某药业有限责任公司创业计划书

康脂素药业有限责任公司创业计划书二零零八年四月目录第一章：执行概要一、公司简介·················································································06二、市场描述·················································································06三、公司管理·················································································08四、公司战略规划··········································································08五、场地及设施·············································································08六、投资与财务·············································································08第二章：康脂素新药研究蕉一、产品来达源菊·····筋·····遵·····珠·····滔·····厘·····蠢···职·····傅·····丈·····颤·····物·····巡·····垃·····许·····徐·····收···阁0圾9欢二、肯原料来源庸·····督·····俗·····毅·····锄·····企·····居···丽·····伤·····饺·····堵·····断·····庄·····棕·····句·····嘴·····翅···负0吩9爹三、尤新药研究恼·····甩·····烟·····铁·····到·····愚·····潜···扩·····网·····购·····茄·····撕·····兆·····场·····继·····盟·····究···惠0警9害临床前研究诚·····包·····词·····股·····秃·····深·····棕···踩·····慧·····背·····监·····乎·····良·····挽·····茶·····润·····看·武10兰剂量的选择录·准·····社·····球·····换·····顶·····异·····期···编·····忠·····相·····社·····胡·····奶·····川·····屿·····妻····喷·乞27料康脂素质量卧标准起草说糊明道·丰·····置·····绢·····屋·····纵·····箱·····借·····坑·····杰·尽·····该·····酬·····轰··灭·焰28够产品生产工骂艺某·腐·····痛·····青·····绣·····宵·····仔·····恐····肌·····砌·····续·····众·····倾·····还·····准·····嚷·考····或36邮产必品包装封·····渴·····糖·····号·····糠·····暴·····崇···渐·····改·····表·····犯·····尿·····月·····竿·····继···杏·····搅·····筑38字品种规划此·····坦·····躲·····素·····渣·····敌·····骨···斧·····四·····凤·····岩·····睛·····烟·····雹·····仁·····风·····歇···绍3呜8挑第三章：丙生产质量管拔理庸一、生产管姐理盲·····般·····疾·····问·····漠·····爬·····虹···李·····画·····复·····翻·····林·····毙·····恳·····达·····感·····降···份39系二、雕生产要求麻·····名·····徒·····铜·····赢·····齐·····膜···遭·····词·····弯·····仔·····将·····传·····码·····把·····岩·····走···皂40蚀三、厂房建赏设唐·····示·····播·····产·····析·····遥·····雅···弯·····堵·····野·····被·····故·····存·····岗·····仇·····破·····巴···犬41违四、颠成本控制拐·····射·····驰·····距·····肉·····询·····腿···砍·····绑·····污·····昏·····灵·····附·····录·····阳·····虹·····吴···目41湾五、质量管撞理倡·····享·····荷·····棉·····异·····面·····慢···活·结·····款·····短·····裤·····升·····亚·····棋·····滑·····肺·····缎··雀41枯六、产品研彻发评·····宝·····部·····塘·····杆·····税·····桐···课·····淋·····抱·····器·····脆·····旋·····佳·····躬·····贡·····吊···品4末2局七、生产工逮艺流程伏·····倒·····还·····物·····病·····侧·····艺···雪·····苍·····舱·····蜻·····影·····瞎·····飘·····鲜·····蠢·建4晋2棋八、设备管宝理恳·····汪·····因·····队·····哈·····爬·····捷···垃·····磨·····漆·····魄·····艘·····涉·····国·····碍·····傅·····城···湿4扯2翼九、物料管陆理毙·····示·····问·····辩·····婆·····呈·····德···恢·····秀·····云·····倚·····想·····各·····违·····部·····币·····句···到4野4卖第货四串章据：蹲公司管理做一、公司概惠况衔·····摘·····驳·····闪·····虾·····同·····壳···搅·····厕·····咳·····胜·····疯·····卧·····钢·····直·····们·····纱···竹4瓣5堤二、产品核菌心竞争力前·····娃·····习·····址·····尾·····袖·····隙···窄·····崭·····雅·····辽·····轧·····坊·····膛·····且··鹿4列6治三、公司远民景地·····劳·····诞·····勤·····舰·····辱·····类···握·····掀·····躲·····猾·····某·····窝·····沿·····席·····伴·····痒···指4阶7是四、公司组炊织结构及各角部门职能哥·····霉·····抖·····森·····诵·····柿··膏·····蜻···礼·····俩·····舒·····喇··象4芳7赴五、公司的熔发展战略符·····懂·····国····莫·····卷·····势·····眠·····国·····通··卡·拍·····傻·····太·····滚·····沃·····途··所·盈4挡9购第奖五酷章：迟市场营销分划析幕一、市场挽概述邮·····屯·····争·····腐·····博·····装·····蜜···惑·····猛·····匪·····厨·····播·····胡·····虎·····工·····埋·····除···溜5卧2涉二、溜市场需求拘分析布·····情·····杯·····场·····给·····裳·····永···歪·····秃·····际·····匹·····残·····贺·····倒·····虑·····站·所5声3量三、受消费对象和器消费者购买墙特点姿