生物安全病原微生物学课程的

生物安全病原微生物学课程的第一页，共四十一页，编辑于2023年，星期日A

ControversialIssue20世纪70年代初,“基因工程”的淘金时代。但部分与微生物打交道的研究人员开始担心超级细菌等生物问题的出现。媒体宣扬，反对“基因工程”的风潮。1974年，担忧达到高潮。包括多名诺贝尔奖得主在内的一批科学家在《自然》杂志上撰文，呼吁在认真研究基因工程风险之前，停止相关的研究工作。第二页，共四十一页，编辑于2023年，星期日生物安全Biosafety基于生物技术发展有可能带来的不利影响，人们提出了生物安全的概念。生物安全（biosafety）是指避免危险生物因子造成实验室人员伤害，或避免危险生物因子污染环境、危害公众的措施。第三页，共四十一页，编辑于2023年，星期日病原微生物危害程度分类科学家将实验室中所用的微生物，根据危险程度，划分为了不同级别。《病原微生物实验室生物安全管理条例》（国务院令第424号）第七条

：国家根据病原微生物的传染性、感染后对个体或者群体的危害程度，将病原微生物分为四类

第四页，共四十一页，编辑于2023年，星期日第一类病原微生物，是指能够引起人类或者动物非常严重疾病的微生物，以及我国尚未发现或者已经宣布消灭的微生物。

主要包括29种病毒，如克里米亚-刚果出血热病毒、埃博拉病毒、马尔堡病毒、天花病毒和猴痘病毒等。目前无疫苗可预防。高致病性病原微生物第二类病原微生物，是指能够引起人类或者动物严重疾病，比较容易直接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间传播的微生物。

包括51种病毒，朊粒，10种细菌，4种真菌。例如：高致病性禽流感病毒、艾滋病毒、SARS冠状病毒、细菌中的炭疽芽胞杆菌、结核分枝杆菌、霍乱弧菌等；真菌中的粗球孢子菌等。部分已有疫苗可用第五页，共四十一页，编辑于2023年，星期日如肠道病毒、肝炎病毒、流感病毒等75种病毒；金黄色葡萄球菌等145种细菌；白假丝酵母菌、新生隐球菌、马内菲青霉菌等真菌对人类致病的常见微生物主要属于第三类微生物第三类病原微生物，是指能够引起人类或者动物疾病，但一般情况下对人、动物或者环境不构成严重危害，传播风险有限，实验室感染后很少引起严重疾病，并且具备有效治疗和预防措施的微生物。

第六页，共四十一页，编辑于2023年，星期日第四类病原微生物第四类病原微生物，是指在通常情况下不会引起人类或者动物疾病的微生物。

如大肠埃希菌，其生物学性状已清楚第七页，共四十一页，编辑于2023年，星期日摘自《人间传染的病原微生物名录》

表1：病毒分类名录

序号病毒名称危害程度分类实验活动所需生物安全实验室级别运输包装分类f备注病毒培养a动物感染实验b未经培养的感染材料的操作c灭活材料的操作d无感染性材料的操作eA/BUN编号英文名中文名分类学地位1Alastrimvirus类天花病毒痘病毒科

ABSL-4BSL-3BSL-2BSL-1AUN2814

3Easternequineencephalitisvirus东方马脑炎病毒披膜病毒科BSL-3ABSL-3BSL-3BSL-2BSL-1AUN2814仅培养物A类4Ebolavirus埃博拉病毒丝状病毒科BSL-4ABSL-4BSL-3BS-2BSL-1AUN2814

42Hantavirusescausehemorrhagicfeverwithrenalsyndrome引起肾综合征出血热的汉坦病毒布尼亚病毒科BSL-2ABSL-3BSL-2BSL-1BSL-1AUN2814有疫苗。仅病毒培养物为A类第八页，共四十一页，编辑于2023年，星期日与致病微生物接触就存在安全问题

