第13章-革兰阳性无芽孢杆菌课件

第13章革兰阳性无芽孢杆菌第13章革兰氏阳性无芽孢杆菌p178第一节李氏杆菌属第二节

丹毒丝菌属第三节肾杆菌属第一节李氏杆菌（Listeria）

一、需氧、兼性厌氧，无芽孢、无荚膜二分类：第一群：产单核细胞李氏杆菌（代表）第二群：格氏李氏杆菌（代表）第一节李氏杆菌属Listeria最初，李氏杆菌属仅有单核细胞增多性李氏杆菌一个种，之后相继确认了伊氏李氏杆菌(L.ivanovii)、无害李氏杆菌(L.innocua)、威斯梅尔氏李氏杆菌(L.Welshimeri)和西里杰氏李氏杆菌(L.seeligeri)。期间曾将默氏李氏杆菌(L.murrayi)和格氏李氏杆菌(L.grayi)也划到本属中，但后来的研究结果表明它们是一个独立的特殊的属——默里亚属(Murraya)，包括格氏默亚里菌格氏亚种(M.grayi

subsp.grayi)、格氏默里亚菌默氏亚种(M.grayi

subsp.murrayi)。一、产单核细胞李氏杆菌的形态与染色

（一）形态染色：G+，两端钝圆的短小杆菌，单在、呈Ｖ字排列、或成从排列；无芽胞、无荚膜；20~25℃：4根周身鞭毛，具有运动性；37℃很少产生鞭毛；R型菌多为长丝状。1、G+，两端钝圆的短小杆菌，单在、呈Ｖ字排列、2、无芽胞、无荚膜；或成从排列；

3、20~25℃：4根周身鞭毛；37℃少有，最多1根鞭毛；4、R型菌多为长丝状

（二）培养：在普通琼脂培养基和普通肉汤中生长不良，如加入0.2％-0.5％(W/V)葡萄糖或5％-10％血液、血清则生长良好；在血琼脂平皿上经37C24h培养可形成湿润、光滑、透明、灰白色、露珠样的圆形小菌落，并形成α溶血环。在麦康凯培养基不生长。（三）抵抗力本菌对腐败和干燥环境有较强的抵抗力。在饮水中可存活5d，在污物中可存活15d，在深埋的尸体中可存活9个月。对热和直射光、常用消毒剂抵抗力不强，对青霉素很敏感。（四）致病机理与致病性本菌通过消化道感染，进入血流，而后定殖在局部或引致全身感染。（五）抵抗力与致病性：致病机理：肝脾巨噬细胞的胞内寄生菌

本菌通过消化道感染，进入血流，而后定殖在局部或引致全身感染。1、本菌可细胞内寄生；2、可自然感染多种家畜：猪、马、 牛、绵羊；3、病畜表现神经症状、妊畜流产、血 液中单核细胞增多；4、鸡可全身感染，心肌坏死；5、成人脑膜炎，新生儿脑膜炎 (10%)。

微生物学诊断：

染色镜检：

-病料：死后可采取心血、肝、脾、肾、淋巴结等制成涂片，革兰氏染色镜检。

-如发现少量典型杆菌，可初步确诊，如为慢性心内膜炎病例，可用心脏瓣膜增生物涂片，镜检。羔羊患关节炎病时，可检查关节滑膜液。2．分离培养：分离培养时可用含有加入0.2％-0.5％(W/V)葡萄糖或5％-10％血液、血清的琼脂平皿或半固体琼脂培养基。3．血清学检查：p:血清型鉴定时，将待鉴定菌株的纯培养物甲醛灭活，制成沉淀原，与标准菌株高免血清作琼脂扩散试验。4.动物实验：第二节丹毒丝菌属

猪丹毒是由猪丹毒杆菌引起的猪的一种急性或慢性传染病。

其特征为急性型呈败血症症状，亚急性型在皮肤上出现紫红色疹块，慢性型常发生心内膜炎和关节炎。

一、病原猪丹毒杆菌

形态与染色：革兰氏阳性、纤细小杆菌，有荚膜、无芽胞和鞭毛。在病料内，细菌常单在、成对或呈丛排列；在陈旧的肉汤培养物，慢性病猪的心内膜疣状物上多呈长丝状。

培养：在血液或血清琼脂培养基上，因菌株来源不同，可有光滑（S），粗糙（R）和中间型（I）三个型。从急性病猪分离的菌落为S，细小，表面光滑，边缘整齐，呈α溶血，为强毒（微蓝色）。从慢性病猪或带菌猪分离的为粗糙型，较大，表面粗糙，边缘不整齐，长丝状，低毒，（土黄色），中间型毒力菌落性状介于两者之间（金黄色）。抵抗力对外界抵抗力很强，例如猪肉内细菌经盐淹或熏制后，能存活3—4个月，暴露于日光下存活10天，掩埋尸体内可活7个月，干燥状态下可活3周。可以抵抗胃酸的作用，但对消毒药和温度抵抗力不强。抗原性：用琼扩可分为24个血清型和N型（无特异抗原）。其中Ⅰ、Ⅱ型相当于迭氏A、B型。

A型抗原构造：A+（B）+GA型多分离自急性败血型病例，A抗原与病原性有关，用于攻毒；

B型抗原构造：（A）+B+GB型多分离自疹块型，心内膜炎、关节炎型病例，B抗原与防御感染有关，用于制苗；

N型抗原构造：无抗原性、亦无毒力；灭活苗交互免疫力低，而弱毒苗交互免疫力较好。抗原构造说明：（）表示含量较少；G为种特异性抗原，A、B分别为型特异性抗原。在我国，因标准血清型不全，尚不能对全国各地分离的所有菌株进行鉴定，故对国内血清型情况知道不多，但知道来源于猪的A、B、N型（马闻天，1957）二、流行病学