·····对·····剑·····慢·····展·····岔·····德·胜·····杀·····愈·····太·····载·缓·渴5洲6君四、袍企业综合分夏析太·····紫·····神·····据·····麦·····娱·····蝇·····踪·····降·····监·旁·····彻·····乡·····难·····含·····纹··哪·榨5繁7杰第六章：市帝场营销恒一、目标市璃场养·····徐·····山·····酱·····获·····施·····勾···康·····摘·····逆·····黄·····搅·····孟·····峰·····指·····宝·····爷···雄5霞8希二、涉市场定位旬·····毛··惩·····唉·····逃·····虾·····拉·····虫·夜·····黄·····机·····紫·····播·····丝·····嘴·····姓·····灵·····近···梁5纹8装三、忍营销组合策胶略卫·····矛·····谨·····仇·····娱·····蛛·····敌····搅·····币·····桐·····而·····技·····专·····衰·····盼·····骑5夜9障四、促销策横略敞·····装·····盾·····虏·····反·····签·····竟····贴·····赔·····炒·····肿·····闪·····阵·····障·····丧·····壳·····放··煤61叨第七章财戒务规划与投筑资分析婆一、资本结讯构与规模装·····够·····在·····恢·····耀·····刮·····然····碍·····泪·····赌·····钢·····蚊·····帮·····涛·····态·椒6模5神二、资金来绘源及运用架·····忍·····驴·····著·····门·····育·····堵····扭·····快·····郑·····勒·····胳·····蔽·····歇·····沟·否6产6翁三、投资的嫂可行性分析犬·····打·····景·····圾·····示·····营·····艘····国·····通·····办·····龄·····归·····于·····暮···棉6袖6箭四、投资净挺现值和报酬这率会·····热·····杜·····推·····捧·····税·····残····脖·····莲·····收·····好·····淡·····王·····练6缠7姜五、项目敏臣感性分析益·····继·····面·····宴·····撞·····哨·····盈····伐·····致·····帮·····茎·····题·····摆·····下·····违··励6彻9特六、项目经维营安全性分汁析具·····裤·····数·····矛·····麻·····屑·····瓣····男·····炉·····些·····详·····做·····株·····酸70堡七、投资回诱报欣·····阁·····谜···牛·····膊·····院·····均·····刃·概·····楼·····伞·····该·····晌·····斑·····治·····正·····换·····谨···视70眠第八章财勤务分析矛一、主要财街务假设食·····柱·····姥·····兽·····伸·····鼓·····满····谦·····男·····甜·····位·····思·····常·····宾·····墨·····钳71予二、销售预惊测礼·····潮·····妙·····绘·····敞·····抄·····悉···道·····生·····蓝·····汤·····衣·····茫·····赞·····受·····觉·····决···于71扭三、成本费巴用核算预·····牌·····练·····垒·····卫·····识·····咬····汤·····灾·····贩·····扛·····马·····债·····柄·····乒·····考72帜四、利润表赚·····鸽·····裙·····颤·····隆·····谜·····些····格·····珍·····戚·····予·····推·····动·····定·····途·····炉·····牢···阀···戒7激3滥五、妇资产负债表粪·····寄·····羡·····恒·····突·····地·····渔····吨·····稠·····镜·····棵·····行·····筒·····雅·····侨··露····舅···生7塘4蚊六、现金流湾量表尤·····究·····准·····吉·····扬·····蓄·····页····飘·····醒·····春·····蛙·····伶·····慧·····煌·····惕····轿·····陈7帮5强七、贵财务指标分员析牢·····椒·····该·····厚·····斜·····廉·····们····似·····坟·····找·····芽·····寒·····字·····筛·····兄·····源7醉6公八、悠风险及其评丑价骄·····朝·····均·····浑·····撑·····监·····颤····斜·····浓·····滚·····肃·····霸·····愁·····辽·豪·····才···斩·钓7院7花九、暴风险资本的帅退出锤·····电·····陡·····样·····氏·····赢·····眉····仍·····奔·····松·····眼·····底·····泥·····引·····键·肚7莲8耳第源九知章翁：拣保险与法律悲事务狡第十艳章矮：奖附录咱附录一:满授权委托列·····藏·····鸣·····退·····上·····杂·····科····怠·····央·····启·····钢·····辅··歇···扛·····帅·逼··须·····亚··视7职8巾附录二：技稼术实施许可哄证蛙·窃·····献·····有·····旺·····湖·····裁·····艇····错·····灶·····伍·将·····站·····伶·····秃···牲7汁9叛附录三：员创业团队简席介责·····寿·····积·····妹·····煤·····乔·····恐···痰·····迅·····存·····绪·····啄·····膏·····轻····迫81垒附录四：准创业团队指宁导老师腹·色·····贸·····骄·····万·····当·····升·····迈···鸽·····纸·····眨·····钳·····定·····笛·唉8帮4栏附录五:幕产品包装黎·····完·····明·····见·····卵·····启·····却·堡·····吃·····投·····态·····蜘·····悉·····啄·····佛·····拖·胆··俗8垦5蛇附录六：茧金银花外观闷图魄·····木·····盛·····业·····球·····立·····偏····吼·····贫·····较·····捏·····惭·····乔·····攀···水8庙7饼附录血七饶：砌选择地优势年·····处·····散·····当·····鸭·····焦·····畏····汽·····崭·····酷·····坊·····覆·····很·····熟·····退··锦88洪附录参八撇:邀金银花标准吼操作规程（慨SOP布）议·····吵·····殊·····因·····夹·····今·····保····丛·····恢·····过··夸92捐附录九：河歉南新乡地图式·····怜····络·····诱·····雕·····滨·····踪·····吉·····驻·····静·····纯·····蓄·····道···辣·····士95胸附录十循：迎厂址掀·····苏·····狠·····膏·····盘·····忙·····遗····腿·····续·····渐·····知·····手·····纠·····插·····史··趣·····口·睛····久9寇7淋附录十一允：缘厂区平面图订·····美·····柔·····滥·····把·····验·····滩····题·····械·····控·····凶·····企·····豆···禾·····迫9家8脂附录十技二舍：市场状况馒问卷调查表君·····别·····像·滨·····脆·····腔·····雅·····半···打·····咐·····职·····宫····肠99絮第一章：执蒜行概要本一、公司简晌介紫康脂素药业丑有限责任公抖司（以下简欣称在“无康脂素药业女”薪）是一家正生在筹建中的昼集科研、生洒产、销售为躬一体的制药彼企业，公司柄坚持油“向关爱人类健泛康，幸福千都万家庭批”勤的理念，为雄大众做质量弱好疗效佳的肯药品。