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文档简介
组织培养常见问题
—玻璃化目录01玻璃化的概念02玻璃化的症状03玻璃化的影响因素04玻璃化的预防措施一、玻璃化的概念当植物材料不断地进行离体繁殖时,有些培养物的嫩茎、叶片往往会呈半透明水渍状,这种现象通常成为玻璃化(也称为超水化现象)。
发生玻璃化的试管苗称为玻璃化苗。以上图片均来自网络。二、玻璃化的症状
1、生长异常,叶、嫩梢呈透明或半透明的水渍状,整株矮小肿胀,失绿;2、茎叶表面物蜡质层,无功能性气孔,叶片皱缩成纵向卷曲,脆弱易碎;3、组织发育不全或畸形4、植株体内含水量高,干物质含量低5、试管苗生长缓慢,分化能力下降,难以诱导生根以上图片均来自网络。三、玻璃化的影响因素1、材料的差异性的影响。
在不同的种类、品种间,组培苗的玻璃化程度有所差异。草本花卉和幼嫩组织相对容易发生玻璃化。对容易发生玻璃化的植物材料如果长时间浸泡在水中,则玻璃化程度尤其严重。以上图片均来自网络。三、玻璃化的影响因素2、激素水平过高。
若细胞分裂素浓度过高,易引起玻璃化现象。在组培过程中造成细胞分裂素过高的原因主要有以下几种:一、培养基中一次性加入细胞分裂素过多;二、细胞分裂素与生长素的比例失调,植物吸收过多细胞分裂素;三、多次继代引起细胞分裂素累加效应,玻璃化苗发生比例增大。三、玻璃化的影响因素3、培养基成分的影响。
培养基中无机离子种类、浓度及其比例不适宜该种植物。4、琼脂用量低。
培养基中琼脂含量低时,玻璃化苗比例增加,水渍状严重,苗只向上生长。三、玻璃化的影响因素5、温度要适宜。
过高、过低或者忽高忽低的温度都容易形成玻璃化苗。6、光照。
光照不足加上高温很容易引起玻璃化,增加光照可促进光合作用,提高碳水化合物的含量,使玻璃化比例下降。。三、玻璃化的影响因素7、通气性。
试管苗生长期间要求气体交换充分、良好。气体交换的好坏取决于生长量、瓶内空间、培养时间和瓶盖的种类。生长过快、容积小、培养时间长则容易导致玻璃化。如何防止玻璃化?四、玻璃化的预防措施1、尽量选用玻璃化轻或者无玻璃化的材料;2、降低细胞分裂素和赤霉素浓度。
适当增加培养基中无机盐的含量,降低铵钛氮浓度,提高硝态氮浓度;四、玻璃化的预防措施3、利用固体培养基
增加琼脂浓度,降低培养基水势,造成细胞吸水阻遏;4、控制温度
适当降低温度,避免过高培养温度;四、玻璃化的预防措施5、增加自然光强
适当延长光照时间。实验发现,玻璃苗放在自然光下几天后,茎叶变红,玻璃化逐渐减弱。因为自然光中有紫外线,能够加快木质化;四、玻璃化的预防措施7、在培养基中添加少量聚乙烯醇(PVA)、活性炭、间苯三酚等物质,能够在一定程度上减轻玻璃化的现象发生。6、使用透气性好的封口材料。
如牛皮纸、棉塞、滤纸、封口纸等,尽可能降低培养容器内空气湿度,加强气体交换;玻璃化现象只是植株的一种表型特征
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