酶工程与蛋白质工程-蛋白质工程的研究方法（动物生物技术）_第1页
酶工程与蛋白质工程-蛋白质工程的研究方法（动物生物技术）_第2页
酶工程与蛋白质工程-蛋白质工程的研究方法（动物生物技术）_第3页
酶工程与蛋白质工程-蛋白质工程的研究方法（动物生物技术）_第4页
酶工程与蛋白质工程-蛋白质工程的研究方法（动物生物技术）_第5页
已阅读5页，还剩13页未读， 继续免费阅读

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

动物生物技术3.蛋白质工程的研究方法第一章蛋白质工程的基本途径蛋白质工程的研究策略1.蛋白质工程的基本途径

从预期功能出发，设计期望的结构，合成目的基因且有效克隆表达或通过诱变、定向修饰和改造等一系列工序，合成新型优良蛋白质。第二章蛋白质工程的主要研究手段

蛋白质工程的主要研究手段

第三章蛋白质工程的研究策略策略1：对天然蛋白质进行改造。研究策略策略2：完全重建一个新的蛋白质。蛋白质的全新设计（1）设计目标的选择研究重点和难点从结构设计出发，从蛋白质的二级结构开始，以摸索蛋白质结构的稳定性。

蛋白质全新设计功能设计、结构设计。（2）蛋白质全新设计思路

是否存在蛋白质多聚体状态；二级结构与预期目标是否吻合。是否具有预定的三级结构。圆二色谱和核磁共振技术可用于研究蛋白质。是否以单分子或多聚体形式存在。三级结构测定目前主要依靠荧光和核磁共振技术。蛋白质的全新设计

天然的锌指多肽FSD-1多肽(从头设计)蛋白质的全新设计改变现有蛋白质的结构

分离纯化目标蛋白质。分析目标蛋白质的一级结构；分析目标蛋白质的三维结构以及结构与功能的关系。根据蛋白质的一级结构设计引物，克隆目的基因。根据蛋白质的三维结构和结构与功能的关系以及蛋白质改造的目的设计改造方案。对目的基因进行人工定点突变。改造后的基因在宿主细胞中表达。分离纯化表达的蛋白质并分析其功能，评价是否达到设计目的。维生素发酵生产我国用两步法发酵工艺生产维生素C。定点突变是目前蛋白质工程研究的主要技术手段。

基因人工定点突变改变蛋白质结构

M13载体法PCR扩增法蛋白质工程的研究策略(1）M13载体法

该法的原理是利用人工合成带突变位点的寡聚核苷酸作为引物，利用M13噬菌体载体系统合成突变基因。蛋白质工程的研究策略M13载体蛋白质工程的研究策略

M13载体法基因人工定点突变示意图（引自吴乃虎，1998）(2）ＰＣＲ扩增法

该法的原理也是利用人工合成带突变位点的诱变引物，通过ＰＣＲ扩增而获得定点突变的基因。PCR定点诱变法可分为重组PCR定点诱变法和大引物诱变法两种。一、深层发酵的操作方式蛋白质工程的研究策略

重组PCR定点突变法示意图（引自吴乃虎，

人人文库> 全部分类> 行业资料 > 农林牧渔

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论