雾公司利用河愿南大学药学弱院康文艺博柿士的科研成才果，生产和收销售中药一粮类新药垄——疯康脂素，并良逐步建立原径料生产基地涛和全方位的巧销售网络。来公司以科技良为第一生产舍力，特别注越重新产品的脂研发，在投胖资初期就计垫划建立起以坑河南大学天悦然药物研究俊所为依托的炼研发中心，肆并注重人才泉的引进及培满养。狠公司厂址选傍在郑州市东超开发区，邻序近亚洲最大湿的中转站之弄一斜——错郑州火车站穷。该区交通嫂便利，环境志优美，并且移可以享受税滑收优惠政策乘。依二、市场描体述脏1蓝、流行病学伪状况将1.1右我国高血脂抢人群现状两2000年没亚洲心血管罗病合作研究判结果我国人让群劫总的血脂异境常患病率达秧18.6%开，近几年随勇着生活水平垄大幅度提高溉，血脂异常绞逐年增加，暗我国血脂异啊常患者近3创亿人。多1.2繁我国高血脂爹人群呈现年腔龄差异请2004年甩中国MO行NICA研轧究第二次危惧险因素调查叠，大多数地耐区女性的总在TC水平明池显高于男性蛇，富T庸G男水平也存在飞明显的差异评。标1.3弟我国高血脂斩人群的分布民特点僚血脂代谢异禾常在我国不粮同人群芬中具有不同崇的类型特征宪。我国人群物中具有至少坟一项血脂异州常的人群总舟数活逾亿人。劳1.4才老年人高血日脂特点伐2004年朽中国MO得NICA研划究，血脂异国常总患病率网高达65.坑9%煌。华1.眼5高血脂逐贺渐低龄化的承趋势机2004年设4-10月置中国MO景NICA研记究组织流行千病学调查组胡,得出结论朵:恰儿童高脂血傻症现患率冰明显增高,爽具有地区、宇年龄、性别寨的流行病学岂特征。津1.6爪高血脂和其宏它心血管疾骂病的相关性凭2004年披中国MO绞NICA研戒究谎得出高脂血独症为动脉粥盟样硬化、冠谷心病等其他屡心血管疾病婆的危险因素愚。饼1.7脆调节兽高血脂药物球1.录7.1忙西药类武：屑他汀类妙药物包括洛怪伐他汀、辛曾伐他汀习等；所胆汁酸螯合碌剂代表有考料来烯烈、趟考来替泊趴等；果贝特类有吉辽非罗齐遥；期烟酸道类；竿抗氧化剂普长罗布考嘉；孙多烯脂肪酸气类有n-揪3多烯忽脂肪酸巡。徐检中药类蹈：疯降呼血清卸胆固醉乞药物盒何首乌、决处明、虎杖等另和辈维生素E堆、黄精、黄氧酮类、甾体呢类和枯类化逃合物；描对低密度脂懂蛋白代谢的你影响床有伟决明子山植绳及山植黄酮质；节对甘油三醋模代谢的影响欣有修黄连、黄琴有、绞股蓝、用大黄、何首赵乌、大蒜、易姜黄、银杏喘叶等陶。闲；品对高密度脂役蛋白代谢的旦影响：山楂谣、大黄等默。束2促产品竞争力荡：分别从姿产品疗效竞男争力搁、级对比同类产豆品竞争力吐和产品市场帽竞争力三个丙方面阐述产脑品竞争力。3产品定位笼产品适用于锤各种原因引眠起的高血脂督血症、血清谨胆固醇增高捉症，也可用伙于冠心病或口慢性肝炎患房者的高血脂光症，动脉粥比样硬化的预除防和辅助治启疗。劳公司建立以付后，将针对皮降脂药市场痒的销售现状畏，突出产品痒优势，建立纠售前指导，星坚持售后服兄务。广泛宣协传健康知识窑，提高人们侦的健康意识貌和对本产品蓝的认知度、成认同度，指旅导高血脂人叹群合理的、袋科学的使用何本产品。肃公司初期将宣在郑州、开蒸封、洛阳设载立分销中心轿，采用卫星采媒体、地面啊促销和及时接反馈相结合骨的方式启动赞市场，跨入始大型超市、弊医院药房、盼药店直销直绪营，以产品偷功效吸引消执费者，带动脾品牌成长，怨再以品牌成翠长带动企业态发展，巩固赞继而扩大市朵场占有率，黑并积极拓展缘广阔的国际穷市场。谁三、公司管撑理探公司性质属角于有限责任尿制。部公司实行事桑业部型组织友机构，面对惧不同的环境伴，按照产品赢或类别、市盘场用户、地衰域以及不同野的业务单位狭分别成立若乏干事业部，糟并由这些事屠业部进行独职立业务经营姨和分权管理秤。由股东代和表组成董事少会，任命一呜名总经理和宁两名副总经态理，分别负迅责下设的财君务部、营销永部、公关部神（下设危机南管理中心和酬品牌推广部配）、生产部秆、质量管理棒部、研发中暂心和物流部慨八个部门。灰四、公司战连略规划奖以康脂素产敌品为核心产皮品，利用技枝术优势，积乌极开发新产食品，并积极特申请新药专面利，保护技串术成果。管忙理创新，产妙品创新，营挽销策略创新寨，充分发挥帝专项技术优耕势，坚持人苗力资源战略兰、企业文化磨战略及可持膜续发展战略闷。紫五、场地及副设施勉厂址狐：宁址选在郑州毅市东开发区潜,位于距郑它州东货站孩3公里倦的东三环路甲与航海喷路交叉处，许邻近亚洲最跳大的中转站碍之一廊——轧郑州火车站这。敢设备包括：往胶囊切割机估,药用胶囊肢套合机-J迹NG400级型，NIP削系列全自动勿胶囊充填机求，脉冲气流地干燥机，溶护胶罐等。梦六、投资与戚财务耍本公司设立物在郑州市东慎开发区，享烘受选“封免二减三斜”屯的税收优惠绞政策。拍公司成立初烘期共需资金辛1300万骨元，其中吸腹引风险资金猾550万元宽，河南大学券注入资金5部00万元，段短期贷款2劣50万元。高资金用于固掀定资产投资竿995万元早，流动资金若305万元探。语股本规模及展结构暂定为雾：注册资本毛为1050果万元，外来盗风险投资入维股300万助元（28.锦57%），疤河南大学专赠利技术入股福200万元塞（19.0毒5%），资弹金入股30此0万元（2钟8.57%柄），昨同时又引入炮2—3斧家风险投资姿共同入股丑250肺万元（23册.81%）贯，贷利于筹资，钻化解风险，转并为以后扩盈大规模做准卡备分在公司的经意营过程中将安获得充分的蒜市场信息，乡利用财务杠垄杆等财务分埋析工具，为创公司在资金雄管理方面赢赵得优势。孕第二章：康航脂素新药研记究熟一、产品来绪源叶该产品是由续河南大学天屡然药物研究宁所研发，经娱河南大学天怒然药物研究态所技术转让淋，由我公司迫全权负责该勿产品的生产而与经营。并掀附术转让证旬书（见附录慧二）会。哀二、原料来巴源求金银花为忍绝冬科植物忍比冬允Lonic想eraj芽aponi循ca划Thun还b.、红腺逐忍冬繁Lonic筋erah驾ypogl丸auca慕Miq.剧、山银花子Lonic猾erac分onfus击a复DC.或浑毛花柱忍冬州Lonic感erad泻asyst栽yla晶Rehd咱.的干燥花趁蕾或带初开新的花，为《感中国药典》勤（2005川年版）收载足品种，可用源于痈肿疔疮扣，喉痹，丹至毒，热毒血稠痢，风热感阻冒，温病发着热，具有清漏热解毒，凉默散风热之功胀效。战本公司以河碗南省封丘县蚂金银花种植菊基地为原料歇供应地，其品金银花年产编量居全国第茂一位，讽2003年剥该县获得全讽国惟一一家勿金银花躬“嫁原产地宵”虽认证，20签05年顺利物通过GAP喉认证。鼠三、新药研巡究访1集临床前研究犹1.1系雾统提取分离活趟金银花的悔粗提取:将胁金银花粉碎低，用丙酮：喷水1：2吐浸渍提取两丽次，第一次篇7天，第二牢次3天，得斑到浸渍提取味液，回收溶奇剂丙酮，得价到丙酮部分桶浸膏，两次萍得到的浸膏张合并，滤渣躬在分别用相湿同的方法分轮别用甲醇和悬氯仿提取，振最后得到丙宵酮、甲醇和爱氯仿三个部润分。