血清学检验技术-沉淀试验（动物疫病检验技术）

沉淀试验概述01沉淀试验概念沉淀试验概念沉淀试验是指可溶性抗原（如细菌的外毒素、内毒素、菌体裂解液、病毒的可溶性抗原、血清、组织渗出液等）与相应抗体结合，在适当量电解质存在下，经过一段时间，形成肉眼可见的白色沉淀。试验反应中的抗原称为沉淀原，抗体为沉淀素。02沉淀试验的分类沉淀试验的类型

沉淀反应液相沉淀试验固相沉淀试验环状沉淀试验絮状沉淀试验琼脂扩散试验免疫电泳试验

沉淀反应液相沉淀试验固相沉淀试验环状沉淀试验絮状沉淀试验琼脂扩散试验免疫电泳试验环状沉淀试验方法：在小口径试管中进行。原理：试管内，下层沉淀素和上层沉淀原在液界面应形成白色沉淀环。本试验常用做抗原定性，如炭疽的诊断（Ascoli氏试验）、鉴别血迹等。沉淀试验的类型絮状沉淀试验方法：试管或凹玻片中进行。原理：将抗原与相应抗体在试管内或凹玻片上混匀，在电解质存在的情况下，抗原抗体复合物形成肉眼可见的絮状沉淀物。本试验常用毒素与抗毒素的滴定，如诊断梅毒的康氏反应。沉淀试验的类型利用可溶性抗原与抗体在半固体琼脂内进行扩散，若抗原与抗体对应，并且比例适当，就会出现白色沉淀线，此为阳性反应。分为单向琼脂扩散试验和双向琼脂扩散试验两类。琼脂扩散试验沉淀试验的类型单向琼脂扩散试验本试验主要用于检测标本中各种免疫球蛋白和血清中各种补体成分的含量，敏感性很高。沉淀试验的类型双向琼脂扩散试验本法主要是用于检测血清中各种免疫球蛋白、甲胎蛋白、乙肝表面抗原等。缺点是需要时间过长，灵敏度不高。沉淀试验的类型将琼脂内电泳和凝胶内沉淀反应相结合。具有分辨率高，灵敏度高，时间短，是很理想的分离和鉴定蛋白质混合物的方法。用于抗原、抗体定性及纯度的测定。临床上常见的是对流免疫电泳和火箭免疫电泳。免疫电泳技术沉淀试验的类型对流免疫电泳本法比琼脂扩散法的灵敏度要高10～16倍，而且反应时间短，可用于各种蛋白的定性和半定量测定。沉淀试验的类型火箭免疫电泳当抗原与抗体分子达到适当比例时，形成一个形状如火箭的不溶性免疫复合物沉淀峰，峰的高度与捡样中的抗原浓度呈正相关。1、2、3、4为标准抗原；5、6为标本抗原沉淀试验的类型禽流感琼脂扩散试验01禽流感概述禽流感概述禽流感病毒属于甲型流感病毒，根据禽流感病毒对鸡和火鸡的致病性的不同，分为高、中、低/非致病性三级。禽流感概述禽流感病毒感染鸡禽流感病毒感染人禽流感概述人感染禽流感有接触史人类预防禽流感02禽流感琼脂扩散试验禽流感琼脂扩散试验试验目的掌握琼脂扩散试验的操作和判定标准。明确此试验在生产中的应用。禽流感琼脂扩散试验试验原理将可溶性抗原与相应抗体分别加入琼脂板上相对应的孔内，两者相互扩散，在比例适宜处形成沉淀线。禽流感琼脂扩散试验试验仪器及材料温箱、琼脂平板、琼脂打孔器、生理盐水、禽流感琼脂扩散抗原、禽流感标准阳性血清、被检血清、pH7.2、0.01mol/LPBS。1423琼脂板的制备试验操作方法试验结果判定试验注意事项试验方法禽流感琼脂扩散试验琼脂板的制备称取琼脂糖1.0g，加到100mLpH7.2、0.01mol/LPBS中，在水浴中煮沸或用电炉煮沸充分融化加入8g氯化钠，充分溶解后加1%硫柳汞溶液lmL。禽流感琼脂扩散试验禽流感琼脂扩散试验试验操作方法——打孔禽流感琼脂扩散试验试验操作方法——封底禽流感琼脂扩散试验试验操作方法——加样禽流感琼脂扩散试验试验操作方法——反应将琼脂板置于日光灯或侧强光下观察，若标准阳性血清与抗原孔之间出现一条清晰的白色沉淀线，则试验成立。禽流感琼脂扩散试验试验结果判定1试验注意事项加样时，注意不要将琼脂划破，以免影响沉淀线的形状。23反应时间要适宜。时间过长，沉淀线可解离至假阴性；时间过短，则沉淀线不出现。加样时抗体、阳性血清及待测标本应各用一支加样器，以免混淆，影响实验结果。禽流感琼脂扩散试验炭疽环状沉淀试验01炭疽概述炭疽概述炭疽杆菌炭疽杆菌（Bacillusanthraci）属于芽孢杆菌属，是引起某些家畜、野兽和人类炭疽病（人畜共患）的病原菌。02炭疽环状沉淀试验炭疽环状沉淀试验试验目的掌握炭疽环状沉淀试验的操作和判定标准。明确此试验在生产中的应用。炭疽环状沉淀试验试验原理抗原抗体交界面形成白色沉淀环。。炭疽环状沉淀试验试验仪器及材料沉淀试验用小试管、毛细吸管、漏斗、滤纸、乳钵、剪刀、微量加样器(带滴头)、生理盐水、0.5%石炭酸生理盐水、炭疽沉淀素血清、炭疽标准抗原、疑似被检材料（脾、皮张等）。1423被检抗原的制备试验操作方法试验结果判定试验注意事项试验方法炭疽环状沉淀试验被检抗原的制备热浸出法冷浸出法炭疽环状沉淀试验炭疽环状沉淀试验被检抗原的制备先用毛细吸管在小试管底部加1/3试管的炭疽沉淀素血清；倾斜小试管；再用毛细吸管沿小试管璧缓慢加入1/3试管的可溶性被检抗原；静置，5-10min内判定结果。小试管重叠的两液界面出现白色沉淀环，为阳性反应。结果判定炭疽环状沉淀试验1试验注意事