1974年丹麦某医院临床生化实验室的工作人员体检时发现肝炎发病率比普通人群高出7倍。1976年英国某医学实验室的工作人员体检时发现结核菌感染者比其他人群高5倍。1978年英国报告一个商业洗衣房因清洗来自一实验室的衣裤时发生6例雇员和1例参观者感染。据统计，从事病原微生物研究的工作人员发生实验室感染的概率较普通人群高5~7倍。第九页，共四十一页，编辑于2023年，星期日严重生物安全事故案例2003年9月新加坡实验室人员感染SARS病毒2003年9月台湾实验室人员感染SARS病毒2004年4月我国国家CDC的SARS实验室研究生感染SARS病毒并传染给别人2011年3月至5月东北农业大学的28名师生相继被确诊感染了布鲁氏菌病实验室生物安全必须引起高度重视第十页，共四十一页，编辑于2023年，星期日实验室生物安全当实验室工作人员所处理的实验对象含有致病的微生物及其毒素时，通过

1.实验室的设计建造（二级屏障）：主要为实验室气流控制及灭菌设施

2.使用个体防护装置（一级屏障）：生物安全柜和实验服(或正压防护服)

3.严格遵从标准化的工作及操作程序等综合措施:（1）确保实验室工作人员不受实验对象侵染。（2）确保周围环境不受其污染。第十一页，共四十一页，编辑于2023年，星期日生物安全实验室的分类生物安全实验室应用于涉及具有传染可能性的微生物实验。仅从事体外操作的实验室的相应生物安全防护水平：BSL-1、BSL-2、BSL-3、BSL-4（bio-safetylevel，BSL）从事动物活体操作的实验室的相应生物安全防护水平：ABSL-1、ABSL-2、ABSL-3、ABSL-4（animalbio-safetylevel，ABSL）第十二页，共四十一页，编辑于2023年，星期日生物安全实验室的分类其它两种表达方式：physicalprotectionlaboratory:P1、P2、P3、P4containmentlaboratory：C1、C2、C3、C4或CL1、CL2、CL3、CL4第十三页，共四十一页，编辑于2023年，星期日P1、P2实验室14第十四页，共四十一页，编辑于2023年，星期日15第十五页，共四十一页，编辑于2023年，星期日生物危险警告标志16第十六页，共四十一页，编辑于2023年，星期日第十七页，共四十一页，编辑于2023年，星期日P3、P4实验室18第十八页，共四十一页，编辑于2023年，星期日Ⅲ级生物安全柜

（classⅢbiosafetycabinet）安全柜内保持负压，气流只能从外部进入安全柜，使柜内的病源微生物不能逸出，从而保护工作者同时其循环风和排风经过高效过滤器(HEPA)过滤，又能保护产品和环境。第十九页，共四十一页，编辑于2023年，星期日20第二十页，共四十一页，编辑于2023年，星期日TheSwedishBSL-4Laboratory第二十一页，共四十一页，编辑于2023年，星期日最高防护实验室——P4实验室三级生物安全水平的防护实验室的要求也适用于四级生物安全水平的最高防护实验室，但需增加如下几点：1.基本防护：P4实验室分为III级安全柜型和正压服型两种前者指实验室中所有微生物操作均在Ⅲ级生物安全柜中进行；后一种实验室中的工作人员必须穿着正压服，并有完备的生命支持系统，生物安全柜可采用Ⅱ级。第二十二页，共四十一页，编辑于2023年，星期日最高防护实验室——P4实验室2.进入控制：四级生物安全水平的最高防护实验室必须位于独立的建筑内，或是在一个安全可靠的建筑中明确划分出的区域内。人员或物品的进出必须经过气锁室或通过系统。人员进入时，需更换全部衣服，而离开时，再穿上自己的日常服装前应淋浴。第二十三页，共四十一页，编辑于2023年，星期日3.通风系统控制:设施内应保持负压。供风和排风均需经HEPA(高效过滤器)过滤4.污水的净化消毒