跃题金银花余的精分离：肚将所得到的乔丙酮部分的拥浸膏用溶剂冈稀释，用硅梨胶、葡聚糖潮凝胶上柱分余离，然后用凡合适的溶剂布极性系统进氏行洗脱，经晋过复杂、反锹复的上柱分蔽离得到单体睁化合物两个狠：分别记做匠化合物A、洪B。利用上庆述方式分别厦对甲醇部分诱和氯仿部分跃进行系统分固离，甲醇部者分得到一个钞单体化合物虽：记做化合箭物C。氯仿应部分进行系万统的分离得麦到三个单体已化合物：分多别记做化合擦物D、E、轰F。经过系国统分离总共绞从金银花中讽得到六个单采体化合物。非列六种化吓合物的结构帝的测定潜化合物A援:黄色针状踢结晶(丙酮鲁),熔点学200～焰201妨℃冲。易溶于丙奇酮、甲醇、沉乙酸乙酯。捞溴酚蓝和三围氯化铁-铁炉氰化钾反应盾均为阳性,父推测其为酚费酸性物质。尺UV问λ但max(M斯eOH,n允m)笋:207预，258，萌294；付IR(KB治r,cm忌):3找410，玩2粘925，妙2滥856，捏1辩655，搞1603,效1庭527，吩1借455，加1悲382，吵1奶289，1转247，烫939，8校79，82手3，765叮，638，各555；乘1慢H-NMR欢(400府MHz，阻Aceto浇ne)猾:泼δ星7.51(灭1互H,d撕,J=2犯.0Hz孟,H-2栋2)，座7.46(却1曾H,dd赵,J=桃8.2均Hz，2.份0Hz，嚷H-26)肺，6.88润(旦1套H,d,政J=8禾.2Hz似,H-2伪5)；13挑C-NMR困(100纷MHz，A率ceton阵e)嫩δ场：122.炕8(C-居21)，1政17.2蓝(C-22描)，145困.4(C才-23)，堤150.龄6(C-2窝4)，11娃5.5(珍C-5)，禽123.4悼(C-26响)，167其.6(CO峡OH)。反化合物B:孔黄色结晶(尝丙酮),板熔点172米～罢174际℃割。易溶于丙祖酮、甲醇.神溴酚蓝和三咏氯化铁以-拳铁氰化钾反坏应均为阳性蚁,推测其为倦酚酸性物质忘。渔IR(KB选r,cm构):3曲484,傲3310升,2965钞,2晒840,乘1傲679,1春604,1夕532,1兵443,1咬367,1绍306,1阔279,1刘246,1螺188课,1109卵,1识045,9曾74,93催3,85青6；H纳2于NMR(4肆00MH刮z,Ac亭etone岂2D6+定D2O)牙:斥δ文7.02(炕1晒H,2d准,J=洞2.0H比z,H2脖2),渔δ留6.88(子1适H,dd倚,J=吗8.3祝Hz,1废.9Hz猎,H26恐),遇δ翁6.78(勉1犁H,d杯,J=吗8.0H们z,H25嘴),球δ嫂7.47(搭1村H213杜d,J颂=16.0纯Hz,方H2件7)铸,锣δ自6.泄16(默1笑H,d,庆J=16繁.0狸Hz,H糖28),膨δ怀3.66繁(登3倚H,s,晕-OCH惜3)；敬C2NMR鸽(Acet央one2D财6+2D摊2O):灿δ绸127.9币(C21)胖,烤δ谨111.8痕(C22)佛,嚼δ竖149.3嫌(C23)列,夜δ已150.3苗(C24)幸,换δ肾116.5顾(C25)糊,讽δ绍123.8塌(C26)卫,忙δ段146.恳5(C27颜δ俩116.1般(C28)葡,黎δ词170.8妇(-C煤OOH)。段故鉴定该化减合物为结构眉为B。喊化合物C:愤白色粉末(迈甲醇蜂)附,熔点19撤9～溪201秤℃骨。易溶于甲警醇、水。溴扭酚蓝反应为建阳性,推测脏其为有机酸浅类化合物。窝IR(K束Br,c怎m):慰3415,鬼3113,永2孙9漏36,1拨717,1土670,1锅451,1竿417,1叔235,欢1157,顾999,8途54,76陕3,543仿,1496妖；H奴2叛NMR(4佣00MH甘z拼,D2O)佳:性δ湖5.67(碑1润H,d,J奴=7.6H服z砖,H22)碧,田δ避7.40(白1升H,d,J舒=7.6H邻z雹,H23)储,拥δ处3.53(远2拦H,13难q,J=6呢.8Hz,痒7.2Hz蚁,-O师-写CH秤2矮-)恨,钥δ鲁1.05(招3烂H,t悲,J=6搜.8Hz辨,弓-CH住3降)；C2N技MR(40在0MHz杂,D2圈O):熄δ石167.4提(-C浊OOH)期,守δ消143.3门(C22)叨,庙δ篮100.9仿(C23)米,等δ锤57.3(遭-O-CH恼2晓-),顿δ叮16.7(暑-CH需3血)。故鉴定锈该化合物结具构为C。弯化合物D:冲白色固体(衣氯仿捐)证,熔点70阁～脖72志℃取。易溶于氯虾仿,H饼2犹NMR(4僵00行MHz,C理DCl3块):13桑9(3H宜,t,J努=6.8蜡Hz),慎δ见1.25刘(66H)谱,插δ远3.65慌(堪2赤H,t陵,J=允6.8旋Hz)；归C2NMR都(400庙MHz,C祖DCl3)拜:尘δ怎63.1楚,-18,魄δ讲31.9,单δ张29.7,澡δ迈29.6,驶δ漏25.愁7,咱δ扛22.该7,渣δ瞎14.郑1嘉IR(K衔Br,cm谊):3笼395,2棉919,2肺850,1流738,1怕613,1凑467,5朝,1372贷,1275治,1060夜,723。讨故鉴定该化耗合物结构为啦D。嘱化合物E:苏白色固体(心氯仿技)今,熔点54北～音56士℃骑。易溶于氯阵仿、乙酸乙慕酯。H玩2毛NMR(4翻00MH矿z,CDC真l3)志:9(锁3造H,t芦,J=6碍.8役Hz),耐δ龙1.25(怒42H),与δ沃1.购54(4H圾),仁δ秆3.志77(闪2刑H,t彻,J=拼6.咐8Hz)用。故鉴定该路化合物结构蛮为E。赠化合物F蓬:黄色固体豆(氯仿)菌,熔点40隙～失42梅℃垄。易溶于氯规仿、乙酸乙心酯H往2芹NMR(4梁00誉MHz龄,CDCl向3):妖1(忍1求H,s也,厕-CHO墨),抚δ谢7.22(托1况H,d旬,J=2驱.8Hz)硬,甲δ狂6.52(汁1葬H,d睛,J=3本.2Hz攻),汪δ纵4.7(蔽2议H,s抛,H22)糊,假δ歉1.25(德3果H星,CH粱3粘)。故鉴定末该化合物结骄构为F。应1.2体或外实验研究虽控试验方法及芒原理猪（1）DP细PH方法及言原理是DPPH法卷是20世纪猪50年代提坝出来的，最短初用于发现饺食品中的供发氢体，后来接广泛用于定连量测定酚类扯物质、黄酮秒类物质、香得辛料类、食娃品、水果和苹挥发油等的估抗氧化能力蹲。费DPPH各•持(像二苯代苦味然酰基自由基候)礼是一种很稳商定的以氮为大中心的自由避基（见图1叔）铁，线其孤对电子练在叼515nm积附近赴有强吸收（琴其乙醇水溶走液显深紫色鸽）。当有供屋氢能力的抗扩氧化剂存在舟时态，孤对电子吉被配对，吸丈收消失或减钻弱，而吸光盟度变小的程观度与自由基徒被清除的程绵度呈定量关彩系，因而可吉用分光光度杏法进行定量阵分析。阅图1D傍PPH结构滑及其还原产笛物蹦Fig.1辟Str材uctur齐eof螺DPPH塔andi耐tsre俱ducti敬onby侨the贸antio喉xidan搭tRH殃（2）AB怒TS方法及捆原理而ABT违S逮是一种水溶嗽性的自由基漫引发剂，啊该方法就是绒以此揭为显色剂，温经活性氧氧曲化后生成稳典定的蓝绿色花阳离子自由牺基ABTS丽•漫+刷，向其中加他入被测物质笋，当待测物春质中含有抗僚氧化物时，停该物质会与罗ABTS确•厘+汪发生发应而亦使反应体系世颜色褪去，慨结构式如图予2所示。在栋ABTS尊•唉+恨的最大吸收叉波长（一般引选择734逝nm）处搂检测吸光度戚的变化。检孕测结果与以叙Trolo逗x（6-H旗ydrox各y-2,5剖,7,8-傲tetra铃meth锦ylchr盆oman-岗2-car按boxyl犬icac半id，即揉6-羟基影-2,5,渔7,8-四农甲基苯并二棍氢吡喃-2炮羧酸），一俯种合成的类火似于V永E因的水溶性物悬质的对照标千准体系比较确，换算出被多测物质总的渡抗氧化能力香，结果多表渠示为达到一军定浓度测试龄物质相当的扛抗氧化能力偶所需要的T扶rolox锯的浓度。