3 核酸提取液技术要求

******生物科技有限公司******BiomedicalTechnologyCo.,Ltd.核酸提取液产品技术要求第第页核酸提取液产品技术要求******生物科技有限公司医疗器械产品技术要求编号：核酸提取液1产品型号/规格及其划分情况说明产品型号、规格及组成产品型号核酸提取液（磁珠法）-AW1核酸提取液（磁珠法）-AW2核酸提取液（磁珠法）-AW3核酸提取液（磁珠法）-AW4核酸提取液（磁珠法）-AW5规格4人份/盒、8人份/盒、16人份/盒、32人份/盒、48人份/盒、64人份/盒、96人份/盒32人份/盒、48人份/盒、64人份/盒、96人份/盒4人份/盒、8人份/盒、16人份/盒、32人份/盒、48人份/盒、64人份/盒、96人份/盒32人份/盒、48人份/盒、64人份/盒、96人份/盒192人份/盒组成由密封的预分装96孔板及其内存试剂裂解液A、洗涤液A、磁珠、洗涤液A-I、洗脱液组成。由密封的预分装96孔板及其内存试剂裂解液B、洗涤液B、磁珠、洗涤液B-I、洗脱液组成。由蛋白酶K、密封的预分装96孔板及其内存试剂裂解液A、洗涤液A、磁珠、洗涤液A-I、洗脱液组成。由蛋白酶K、密封的预分装96孔板和裂解液B、洗涤液B、磁珠、洗涤液B-I、洗脱液组成。由裂解液C、洗涤液C、洗涤液C-I、磁珠、洗脱液独立分装组成。1.2核酸提取试剂盒(磁珠法)属于第一类医疗器械产品目录中的6840体外诊断试剂分类子目录I-2样本处理用产品核酸提取或纯化试剂。2性能指标2.1外观和性状①试剂盒各组分应齐全、完整、液体无渗漏；②包装标签应清晰、准确、牢固。2.2准确度对阳性核酸参考品的测定结果应为阳性，对阴性核酸参考品的测定应为阴性。2.3精密度批内精密度应符合Ct值的变异系数(CV,%)≦5%2.4干扰物质当样品中甘油三酯浓度≦300mg/dL，胆红素浓度≦10mg/dL，血红蛋白浓度≦200mg/dL，总蛋白≦10g/dL,IgG≦1g/dL浓度时，测试结果的干扰偏差应在±10%范围内。2.5稳定性取到效期后的样品检测其准确度、精密度、干扰物质，应分别符合2.2、2.3、2.4的要求。2.6装量（核酸提取液（磁珠法）-AW5）2.6.1该型号产品的每种组分装量应符合下表要求裂解液C洗涤液C洗涤液C-I浓缩磁珠或非浓缩磁珠洗脱液≧120ml/瓶≧120ml/瓶≧120ml/瓶≧3ml/瓶或≧40ml/瓶≧16ml/瓶3.检验方法3.1外观和性状在自然光线下以矫正视力目视检查，应符合2.1的要求。3.2准确度用试剂盒对核酸参考品进行测定，检测结果应符合2.2的要求。3.3精密度用试剂盒对核酸参考品重复检测10次，记10次测量结果的平均值M和标准差SD，根据如下公式得出变异系数(CV)，结果应符合2.3的要求。CV=SD/M×100%式中：CV——变异系数；SD——10次测量结果Ct值的标准差；M——10次测量结果Ct值的平均值。3.4干扰物质使用生理盐水（浓度为0.9%的NaCl溶液）制备高浓度g甘油三酯母液，取阳性核酸参考品，平均分成两组。向其中一组样本中分别添加甘油三酯母液，配制为含300mg/dL甘油三酯的干扰样本；向另一组样本中分别添加相同体积的生理盐水作为对照样本。使用0.1mol/L的NaOH溶液制备高浓度的胆红素母液。取阳性核酸参考品，平均分成两组。向其中一组样本中分别添加胆红素母液，配制为含10mg/dL胆红素的干扰样本；向另一组样本中分别添加相同体积的0.1mol/L的NaOH溶液作为对照样本。使用生理盐水（浓度为0.9%的NaCl溶液）制备高浓度血红蛋白母液，取阳性核酸参考品，平均分成两组。向其中一组样本中分别添加血红蛋白母液，配制为含200mg/dL血红蛋白的干扰样本；向另一组样本中分别添加相同体积的生理盐水作为对照样本。取阳性核酸参考品，平均分成两组。向其中一组样本中添加BSA(体积忽略不计)，配制成10g/dL总蛋白的干扰样本；另一组作为对照样本。使用PBS缓冲液（浓度为0.01mol/L，pH为7.2～7.4）制备高浓度IgG母液。取阳性核酸参考品，平均分成两组。向其中一组样本中添加IgG母液，配制成1g/dLIgG的干扰样本；向另一组样本中分别添加相同体积的PBS缓冲液（浓度为0.01mol/L，pH为7.2～7.4）作为对照样本。对干扰样本和对照样本各重复测试3次。以干扰样本的测试均值结果记为M，以对照样本的测试均值结果记为T，根据如下公式计算相对偏差B，结果应符合2.4的要求。B=(M-T)/T×100%式中：B——相对偏差；M——干扰样本浓度的Ct值；T——对照样本浓度的Ct值。3.5稳定性取到有效期后的试剂盒样品，按照3.2、3.3、3.4的方法进行检测，应符合2.5的要求。3.6装量（核酸提取液（磁珠法）-AW5）3.6.1将瓶装内各组分试剂分别倒入量筒内，平视量筒内凹液面所处刻度值，要求符合2.6.1要求。4.术语4.1阈值循环数Ct（Cp）cyclethreshold,crossingpoint实时检测扩增过程中，反应管内的荧光信号到达指数扩增时经历的循环周期数。主要的计算方式是以扩增过程前3到15个循环的荧光值的10倍标准差为阈值，当荧光值超过阈值时的循环数则为阈值循环数（Ct）。4.2实时荧光PCRreal-t