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文档简介

钙磷镁测定的学习教案第1页/共46页钙磷占第五、六位镁占第十一位微量元素有重要的生物作用和临床意义第2页/共46页第一节概述一、钙、磷代谢和调节二、镁代谢和生理功能三、微量元素与疾病第3页/共46页一、钙、磷代谢和调节(一)钙代谢:1.钙的含量、分布和血钙骨:99%体液、组织:1%可扩散钙:影响代谢、功能非扩散钙:与血浆蛋白结合第4页/共46页血钙受H+影响:pH升高-----------结合钙增加--------Ca2+减少[H+]Ca2+=K--------[HCO3-]第5页/共46页2.钙的吸收和排泄影响吸收的因素:VD3年龄溶解状态:乳糖、乳酸、氨基酸提高草酸、植酸抑制Ca:P=2:1时,吸收最好排泄:肠道:食物中未吸收及肠道分泌钙肾脏:点总排钙量的20%第6页/共46页(三)磷代谢:分布:骨:86%各组织体液:14%吸收:易吸收,较少缺磷排泄:肾脏。排泄量可血中磷酸盐成正比第7页/共46页(三)钙、磷代谢的调节甲状旁腺素:促进肾脏对Ca、P重吸收促进破骨细胞生成,促进骨盐溶解促进钙、磷重吸收Ca2+上升第8页/共46页降钙素:抑制肾脏对钙、磷的重吸收促进骨盐沉积抑制Ca、P吸收降低Ca2+第9页/共46页VD3促进肾脏对钙、磷的重吸收促进溶骨作用促进肠道Ca、P吸收升高Ca2+第10页/共46页(四)钙、磷的生理功能1.钙的作用:(1)凝血因子之一(2)增强心肌收缩、降低神经肌肉兴奋性(3)降低毛细血管通透性,减少渗出(4)做为酶的激活剂、抑制剂(5)激素的“第二信使”,参与代谢调节第11页/共46页2.磷的作用参与核酸、核苷酸、磷脂、磷蛋白的分子组成参与高能磷酸化合物生成共价修饰调节HPO42/H2PO4是缓冲体系第12页/共46页二、镁代谢和生理功能(一)镁的代谢骨:60%骨骼肌:20-30%其它组织:10%血浆中:重碳酸、柠檬酸、磷酸盐Mg2+Mg-血浆蛋白复合物第13页/共46页(二)镁的生理功能1.酶的辅助因子:约300种酶需Mg2+2.对神经肌肉兴奋性有降低作用第14页/共46页三、微量元素与疾病(一)微量元素对各种生命活动的影响促进机体生长发育对神经系统结构和功能的影响内分泌的影响、免疫系统的影响对心血管疾病的影响对肿瘤发生、发展和治疗对胚胎及胎儿发育的影响测复合物的活性免疫化学法第15页/共46页(三)微量元素的生物学作用及代谢1.铁:吸收:贮量少时---------吸收多酸性---------------吸收多Fe2+比Fe3+-----吸收多代谢:Fe2+------Fe3+-----运铁蛋白---合成血红素功能:合成血红素----血红蛋白、肌红蛋白、细胞色素、过氧化物酶、过氧化氢酶第16页/共46页2.锌分布:肌肉:62.2%骨:28.5%功能:1.与酶的合成与活性有关