狂图2爷ABTS及定其自由基结彩构走Fig.2稍塌Struc贤ture拥of睁ABTS挂andi怖tsfr肢eera起dical促（3）FR节AP方法及宴原理洗FRAP方煤法娇的原理：在元低pH值的究溶液中，F万e塞3+辟-三吡啶三跌哑嗪（叛tripy午ridyl帝-tria奔zine，彻TPTZ独）可被抗氧颤化剂还原为严二价铁形式恭，呈现出明晚显的蓝色，岭并在593连nm处有耍最大吸收，冷根据吸光度宋的大小计算躬出抗氧化活教性的强弱。围结果以驴Fe泡2+艇当量或相对准于标准抗氧到化剂的能力贼来表示。现项操作方法捉（1）DP泄PH方法裹将样品用甲斧醇配制成一盗系列浓度，晓取0.1备ml样品加连入3.5沿mlDP侵PH甲醇溶天液（0.0民6mmo纺l/L），央混匀，30舌min后铸测定515岁nm处吸抛光度；同法真0.1m岛l甲醇+粉3.5m墨lDPP面H溶液混匀融测定吸光度有。每份样品用平行操作3播次，取平均索值。按照以锹下公式计算汁自由基清除抹率：纽仆DPPH惕radic典alsc顷aveng迅ingr教ate(%梦)=[答（A快contr歪ol乎-A杠sampl灿e够）/A婆contr杯ol挠]女×忠100式中慧，A赴contr猴ol饰为DPPH嫩本身在测定都波长的吸收弹，A卧sampl油e绣为样品对D蔑PPH作用小后的吸收度尾数值（除去公样品自身吸蛛收）。嘉（2）AB朗TS方法花将样品用甲骆醇配制成一润系列浓度，铲取0.15想ml样品舱加入2.8冠5ml寿ABTS自傅由基工作液饼，混匀，1欢0min浆后测定73闹4nm处伏吸光度；同侧法0.15罩ml甲醇厚+2.以85ml阳ABTS袋自由基工作和液混匀测定狭吸光度。每郊份样品平行砍操作3次，清取平均值。宫按照以下公袖式计算自由妥基清除率：态间ABTS湾radic锐alsc友aveng继ingr片ate(%斜)=[轨（A用contr吗ol愧-A对sampl蝶e宇）/A御contr黑ol杆]谋×瓜100式中淹，A斜contr偏ol催为ABTS佛本身在测定与波长的吸收赏，A斯sampl惭e门为样品对A少BTS作用葬后的吸收度棍数值（除去剖样品自身吸桐收）。卡（3）FR惑AP方法五将样品用甲暗醇配制成一滴系列浓度，脆取0.2撒ml样品加类入3.8般ml新鲜配手制的TPT剪Z工作液，魂混匀，咱37必℃浇反应30蜓min后测哈定593用nm处吸光爱度。每份样漂品平行操作胸3次，取平钳均值。若所乳测定样品吸舰光度值超过碑线性范围，参则需要进一忘步稀释样品治。发痕试验结果熔挂.1DP勾PH实验结枯果见表1和默表2音由表2可知滥，化合物D贴PPH法抗肯氧化活性由铸大到小依次导是C>漆D>E喂>F尝>A>堵B>L祥GL赶表1阳胖性对照品清蜡除DPPH润自由基的半露数抑制浓度波样本该数及(N)虹终浓度说（佣µ晌g/ml）狡A值饲(渐X闹±结SD)骆抑制率欲（%）驱IC赚50雹（长µ晋g/ml）爽PG按3报-扁0.578警±广0.002案-喷0.86番3场2.78扰0.028咸±贵0.002真95.21饮3效1.67菌0.087检±其0.003设84.88谨3懒0.83渗0.295辆±尼0.014香48.93纹3毛0.42权0.425句±晨0.007没26.43罗3勉0.21尽0.505匪±梢0.007净12.52女BHA膏3漆-肺0.575欲±耍0.001田-慢3.43浊3程16.67较0.034另±沙0.001租94.09愈3粥8.33板0.080符±艘0.003阁86.15佛3俘4.17仔0.233舰±极0.006欲59.59耀3守2.08鼠0.397雀±外0.006跃30.84挑3疑1.04乱0.472隐±验0.003持17.83私BHT悉3倘-俘0.584稻±锋0.001惯-倚18.79泉3盲111.1哀1膨0.045扁±哀0.002杆92.29展3存83.33纽0.065聋±亭0.002侄88.81露3周33.33粪0.204遍±痰0.004赚65.15挨3凉16.67再0.343瘦±朗0.017唇41.12送3栏8.33栋0.428谨±乘0.007举26.52伤注：旷“乎N踩”诱为样本数鞭表2化怎合物清除D涂PPH自由轻基的半数抑既制浓度麻No.睬样本数哑(N)块终浓度晋（雄µ蚂g/ml）乓A值遇(搁X贵±缠SD)价抑制率队（%）击IC嫩50欲（杯µ私g/ml）膛A臣3换-慌0.593镜±各0.002框-谷32.86稳3庭111.1习1预0.034越±俱0.001赞94.32熟3挎83.33璃0.039欺±滤0.000汁93.42伯3陵55.56雷0.129主±弓0.001碰78.28裁3可13.89观0.456要±烘0.005饮22.89齐3怎6.94戚0.521乒±泻0.003顺11.89肿B塑3帝-鱼0.586夹±润0.002蒜-小42.21扛3米5.55似0.022侵±瓜0.002骂96.25孤3臭2.78绘0.070相±眼0.002石88.05训3劈1.39亩0.257阵±鹅0.000垒56.14现3码0.69顽0.411州±哥0.009智29.86断3卷0.35晋0.493广±周0.002峰15.87洽C舰3县-速0.586深±禁0.002衡-虫1.13评3偏5.55惠0.022盈±骗0.002醋96.25毙3般2.78四0.070定±周0.002拉88.05欣3莲1.39视0.257饶±龙0.000竭56.14倚3闷0.69仔0.411绿±续0.009治29.86片3务0.35羡0.493精±嗽0.002呀15.87志D坊3孝-轿0.544身±压0.003种-巨14.33刻3称55.56么0.161对±找0.016醒70.4稳3利16.67费0.235暴±芹0.005猎56.8括3筐8.33念0.371营±劈0.003洁31.8脂3毒4.17车0.384接±奖0.006宽31.06喷2.08酬0.521讽±光0.003讨6.46呀E现3肥0.616乡±思0.003洽-寸20.06本3羞55.56钞0.040丝±惊0.002棉93.45睬3毅27.78幅0.219务±肤0.005沸64.50吧3美13.89膝0.405毫±婆0.002户34.31蚀3银6.94抽0.502院±桐0.004零17.16朝3以3.47疲0.553燃±帆0.009可8.75唱F忆3躬0.594颜±状0.002着24.61落3狮83.33策0.032馅±蔬0.001玉94.56岛3梳55.56称0.062棒±事0.003晋89.62保3桂27.78暖0.271僻±饶0.001舒54.40询3亮13.89构0.403锦±拉0.004限32.38衰3腥6.94昏0.495玩±披0.006婆17.00存LGL判3溜-南0.593醉±乞0.002它-椅59.4源3床111.1疤1蠢0.034首±徒0.001挣94.32捞3哈83.33淘0.039勇±认0.000充80.42药3误55.56慈0.129怕±它0.001危48.28阁3印13.89黎0.456鹿±蜻0.005妨22.89殊3烤6.94拜0.521捧±苦0.003胳11.89涂秒.2A烛BTS实验党结果杏由表2可知祖，化合物A摔BTS法抗堵氧化活性由座大到小依次魂是C>有E>B祖>F涨>D>捡A>咱LGL滴图3T礼rolox从清除ABT仁S自由基标迎准曲线侮表4阳姓性对照品清冠除ABTS报自由基的半半数抑制浓度均（N=3）孔No.鹊终浓度源（蜻µ仙g/ml）还A值糖(枕X具±辆SD)扒抑制率油（%）敢IC龟50继（班µ畜g/ml）喷RACT5商0订µ顾mol/g冶PG真-棉0.764赞±探0.007拔-拢0.66齿15509瘦.09对1.5降0.036翻±像0.001保95.29催1.25碰0.169兼±浊0们.005铜77.88突0.625区0.434穿±湿0.006饺43.19纤0.312面5潮0.580犬±宾0.004套24.08粮0.156辞25系0.655惹±都0.004炊14.27趣BHA发-详0.758乳±弊0.006穗-概1.72怪5951.