难溶于水，易溶于热水，且各种盐的纯化都比较容易。药物背景：小檗碱理化性质第五页，共15页。药物背景：小檗碱医药用途小檗碱是一种常用的广谱抗菌药，具有看细菌性感染、抗肿瘤、抗心律失常、降压降血糖等功效，在临床上越来越广泛的应用。第六页，共15页。小檗碱的提取技术传统技术酸水法提取法石灰乳法提取法、乙醇回流提取法；新技术微波法提取；微波—索氏联合工艺提取超声波法提取小檗碱酶法、超临界提取法第七页，共15页。最终实验方案——酸水法提取传统提取法目前传统的提取技术主要是溶剂提取法。此法是从中草药中提取有效成分的常用方法，通过浸渍、渗漉、回流等方式将有效成分从药材组织内溶解，进行萃取。酸水提取法酸水法是利用小檗碱的硫酸盐在酸性溶液中的溶解度大、而盐酸盐几乎不溶于水的性质来实现提取分离的。第八页，共15页。实验提取流程黄连粗粉滤液滤液加HCL调PH=2~3加Nacl饱和静置、抽滤固体滤液粗品0.2%硫酸煎煮纱布过滤加石灰乳调PH=12静置、过滤静置出现黄色结晶抽滤加水加热至澄明趁热抽滤第九页，共15页。粗品精制粗品滤液固体小檗碱静置结晶抽滤加乙醇，水浴加热，趁热抽滤80℃干燥第十页，共15页。显色反应纸色谱法薄层色谱小檗碱结构鉴定小檗碱第十一页，共15页。鉴定方法显色反应浓硝酸或漂白粉实验：取2支已加入酸性小檗碱的试管，分别加入少量的漂白粉和2滴浓硝酸，都显樱红色。丙酮加成反应：在盐酸小檗碱水溶液中，加入氢氧化钠使呈碱性，然后滴加丙酮数滴，即可生成黄色结晶性小檗碱丙酮加成物。第十二页，共15页。鉴定方法纸色谱法支持剂：色谱滤纸供试品：实验所得的精制盐酸小檗碱乙醇溶液对照品：盐酸小檗碱标准品乙醇溶液展开剂：正丁醇：冰醋酸：水=4:1:1或7：1:2氯仿：乙醇：（0.1mol/L）盐酸=1:1:1显色剂：紫外灯线观察荧光或自然光下观察黄色斑点第十三页，共15页。鉴定方法薄层色谱法

制板：取层析用硅胶8g，加0.3%~.5%CMC-Na20~25ml，用研钵制成稀浆糊状，然后均匀涂布在洁净的玻璃板上，铺成一均匀薄板，室温晾干，105度下活化30min备用。点样、展开、显色：取自制的盐酸小檗碱乙醇样品溶液和盐酸小檗碱乙醇对照品溶液，分别用毛细管点在薄层板上，重复点样3~5次。用甲醇-丙酮-乙酸4