2.与免疫功能有关第17页/共46页3.铜吸收:肠粘膜-------合成铜蓝蛋白排出:胆道---------肠道功能:1.参与许多酶的组成

2.促进Fe3+---------Fe2+,促进铁吸收第18页/共46页4.硒:肠道吸收--------尿汗排出多种酶的组成成分。如谷胱苷肽过氧化物酶抗氧化作用第19页/共46页5.铬葡萄糖耐量因子------使胰岛素与受体形成-S-S-键6.锰参与多种酶的组成(精氨酸酶、丙酮酸羟化酶、过氧化物岐化酶等)第20页/共46页8.钼骨牙中。对骨牙形成有重要作用黄嘌呤氧化酶、醛氧化酶、亚硫酸氧化酶9.氟10.碘甲状腺素T3、T4合成第21页/共46页第22页/共46页(一)钙测定第二节钙、磷、镁和微量元素测定一、血清钙、磷、镁的测定1.离子钙的测定:离子选择电极法第23页/共46页(二)总钙测定1.邻甲酚酞络合酮比色法:2.甲基麝香草酚蓝法碱性溶液中与钙螯合-------淡绿变蓝3.原子吸收分光光度法高温--------Ca2+------气态钙离子----吸收422.7nm光谱第24页/共46页4.EDTA络合滴定法碱性下-------Ca2+与钙红结合-----淡红色EDTA滴入-----夺取Ca2+------钙红重新游离------变蓝色第25页/共46页(二)血清磷的测定磷钼酸还原法磷酸盐与钼酸--------无色磷钼酸-----

加还原剂-----------蓝色复合杂聚物钼蓝2.磷钼酸非还原法酸性溶液中磷酸+钼酸铵---磷钼酸铵杂聚化合物3.酶法第26页/共46页(三)血清镁的测定原子吸收分光光度法:镁灯---激发---285.2nm光谱------标本中基态镁原子蒸汽吸收--------吸收量与镁浓度成正比2.甲基麝香草酚蓝法碱性溶液中与镁螯合------蓝紫色化合物3.Calmagite比色法碱性下,镁与Calmagite染料生成紫红色化合物第27页/共46页4.达旦黄比色法碱性下-----Mg2+-----Mg(OH)2胶体---------与达旦黄生成橘红色复合物第28页/共46页二、尿液中钙镁磷的测定先将尿液酸化,溶解尿中盐第29页/共46页三、铁、铜、锌测定(一)铁测定1.血清铁酸性---Fe3+与运铁蛋白分离----还原剂----Fe2+-----络合显色剂-------比色测定2.总铁结合力加过量Fe----使运铁蛋白饱和-----除去多余Fe2+------上清-----测Fe第30页/共46页+-HOH甘氨酰甘氨酸肽键第31页/共46页第32页/共46页(二)铜测定1.原子吸收分光光度法2.血清铜比色法稀酸—Cu2+与蛋白分离---除蛋白----上清与二乙基二醇代氨基甲酸钠---金黄色化合物第33页/共46页(三)锌测定酪氨酸残基和色氨酸残基与酚试剂的磷钨酸、磷钼酸------蓝色化合物加上Cu2+,结合双缩脲法,提高灵敏度适于测单一蛋白,且适用于蛋白含量较少的样品第34页/共46页4比浊法酸性试剂+蛋白质--------沉淀5染料结合法酸性条件下,蛋白质------NH3+酪,与染料中阴离子产生颜色反应。氨基黑、考马斯亮兰第35页/共46页6紫外分光光度法色氨酸、酪氨酸在280nm有吸收峰保持蛋白活性7折光测定法溶于溶液中的固体可增加它的光折射率固定波长、固定温度下,光折射率与蛋白浓度成正比第36页/共46页血清总蛋白-------临床意义:升高:多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症等。降低:白蛋白合成减少,或蛋白丢失第37页/共46页二、血清白蛋白测定1.染料结合法白蛋白与染料结合,球蛋白很少与染料结合溴甲酚绿,溴甲酚紫白蛋白(pH4.2,+)+BCG-------蓝绿色化合物------OD与白蛋白浓度成正比第38页/共46页2.盐析法球蛋白先沉淀3.电泳法4.2免疫化学法抗原抗体反应;抗体过量第39页/共46页临床意义合成减少吸收减少丢失过多第40页/共46页七、脑脊液蛋白质测定脉络膜的毛细血管壁超滤形成,及少量中枢神经系统合成浊度法染料结合法:考马斯亮兰,邻苯三酚红钼络合显色法。第41页/共46页临床意义:神经系统疾病血脑屏障通透性增加;血管性脑水肿,细胞含量过多,神经细胞坏死等第42页/共46页三、血清球蛋白测定球蛋白中色氨酸占2%,而白蛋中仅0.2%乙酰色氨酸+乙醛酸反应------紫色

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