齐16谦5映0.001屠±估0.001曲99.87仗3.75怨0.015锤±貌0.004挪98.02升2.5拐0.271歪±悔0.006召62.25浪1.25阁0.452斧±辟0.004大40.37犯0.625乘0.599停±摄0.007据20.98样BHT洞-托0.758择±趟0.008强-验6.04包1696.缓11倡25院0.094谨±撒0.002禽87.6俊12.5予0.229门±瞎0.004择69.79医6.25晴0.375哪±渠0.002锅50.53脱3.125事0.512圆±饺0.007多32.45覆1.562抹5逼0.605虫±浓0.015结20.18集表5化批合物清除A母BTS自由联基的半数抑设制浓度（N嘱=3）贺No.澡终浓度哭（狐µ院g/ml）鸣A值会(盛X岸±毯SD)惊抑制率贤（%）乡IC绒50雅（只µ月g/ml）备RACT5凳µ侧mol/g闪A率-钳0.783晃±邪0.006连-枪4.82森2125.陪86爱12.5搭0.067婚±沿0.003位91.44趟9.375谊0.118树±醒0.001彩84.93跪6.25乎0.274老±辣0.005疲65.01赞3.125拖0.480凶±价0.005耳38.7极B她-裙0.837搜±吐0.007相-集3.58醋2859.裤22椒25匠0.063无±罗0.005耽92.47厉12.5根0.068覆±婚0.001社91.88石6.25吉0.196息±灭0.002袍76.58顺3.125羞0.448凝±亿0.007俗46.48挣1.562徐5诵0.608子±设0.007退27.36限C伴-销0.760蜡±螺0.005机-再1.49毁6869.胆80帖6.25窃0.004遗±搏0.001王99.48罩3.125惕0.163都±戴0.010男78.55特1.562匀5条0.362虾±叶0.005温52.43危0.781界25枪0.550拨±卖0.004爷27.69口D根-竿0.778拳±友0.005大-朗4.03缩2539.看95缩50阿0.060求±圣0.004畜92.29运25俱0.122徒±帮0.005效84.32睛12.5贷0.191堤±挡0.003演75.45垄6.25丘0.297梨±棚0.012拨61.83踢3.125退0.429次±厦0.007讽44.86疏E拒-念0.712凭±饶0.004辨-墙3.45际3181.伯6写12.5名0.011强±科0.001脂98.46徒6.25船0.096垦±化0.002掘86.52牵3.125仗0.388辰±脖0.003代45.51唯1.562层5份0.496逝±快0.003穗30.34传F精-喊0.712民±掏0.001嚼-嗽3.625更2823.串72宽6.25牵0.164妄±稼0.004鱼76.97指3.125兄0.393牺±信0.012耐44.80油1.562沙5由0.526牲±末0.002耍26.12缺LGL执-陷0.677轧±刷0.002著-枝11.76武870.4处1蔬50刊0.020件±垒0.004焰97.05拿25钥0.154层±动0.010区77.25待12.5聋0.320煮±袄0.004羞52.73跌6.25司0.459驰±包0.006跨32.2迁柴.3FR趣AP方法实驳验结果诱由表2可知仅，六种单体碎化合物AB腐TS法抗氧烫化活性由大裂到小依次是永C>E矿>B撒>F>衫D>港A>L勤GL祝图4建Trolo勉x在FRA简P方法中的丸标准曲线弦表7阳性对段照品FRA裁P值（N=孩3）荷阳性对照挑浓度(mg仔/ml）哨A值保(歇X兴±瓶SD)史Trolo途x当量(劈μ绘mol/g旨）卧(舅X挎±岂SD)祝PG帐0.025必0.636舟±惰0.008慌10617愿.75耽±厘138.3换8届BHA葡0.025咳0.449损±冻0.007召7383.勤10廊±壳121.0把8柔BHT衬0.125倦0.528寇±旁0.001遣1748.尺49僚±耳3.46懒表8化合物却FRAP值增（N=3）歪样品何浓度(mg俯/ml）蛋A值狂(醋X院±查SD)元Trolo燃x当量(奖μ是mol/g累）偶(草X肯±欲SD)煎A瞧1蒙0.611券±骨0.003森261.3搁1框±宜17.3朴B缺0.125澡0.71袄±另0.011柏2552.辅59法±烦63.06赤C丰0.062自5洪0.834丰±储0.008厌5697.刺15你±急175.8醋2洽D菊0.25滚0.852局±穷0.021趴1481.起97寨±劳35.92晌E纤0.125娘0.874鞠±预0.013伪303污7.94码±承46.97看F换0.062碗5存0.527希±顶0.007摩3655.业54爽±沃47.59瞎LGL某0.5坚0.930丢±轰0.005规789.6帮4困±唐32.69砌债结论糊体外实验我季们研究了这储几种化合物症的体外活性弓，我们得如揭下结果匪Table奉3An记tioxi顿dant价activ爹ities形ofC宜ompou旧nd1～鞋9旁Sampl棍e摊TEA(把μ滑molT跃rolox寇/g)毙IC当50贝(钟μ广g/ml)忙ABTS塔FRAP到ABTS援DPPH哑PG拒15509贺.09肉10617欢.7之±伏138.3孟8嘴0.66笔0.86太BHA欠5951.钉16厅7383.繁10妹±奔121.0帮8券1.72疤3.43族BHT粒1696.伐11遗1748.吉49泳±册3.46案6.04腐18.79季C排6869.趋80冈5697.央15塔±命175.8嚼2凡1.49休1.13喜E鸭3181.城6哭3037.阳94抛±痒46.97僵3.45乌20.06萝B钳2859.第22日2552.羡59败±伤63.06武3.58筋42.21圣F手2823.尸72唤3655.孝54恼±走47.59隙3.625奋24.61秀D谅2539.谁95雷1481.衡97狗±作35.92脑4.03旦14.33死A音2125.孤86渗261.3休1锅±滤17.3薄4.82赤32.86绸LGL拔870.4钱1含789.6茶4轰±会32.69酸11.76壤59.4枯阳性对照：络Trolo牺x肠PG：名称辉propy铁lgal遥late，决没食子酸丙波酯抬BHA：名奏称Buty钱lated碧hydr猛oxyan主isole负，丁基羟基隆茴香醚监BHT：名轧称Buty俩lated发hydr马oxyto握luene或，二丁基羟置基甲苯点A-F表示瘦单体化合物掌LGL表示改：部位晌体外实验结盆论：通过体轰外活性抗氧嫂化的研究，晴提示化合物敌C有很强的说体外抗氧化屡的活性，为泪以后的动物置实验进一步忘的确证提供纪很好的体外迷数据，也为朗接下来的实杰验剂量提供塘很好的参考问。该化合物宰有很好的体踢内研究价值肤。港1.3论体内试验说恰对得到的博六个化合物笛体内实验妨详实验目的：足对化合物进筑行降血脂模所型的筛选，未确定其降脂竿疗效树1.3.柴3巩实验动物缝：昆明小鼠嫩（全部雄性盐），体重为暖18酷-20g狮，由河南省喘医学研究动签物实验中心魔提供。晒1.3.裕4纯实验药物旁：将分离得痰到的六个单步体化合物分险别用CMC蚊Na混悬，雪低温保存，箱待用。阳性根对照药为降悼脂灵片（湖辛南德海制药愁）蚕批号：07各06032知2。蛇1.3.间5悄试验检测精试剂：胆固显醇(TC)膀试剂盒、甘闷油三酯(T鹅G)、低密窄度脂蛋白胆隔固醇(LD主L-C)、柱高密度脂蛋贝白胆固醇(备HDL-C团)试剂盒。绘1.3.馅6绳实验造模码方法:够参照徐叔云泰《药理实验饭方法学》的债方法，取8络7%的基础直饲料，加入府2%胆固醇圆、10%猪柱油、0.2宽%胆酸钠、刊0.2%丙冬基硫氧嘧啶衣，加热、混膜匀、制成高侦脂饲料，喂杂服10天(纱20只/天刑)。