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文档简介
邻二氮菲吸光光度法测定铁第1页,共15页,2023年,2月20日,星期四实验目的1.掌握吸光光度法测定微量铁的原理及方法2.掌握分光光度计的使用方法第2页,共15页,2023年,2月20日,星期四实验原理
Fe2+与邻二氮菲形成稳定的有色配合物,通过测定吸光度测定亚铁离子含量吸光光度法原理:
A=Kbc(Lambert-Beer定律)
A:吸光度K:比例常数(ε或a)
b:液层厚度(光程长度,cm)c:溶液的浓度
第3页,共15页,2023年,2月20日,星期四吸收曲线邻二氮菲-Fe2+配合物吸收蓝绿色光显示橙红色510A/nm与浓度无关作为测定波长,此时灵敏度高max第4页,共15页,2023年,2月20日,星期四A(g·mL-1)(Fe3+)(g·mL-1)A试液铁含量测定第5页,共15页,2023年,2月20日,星期四实验内容:配制铁-邻二氮菲水溶液。绘制吸收曲线,选择测量波长。按教材上的要求,两人一组配制溶液,注意溶液加入顺序不能乱。波长选择:先粗选(480~540nm间隔10nm),再细选(最大吸收峰附近,间隔5nm)第6页,共15页,2023年,2月20日,星期四3.标准曲线的绘制配制六个不同浓度的铁标准溶液,在最大吸收波长处分别测定吸光度,绘制标准曲线。根据标准吸收曲线,测定试样中含铁量。共有2个未知样品,选择其中一个,取10.0mL,标明样品号,每人做一份。因此,两人共配8份溶液。第7页,共15页,2023年,2月20日,星期四注意:(1)每个容量瓶上贴标签,标序号;(2)溶液加入顺序不要乱!!!(3)吸量管各种规格每实验台配一套,每班十套。(4)提供20μg/mL铁标准溶液,直接按1(5)配制成不同浓度溶液,选择加4.0mL铁标准溶液的溶液做吸收曲线和选波长,不必按1(1)单独配溶液。第8页,共15页,2023年,2月20日,星期四再次明确实验任务配制一系列Fe-邻二氮菲溶液选其中一个溶液做吸收曲线,选最大波长在选定波长下做不同浓度溶液的标准曲线利用标准曲线,测未知液浓度第9页,共15页,2023年,2月20日,星期四光度计使用
光度计使用见发放材料第10页,共15页,2023年,2月20日,星期四SP2000型分光光度计第11页,共15页,2023年,2月20日,星期四比色皿
两端为毛玻璃,样品量为2/3第12页,共15页,2023年,2月20日,星期四实验记录格式表3-32和表3-36第13页,共15页,2023年,2月20日,星期四数据处理Excel画图后打印或坐标纸画图第14页,共15页,2023年,2月20日,星期四下周实验实验十一三草酸合铁(I
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