5.废弃物和用过物品的灭菌

6.必须要有供标本、实验用品以及动物进入的气锁室

7.必须配备应急电源和专用供电线路

8.必须安装安全防护排水管最高防护实验室——P4实验室第二十四页，共四十一页，编辑于2023年，星期日第二十五页，共四十一页，编辑于2023年，星期日最高防护实验室——P4实验室1、实行双人工作制，任何情况下严禁任何人单独在实验室内工作。这一点在防护服型四级生物安全水平实验室中工作时尤其重要。

2、在进入实验室之前以及离开实验室时，要求更换全部衣服和鞋子。

3、工作人员要接受人员受伤或疾病状态下紧急撤离程序的培训。

4、在四级生物安全水平的最高防护实验室中的工作人员与实验室外面的支持人员之间，必须建立常规情况和紧急情况下的联系方法。第二十六页，共四十一页，编辑于2023年，星期日P3、P4实验室

——设备和管理的完美统一不仅仅是常规的紫外灯和熏蒸消毒，也不仅仅是靠空气洁净技术或一些灭菌设备，而是综合了土建、暖通、给排水、电气、工艺等各专业、各方面技术的硬件，以及实验室操作规程等软件措施而形成的综合安全保障体系。P3、P4实验室是实现生物安全的有力保障，但除了上述硬件设施外，更为关键的是必须要严格遵守实验室的安全操作规程，才能真正发挥P3、P4实验室的功能，达到生产安全的效果。第二十七页，共四十一页，编辑于2023年，星期日第二十八页，共四十一页，编辑于2023年，星期日中国第一个P4级别高等生物安全实验室奠基仪式于2011年6月30日在郑店（江夏）举行。为期两年实验室建设工程。第二十九页，共四十一页，编辑于2023年，星期日生物安全需要法律的支持!第三十页，共四十一页，编辑于2023年，星期日国际组织和国外病原微生物实室生物安全相关法规和指南1《实验室生物安全手册》（WHO）

1988年第一版，1993第二版，2004年第三版2《微生物危险等级的分类》（欧洲经济共同体EEC）

指令93/883《微生物和生物医学实验室生物安全手册》（美国）

1983年第一版，1993年第三版，1999年第四版；4《生物危害主要防护：生物安全柜的选择、安装和使用》

（美国）2000年第二版；5《实验室生物安全指南》（加拿大）

1990年第一版，1996年第二版，2004年第三版第三十一页，共四十一页，编辑于2023年，星期日WHO

《实验室生物安全手册》

LaboratoryBiosafetyManual1983年第一版，是第一本国际通用的安全手册，成为了统一的基本原则。主要与病原微生物实验室有关第三十二页，共四十一页，编辑于2023年，星期日主要内容生物安全指南实验室生物安全保障实验室设备（生物安全柜、安全设备）微生物学操作技术规范（包括实验室技术、意外事故应对方案、消毒灭菌和感染性物质的运输）生物技术介绍（新添重组DNA技术）安全组织和培训……《实验室生物安全手册》

LaboratoryBiosafetyManual第三十三页，共四十一页，编辑于2023年，星期日我国生物安全相关法规和标准《中华人民共和国传染病防治法》(2004年8月颁布修订版)《病原微生物实验室生物安全管理条例》(2004年11月)《医疗废物管理条例》第三十四页，共四十一页，编辑于2023年，星期日《中华人民共和国传染病防治法》背景：03年的非典第二十二条：从事病原微生物实验的实验室和单位，应符合国家规定的条件和技术标准。第二十六条：要求国家建立传染病菌种、毒种库。第五十三条：县级以上卫生部门须履行监督检查职责第三十五页，共四十一页，编辑于2023年，星期日《病原微生物实验室生物安全管理条例》

国家对病原微生物实行分类管理，对实验室进行分级管理。采集、运输、保存病原微生物须满足条件。国家实行统一的实验室生物安全标准。第三十六页，共四十一页