摘1.3.竭7尝实验步骤桃：随机将6吉0只小鼠分谢成九组:空拣白组、模型仇组、阳性对五照组、化合召物A组、化惩合物B组、嚷化合物C组灭、化合物D塞组，化合物坡E组、化合返物F组，每亏组10只.佩1.3.抬8乏喂养与护视理群空白组小鼠劲给予普通饲垒料(购自河衡南医学研究亲动物实验中武心)，其余麦各组给予高缝脂饲料;各浴组均自由饮被水，每日更困换饮水及饲其料，保持动巷物生活环境复通风及清洁露卫生。穴1.3.扎9凶给药方法州小鼠造模的卷第一天开始犁灌胃，试验锻药和阳性对筋照药按照上脏述方法进行赌配制给药，比其余给0.城5ml\g卸的生理盐水帅，剂量按人统与小鼠体表驻面积折算，祝每日一次，助连续10天市。路1.3.揪10士标本采集傻小鼠灌胃1班0天后，从状第11天起绝，禁食12碍小时，自由遇饮水，采血脸0.5ml傍，在正常温约度下300似0rpm离若心10分钟装，分离血清逝备用。叫1.3.趣11奉观察指标及躲方法瑞衰1锅.1实验动寒物的一般情使况:包括饮裹食、大小便蚕及精神状态阔的变化等。妖例1捡.2总胆固锄醇的测定:昏用酶反应试狗剂药盒测定亩。旧插1库.3甘油三革酯的测定:众用酶终点法而测定。谋蛾1射.4低密度序脂蛋白的测游定:聚乙酸透硫酸沉淀法刺。畅规1超.5高密度乘脂蛋白的测箩定:磷乌酸兽一镁沉淀法辰。僚环1梅.6血液流叉变学的测定康:用NxE律-5型血液割流变仪测定贯。宅完1燥.7肝脏病枪理切片的检降查。膜折2白统计学处甩理所得橡数据以平均钞值士标准差山(X士s)色表示，各标中本均数的比项较采用方差悠分析的t检细验和q检验薯。济秧2错.1结果绸灭2但.2一般情犁况动物精神读状态良好，评所有给药组龄小鼠的大便已、小便明显何增多，饮食毛尚可，灌胃葡前后无明显耐不良反应。森职2英.3六个快化合物对血促清总胆固醇兴(TC)的怜影响方模型组明显达高于空白组饥(P<0.负01),模比型组血清T橡C值明显高绑于药物C组稼(P<0.忽01)，模辅型组和药物答A、B、D代、E、F组亮的血清TC怖值没有显著渠性差异（P咬>0.05雹）,药物纱C组和空白套组的血清T热C值没有明钟显差异(P专<0.01销)。见表1右表1各组小呆鼠血清胆固饥醇(TC)斯水平的比较鸽(X土s)扛组别怒样品数量臣TC值(m命mol\l溜)供空白组肆10命1.918补0土0.2垄443练模型组垃10麻7.462究5士2.1胸406惧阳性对照组塑10坝4.833证0士0.7躲687麦A罪10富7.405士6士顽2.456殃3坚B太9抓6.987拖8士2.6丘978翼C盼9东1.932渗8士0.2澡546庆D逮10仓6.567屿6士2.3初432咸E想8腿5.234室7士2.5钓489百F环10巷7.895诚6士3.4桥886狱结论锅：化合物C犯由明显降低步小鼠血清总筹胆固醇，并喝且降脂可以柴降到正常水绿平。第1.编3.1逢2秤.4六个化吃合物对血清偶甘油三脂(遇TG)未的影响，选模型组明显喂高于空白组绵(P<0.劈01),模谅型组血清T排G值明显高饼于药物C组尾(P<0.杰01)，模慢型组和药物芽A、B、D天、E、F组书的血清TG作值没有显著企性差异（P阳>0.05吼）,药物昼C组和空白朋组的血清T团G值没有明蕉显差异(P挣<0.01戏)。如下表衡2剑表2各组小畅鼠血清胆固避醇(TG)罪水平的比较痰(X土s)统组别蹄样品数量步TG值(m确mol\l晨)丘空白组林10西1.405怀0土0.2彼791鲁模型组每10项2.476自3士0.1蹄303摄阳性对照组烤10埋1.730烫5士0.1客270此A逐10液2.415会7士0.4早563也B饥9晚2.567永8士0.4五878算C挡9浴1.412输8士0.2展546子D提10瞧2.558胜6士0.3设252裙E货8志2.244女7士2.5小789红F像10长2.847立6士3.4戏663圆结论：化合前物C有明显喂降低小鼠血样清甘油三脂银，并且降脂太可以降到正电常水平室成2宝.5六个欲化合物对低桥密度脂蛋白砖胆固醇（L浸DL）对和浑高密度脂蛋风白胆固醇（妄HDL）的寒影响问模型组血清淡低密度脂蛋键白胆固醇（涝LDL）明异显高于空白束组(P<0兆.01),田模型组血清懂LDL值明钟显高于药物抢C组(P<港0.01)桂，模型组和助药物A、B尖、D、E、合F组的血清穿LDL值没押有显著性差泰异（P>0效.05）,单药物C组谁和空白组的到血清LDL筹值没有明显霉差异(P<育0.01)抄。忆模型组的高挤密度脂蛋白励胆固醇（H钓DL）明显脏高于空白组布(P<0.证01),模嫌型组血清H门DL值明显诊高于药物C沙组(P<0箭.01)，份模型组和药并物A、B、父D、E、F绣组的血清H阵DL值没有孩显著性差异踏（P>0.提05）,杰药物C组和逮空白组的血改清HDL值扫没有明显差公异(P<0屿.01)如牲下表3哭表3各组大土鼠血清胆固张醇(HDL纤和LDL)辨水平的比较例(X土s)贱组别喜样品数量纳HDL值(属mmol\僚l)洋LDL值(粪mmol\慰l)仇空白组壳10岔1.232纱0土0.0繁974命1.695约0土0.3桂915校模型组头10史0.896届3士0.0狭997剥5.830内0土0.6胡912猜阳性对照组替10突1.334缩0士0.1共8根40蜘2.812满0土0.5朴625节A抗10馋0.435弯7士0.4伟761污4.240掀0士0.5绘452材B刚9活0.534籍8士0.4灿458等5.453届0土0.2讨836窝C倚9继1.132菌8士0.2棍146廊5.766牙4土0.3影886私D对10匙0.547受6士0.3冠282令5.288俭9土0.2破876仗E贫8氏0.236岸7士0.8如549穿4.988婚7土0.1碑843馋F丽10惕0.829陆6士0.3魂763悄4.877迅3土0.2屑671黑结论：化合治物C有明显盯降低小鼠低尽密度脂蛋白亮胆固醇（L看DL）对和嘉高密度脂蛋罚白胆固醇毯（HDL）开,并且降脂冷可以降到正途常水平映。口1.4对化漠合物C赚相关具碧最大耐受量角实验研究躲慨.1材料与雾方法吩寇.2实验动确物膛：雪昆明种小鼠搬20只(雌毁雄各半)，域由河南省医庭学动物实验诚中心提供。犹结.3药物灭：寻化合物C晚图.4喂养与伟护理施：姐小鼠给予普奔通饲料(购叔自河南省医按学动物实验储中心)，自半由饮水，每晃日更换饮水订及饲料，保仪持动物生活指环境通风及展清洁卫生。圈肺.5给药方纯法游：薪小鼠连续观种察三天后，柴第四天给小绿鼠化合物C有0.5m播l共两次评。途凯.6观察指康针及方法就小鼠的最大匹耐受量倍数暖:按最大耐培受量倍数公愉式计算。合慰.7结果古：章一般情况下妥，动物精神即状态良好，傍灌胃前后无痛明显不良反杯应。语茄.8小鼠的柳最大耐受量松倍数躲谅.9小结森：缺小鼠的最大袭耐受量倍数敬大于100篇倍，化合物纸C治疗高脂予血症安全、忌有效。1.查5化合物C电的长期毒理晓研究不概样品和实验烘动物：样品畏化合物C，蜂实验用SD巨大鼠由河炮南医学实验休动物中心提菠供，体重范哀围:拐60g捐-有75g身。胸内仪器孝：高日立隙7060C券全自动生届化分析仪:塔Ts脸212F宗生物组织唉自动脱水歼机;BM会2VI生文物组织冷冻编包埋机;促Fines帽se325阀石蜡切片前机。继瞎实验方法：共动物按体重唇随机分成姻4炭组,每组习22挎只,雄雌各宽半。试验接店受试物推荐排用量的25敢、50和肚100倍惧,设3逐个剂量组；休另设阴性对炼照组，每天艺上午灌胃一停次，按照1借ml\膏50g司高脂乳剂，煎自由进食饮利水。实验期春间观察动物判形态,每孙周称重,浴记录饲料消燃耗量。喂养欢10d后振,摘眼球尸采血做血常争规及生化指替标测定,惩对肝、肾、絮脾称重,底并取出肝、歉肾、脾、胃盼、肠做病理彼学检查。悄广观察指标：汁动物的一般议表现、体重率。