易感动物猪最易感，各种年龄均可感染，但以架子猪（3—12）发病率最高。其他如牛、羊、马、犬、鼠、家禽及鸟类也能感染发病。人可感染，称为类丹毒。实验动物中鸽、小白鼠最敏感，肌肉或皮下接种后3—5天死亡，死后剖检脾肿大，肝有坏死灶。致病机理及致病性：消化道感染—血流—定址在局部或引致全身感染。细菌黏附力是致病的主要因素！无外毒素！分布广泛，寄生于家畜家禽和鱼类。微生物学诊断：1.显微镜检查：病猪耳静脉血—染色—镜检。肝、脾、肾、淋巴结—涂片—染色—镜检：典型杆菌初步诊断。2.分离培养：0.2%葡萄糖+5%马血清，在肉汤中加入新霉素或万古霉素，抑制杂菌生长。

3.细菌鉴定：与李氏杆菌鉴别诊断。4.免疫治疗：我国用猪丹毒GC42弱毒菌株制成的冻干苗。我国生产使用的疫苗有：灭活苗、弱毒苗、三联苗。治疗：早期治疗效果好，青霉素（PG）首选，配合高免血清效果更好。二、流行病学

传染源

病猪、带菌猪、病猪内脏（肾、脾、肝）分泌物、排泄物都含菌。另外，在健猪的扁桃体和回盲口处也可发现本菌，其他禽畜、两栖类、爬行类、野生动物也可成为带菌者，如徐克勤报道：江苏鸡带菌10.96%,鸭81%,鹅97.96%。另外，也常从鱼、吸血昆虫体内分离到本菌。传播途径传播途径以消化道感染为主，也可通过皮肤创伤（特别是人，屠宰工人等），带菌猪在不良条件下抵抗力降低，也可引起内源性感染、发病。本菌在鱼类体表黏液、腐败的动植物、土壤、污水中进行某种程度的增殖，这在流行病学上值得注意。流行特点多发生于夏季，5—8月是流行的高峰期，多发生于架子猪（4—6月龄猪占55.89%）。三、症状

潜伏期1—7天（平均3—5天），临床上可分为三型：

1．急性型：较多见。初期个别猪无症状突然死亡，大多以发热（42—43℃）稽留，寒战，食欲下降，结膜充血，两眼清亮有神，很少有分泌物，粪便干硬，粟状（后期可能下痢）呼吸迫促，粘膜发绀。耳尖、鼻端、腹、腿内侧皮肤出现大小、形状不一的红斑，指压退色，病程2—4日，病死率达80%—90%。

2．亚急性型（荨麻疹型）：除轻微表现急性败血症症状外，其特征是在皮肤上出现疹块，俗称“打火印”，疹块大小、形状不一，数量不等，菱形多见，可出现于胸、腹、肩、背、四肢等处，色紫红，稍突起，可于数日内消退，自行恢复。。

3．慢性型：常见的有慢性关节炎，慢性心内膜炎和皮肤坏死。关节的损害最常见于肘、髋、跗、膝、腕关节，受害关节肿胀，跛行；病猪生长缓慢，消瘦；

慢性心内膜炎型通常不表现临床症状，常无先兆，突然倒地死亡或在宰后检查时发现；也有呈进行性消瘦，喜卧厌走，强行运动时见心率加快，呼吸迫促，听诊有心杂音。皮肤坏死常发生于背、肩、耳、蹄、尾部，局部皮肤变黑，干硬如革，最后脱落遗留斑痕亚急性猪丹毒：体表皮肤出现相当多的疹块慢性猪丹毒：呈多发性关节炎，不能站立呈犬坐状慢性猪丹毒：病猪表现皮肤坏死2．亚急性型：皮肤上出现疹块为特征，内脏变化与急性型略同。3．慢性型：关节炎病例可见肿大，关节囊内充满多量浆液、纤维素性渗出物，滑膜充血，水肿，病程较长者，肉芽组织增生，关节囊肥厚。心内膜炎，在房室瓣形成各种灰白色的菜花形疣状物，使瓣口狭窄，变形，闭锁不全。急性猪丹毒：肺水肿，小叶间质性肺炎急性猪丹毒：右脾肿大、充血，左正常对照慢性型猪丹毒：关节内增生物慢性型猪丹毒：心瓣膜上有灰白色增生物，呈菜花状五、诊断作微生物学检查。病料采集：肾、脾、肝、淋巴组织，疹块部的渗出液，心内膜组织，关节液。镜检、培养、实验动物接种见实习指导。

血清学诊断：已报道的有免疫荧光、凝集反应、补反、间接血凝，其中以直接荧光抗体实验敏感，主要用于慢性病例的诊断。附：血清培养凝集实验将黄牛制备的高免血清经56℃30分灭能后，用马丁肉汤稀释成1：10—1：640，而后各接种病猪耳静脉各一滴，36℃12小时，可见到明显凝集现象，滴度可达1：320—640，检出率90.3%，比血片镜检法高。在交通不便的农村，可将病料或血液涂在滤纸片上，置于小瓶中寄往实验室检验。五、诊断附：血清培养凝集实验将黄