浅论PIK3CA在宫颈上皮内瘤变和宫颈鳞癌中的表达

浅论PIK3CA在宫颈上皮内瘤变和宫颈鳞癌中的表达【摘要】目的探讨PIK3CA在宫颈上皮内瘤变和宫颈鳞癌中的表达及其临床病理意义。方法应用免疫组化的方法检测10例LSIL，30例HSIL，50例SCC石蜡标本中PIK3CA蛋白的表达水平，比较各组间的差别及与患者临床病理特征的关系。结果①PIK3CA在LSIL和HSIL的阳性率分别是20%和%，差异有显着性andsquamouscellcarcinomasoftheuterinecervix.MethodsWeassessedtheexpressionofPIK3CAbyimmunohistochemistryin10LSIL，30HSIL，and50cervicalSCC,andcorrelatedthesefindingswithvariousclinicopathologicalvariables.Results①PIK3CAwasoverexpressedin20%ofLSILand%ofHSIL.PIK3CAexpressioninHSILwassignificantlyhigherthantheexpressioninLSIL(P=).②PIK3CAexpressionishighlyprevalentincervicalcarcinoma，with76%ofcervicalSCCPIK3CApositive,butnosignificantassociationswerefoundbetweenPIK3CAover-expressionandclinicopathologicalvariables.Conclusions①PIK3CAexpressionincreasedsignificantlyduringthetransitionfromLSILtoHSIL,suggestingthatPIK3CAoverexpressionisanearlyeventduringmalignanttransformationintheuterinecervixandPIK3CAmayplayaroleincervicalSCCdevelopment.②PIK3CAisnotnecessaryintheprogressionofcervicalSCCtoametastaticphenotype.

Keywords：PIK3CA;SIL;cervicalSCC

宫颈癌是全球妇女常见的恶性肿瘤，其中尤以鳞癌为最多见，近年来宫颈癌已占我国妇女因癌死亡的第二位。流行病学研究显示,宫颈癌的发生与人乳头瘤病毒(HPV)感染关系密切。生育期妇女中HPV感染非常普遍,然而只有一小部分妇女发生宫颈癌,因此,除了HPV感染以外，宫颈癌的发生还存在其他的必要因素。与其他肿瘤一样,宫颈癌的发生也被认为是与癌基因激活或抑癌基因失活有关的多步骤的发展过程［1］。PIK3CA编码磷脂酰肌醇3-激酶30例，及因子宫肌瘤切除的正常宫颈组织对照标本10例。

PIK3CA蛋白检测

免疫组化试剂兔抗人PI3Kp110α单克隆抗体、即用型PV-9000二步法免疫组化检测试剂盒、浓缩型DAB试剂盒、PBS磷酸盐缓冲液、枸橼酸盐缓冲液均购自北京中杉金桥生物技术有限公司。

免疫组化染色采用免疫组织化学PV-9000二步法。用已知PIK3CA蛋白阳性的乳腺癌作阳性对照，用PBS代替一抗作阴性对照。试验步骤严格按试剂盒说明书进行。

免疫组化结果判定观察结果采用双盲法。p110α蛋白阳性染色位于胞浆。高倍镜下随机选5个视野,结合阳性细胞百分率和染色强度进行半定量分级。染色强度判定标准如下:胞浆内无着色为0分,淡黄色为1分,棕黄色为2分,棕褐色为3分;阳性细胞百分率判定:无阳性细胞为0分，阳性细胞百分率10%为1分,10%～50%为2分,50%～80%为3分，80%为4分。两项结果相乘得0分者为阴性，3分为弱阳性,4～8分为中度阳性,9～12分为强阳性。为便于统计分析，阴性和弱阳性者统一判为阴性，中度阳性和强阳性统一判为阳性。每一切片均有2名医师进行评分。

统计学分析

应用SPSS13.0软件进行数据处理,各组织间p110α表达的阳性率比较及其与宫颈癌患者临床病例特征的关系采用Fishers精确概率法、χ2检验或作连续性校正。

2结果

宫颈鳞癌及宫颈上皮内瘤变中PIK3CA蛋白的表达

PIK3CA蛋白在各组织中表达情况见图1。PIK3CA蛋白在宫颈鳞癌组织中高表达，38例宫颈鳞癌p110α阳性，呈现中至强度染色。在宫颈上皮内瘤变组织中，19例HSIL显示p110α阳性，而仅有2例LSILp110α阳性，其余8例无着色或轻微着色，两组间差异有统计学意义正常宫颈上皮中度着色。

图1PIK3CA蛋白在各组织中表达

PIK3CA蛋白表达与宫颈鳞癌患者临床病理特征之间的关系

表1PIK3CA在宫颈鳞癌中表达的临床病理意义

a.χ2检验，b.连续性校正

中低分化的宫颈鳞癌p110α阳性表达率高于分化好的肿瘤，这似乎说明p110α高表达与宫颈鳞癌的分化程度存在某种关联，然而统计分析显示两组之间的差别没有显着性意义。p110α的高表达与宫颈鳞癌患者的其他临床病理特征也无显着性关联。

3讨论

宫颈癌是全球妇女第二大常见的恶性肿瘤,全世界每年大约有23万妇女死于这种疾病，而仅在我国就达到8万。众多流行病学和实验室研究表明,宫颈癌的发生与HPV感染关系密切,尤其是高危型HPV感染。然而只有一小部分妇女发生宫颈上皮内瘤样病变(SIL),发展到浸润性癌的就更少了,因此HPV感染并不是独立致病因素，进一步认识其他的基因分子事件是我们认识宫颈癌发生发展的关键。

3号染色体长臂的扩增是宫颈鳞癌中最常存在的基因改变［8-10］,并与宫颈不典型增生演化为侵袭性癌［11］以及宫颈鳞癌的淋巴结转移有关［12］,PIK3CA是定位于3号染色体的癌基因,其编码IA类磷脂酰肌醇3-激酶明显比LSIL组高。这说明PIK3CA高表达是宫颈鳞癌形成过程中的早期事件,参与宫颈癌变过程，PIK3CA表达增高意味着低级别宫颈病变患者的恶化风险增强，因此PIK3CA可能是预测LSIL高危风险敏感的生物学指标。GOTO等［15］以宫颈液基细胞学标本为研究对象证实PIK3CA对于鉴别癌前病变中的重度不典型增生比p16INK4a和Ki-67有更高的特异性，这有利于弥补常规宫颈涂片和HPV筛查的缺陷，因而具有重要的临床诊断价值。我们还发现，p110α的高表达与宫颈鳞癌患者的临床病理特征无显着性关联，因而p110α可能并不是宫颈鳞癌转移浸润表型形成的必需因子。

综上所述,我们的试验结果表明，PIK3CA过度表达可能激活PI3K/Akt信号传导途径,参与宫颈癌变过程,因此,PIK3CA有可能成为宫颈癌早期筛查的指标，抑制PI3K/Akt通路有可能成为宫颈癌治疗新靶点。

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