血常规及破生化指标:熟红细胞计轨数、白细胞载计数、血红石蛋白、谷丙经转氨酶、尿券素氮、肌酐谈、胆固醇、年血糖、总蛋路白、白蛋白叼。话重病理解剖:节脏体比、我大体观察及还病理组织检油查挖。机属实验数据统猪计方法崇：高实验数据以室Spss软突件进行单因名素方差分析英。眉浪一般形态观仙察暂：西金银花3衣个剂量组喂疫养的大鼠毛船质白,有芒光泽,外味观形态与阴捞性对照组比盖较无区别,隙也无死亡细现象察。蓝竿动物体重增御长柏：辱试验结束时铃各剂量组体盛重、体重增催重与对照组闯相比无显著礼性差异(p馋>0.0小5)。见表松1这仔血液学检查代结果比较3角个剂量组喂利养大鼠3桑0d后血景红蛋白含量厘、红细胞计吉数、白细胞注计数均正常鹊值范围内毒(P>0.解05)胸纤0翼对大鼠脏体迹比的影响盯各剂量组脆脏体比指标帜与对照组比愈较物显著性庸差异（P>弯0.05）叮歇1勤病理组织学爱检查比较谅大体标本检得查未发生明顶显病变,号因此仅选正粪常对照组及妥高剂量组作蓬组织病理学梁检查。高剂弃量组大鼠的每肝、肾、胃禽、脾、肠发坚片染色后光旱镜检查结果窄未见特异性健病理改变签。己表5病理组盗织学检查比麻较杜雨2翼结论：从总籍体看30d塌喂养试验勇化合物C对坊大鼠生长发柱育无不良影厨响,血常颠规、血清生锋化指标均在基正常值范围碰内,病理篮学检查未见耽特异性病变善。表明无明花显毒性,偿为产品应用膝的安全性提使供实验依据滨。纺1.6药效控学遥评价：化合棵物C能有效饲降低小鼠T剪C、TG、由HDL、L丰DL，并且迟降脂效果非泄常显著，没抚有发现任何竭的毒性作用软，为高效低卵毒类药物，此非常有开发闹价值，根据锯《中药非临企床安全性研荒究概论》要车求，金银花头为药食同源饭类中药，安雷全性高，在婶金银花中提贿取得到的化帆合物C经过数动物毒理学执实验，没有矛发现任何毒宽副作用，所秩以按照有关墨要求，临床资前研究只需匪要急性毒性浩实验和长期掏毒性试验数么据。校2剂量的选岂择情小鼠实验选野择剂量为2孝5mg/k往g,折合人客用量为2.乘77mg/轮kg,按照旨70kg恰的人体重，遵每天服用1悼93.9，弃一天三次每肾次服用64爽.6mg,决(胶囊剂每禽次2粒，每截粒含主药3素2.3m惕g)，服用规剂量合理，艘可以进行临雹床实验。长3乐康脂素质量忠标准起草说形明释3.1逮金银花原料丢质量标准昂[名称]扑金银花。金随银花为忍冬类科植物忍冬浴Lonic踩eraj屠aponi扣caTh置unb.、豪红腺忍冬L遮onice劣rahy床pogla贯ucaM坟iq.、山欢银花Lon孕icera肠conf叉usaD六C.或毛花狡柱忍冬Lo密nicer送adas岩ystyl逝aReh递d.的干燥素花蕾或带初纤开的花。:框我国大部地挑区均产，而醉以山东产量僵最大，河南妄产的质量较雹佳。唉[性状]氏忍科呈棒壤状，上粗下铅细，略弯曲按，长2～威3cm泰，上部直径王约车3mm气，下部直径夏约朋1.5mm济。表面黄白槽色或绿白色锹，贮久色渐猴深，密被短画柔毛。偶见竹叶状苞片。辰花萼绿色，飘先端5裂，菊裂片有毛，卫长约2mm潮。开放者花黎冠筒状，先植端二唇形；潮雄蕊5个，踢附于筒壁，阀黄色；雌蕊喇1个，子房拣无毛。气清肌香，味淡、善微苦。覆[鉴别]强取本品粉末壶0.2g，症加甲醇5辜ml，放置皮12小时，概滤过，滤液删作为供试品康溶液。另取闷化合物C睁对照品，加范甲醇制成每齿1ml含效1mg的条溶液，作为娇对照品溶液贺。照薄层色极谱法（附录泽Ⅵ愿B）试验艘，吸取供试旨品溶液10音～20复μ蝶l，对照欺品没溶液10在μ否l，分别点燕于同一以羧洪甲基纤维素锁钠为黏合剂蚊的硅胶H薄阔层板上，以借醋酸丁酯－晕甲酸－水矮（7:2.僚5:2.5连）的上层溶模液为展开剂各，展开，取拔出，晾干，涉置紫外光灯吼（365n足m）下检破视。供试品哑色谱中，在雪与对照品色锣谱相应的位捷置上，显相夜同颜色的荧柿光斑点。猫[检查]惨按《中国药饿典》（20票05年版一治部附录情Ⅰ拴D）胶囊承项下规定，鼻对本品样品践进行了检查拼，结果符合全规定。拨水分照择水分测定法委（附录口Ⅸ待H第二法钉）测定，不贤得超过12蚁.0%艘总灰分豆不得超过1邮0.0%（闪附录邻Ⅸ界K）邀。通酸不溶性灰歌分不得拐超过3.0颤%（附录各Ⅸ妥K）。勒重金属以及尸有害元素亮照铅、镉员、砷、汞、余铜测定法（握附录特Ⅸ特B原子吸愿收分光光度利法或附录娃Ⅸ醋D电感耦合戚等离子体质浩谱法）测定花，铅、镉、美砷、汞、铜出分别不能超压过千分之五妙、千分之三称、千分之二哄、千分之二喊、百万分之充二十。常[含量测定否]品照高效液相蚁色谱法（附宇录堵Ⅵ检D）测定庆。辩色谱条件与营系统适用性屿试验:用赶十八烷基硅腔烷键合硅胶惧为填充剂；赌乙腈-0.折4％磷酸溶歼液（13：辅87）为流愈动相；检测葵波长为32怒7nm。理词论板数按C斗峰计算不低温于1000奉。爪对照品溶液逢的制备:翠精密称取C舱对照品适量遭，置棕色量初瓶中，加5礼0％甲醇制舟成每1ml休含4调μ火g的溶液，坟即得（10耕℃悟以下保存）介。煎供试品溶液似的制备:伸取本品粉末哈约0.5g娱，精密称定释，置具塞锥绍形瓶中，精戒密加50％霞甲醇50m祝l，称定重钳量，超声处酬理30分钟皂，放冷，再甜称定重量，比用50％甲太醇补足减失石的重量，摇售匀，滤过，善精密量取续凯滤液5ml蝴，置25m促l棕色量瓶式中，加50肤％甲醇至刻蕉度，摇匀，繁即得。灯测定法:歇分别精密吸骑取对照品溶婶液与供试品桥溶液各5～社10东μ薯l，注入液罚相色谱仪，挥测定，即得协。善本品含C（描C16H1开8O9）不迅得少于1.巨5％。轻[原料药材玩]坊金银花：上阴述鉴别方法廊是采用薄层疾色谱法，将侍原料药材与掘金银花对照时药材进行展滨开，显色对拾比。若斑点准颜色相同，支展开位置相吊同，则原料裙药材合格。醉3.2场质量标准惜1名称、汉码语拼音模康脂素K就ANGZ哨HISU李本品主要成杯分是金银花道提取分离化翻合物，有调宿血脂之功效江。提取得到悲化合物C具奖有降血脂作录用，是本品臂的主药，根侵据其英文名瞒Kang按lipid馅，译为康脂嚼素。毒2制法晓：遇金银花的提驰取分离工艺芳见下述产品荒质量标准部炸分隔2.1携仪器、试剂返与试药吧紫外分光光育度计；型号拜:TU宇—评1800S帆；北京普析丛通用仪器公罚司电子分析斑天平型号:那AE240套（梅特勒业—队托利多集团泪）；C对照挥品（河南大津学天然药物肢化学研究所络提供）晒2.2煎煮帆条件筛选屈金银花采腿用水煎煮、西浓缩的生产哈工艺,我苍们对此煎煮指条件进行筛说选。挺2.3二因海素和水平选全择药材系采用水煎煮膝,工艺中纲主要影响因察素为煎煮次义数、煎煮时辱间、加水量渐,根据中洁药生产的常题规方法,童其一般煎煮篇次数为1～画3次,滴即1次汗、2次、竟3次,胜煎煮时间为辫0.5小时覆、1小时、防2小时,封加醇量为2帖0%、40档%、60%斗。按照统计定学中正交试予验方法,众我们采用L绕3的正交屿试验设计方神案进行试验唯。慧表滴1为煎煮工艺因顿素水平枯水平怒A烘定慎课B奋石C芝地翅D插煮次数(次池)史煎煮时间(醉小时撒)淘加水量您空项棚尽1劲仗1写动0.乔5额炉20弓倍谜-咬2微扰2筛毙1紫捕辣40府倍逮-址3若均3翅罚2柏谱择60爱倍汽-脑2.4检测跃指标:金银鸣花主要有效乱成分为总黄颜酮,总黄乞酮的测定以懂化合物C为倡指标,测觉定煎煮浓缩蜘后清膏的含君量,以考猾察药物中有利效成分C的赶提取率。岂2.5化合音物C的测定优(依照上述腿含量测定)龄表邪2到煎煮工艺正震交试验结果输编亭桨副犬因东素股点沃译评价指标纤号属镜A吼瓶B席捎C俗抄D糕化合篮物C含量灵煎煮次数风煎煮时间救加水量酸空白项算芬(蜻mg/g)免1原面济1羡津1蝶2爽0轧1糖役封138.躺7启2侄虚1叙签哥2狗宗40脖乳2肤革139侄.8壤3唉归1恳盲3衡征60背突3队侨被138.8裕4眨粪2捐贪1逼记20锁止