补体检测及应用

第第#页该法是借助补体的抗原性与与相应抗体反应的前带原理建立的补体单个成分定量检测法。利用前带原理必须以过量的抗补体抗体保证准确测定的质量。因其简单、特异、重复性好、自动化程度高而颇受使用者欢迎。且动免疫比浊法可反映所测补体成分的绝对量，并能进行标准化流程管理与质量控制，是目前国内外临床免疫检测中的主要检测方法。第四节补体结合试验（CFT）将免疫溶血作为指示系统，用以检测另一反应系统中抗原或抗体的传统方法。该方法并非用于补体的检测，而是利用补体的溶细胞作用进行各种物理状态的抗原抗体测定。一、试验原理包括①反应系统：已知抗原（或抗体）与待测抗体（或抗原）；②补体系统；③指示系统：SRBC与相应溶血素预先结合，成为致敏绵羊红细胞。反应分两步进行。首先是反应系统与补体的作用；第二步是指示系统利用剩余补体的反应。如反应系统中有抗体或抗原，则形成免疫复合物而固定与消耗补体，使后加入的$区30-抗SRBS指示系统无多余补体可利用，则无溶血反应发生，反之亦然。不溶血为补体结合试验阳性，而溶血为试验阴性。试验中将反应系统的待测抗原（或抗体）作系列倍比稀释可作半定量测定。试验中以50%不溶血作为判断终点。二、试验方法（一）试剂的准备.抗原或抗体.补体：采用豚鼠血清为补体。.待测标本：及时分离血清用于检测或-20℃保存备用。试验前，应先将血清56℃加热30分钟（或60℃3分钟）以灭活补体。血清标本遇有抗补表达象时，可作下列处理：①加热灭活时提高l2℃；②-20℃冻融后离心去沉淀；③以3mmol/L盐酸处理；④加入少量补体后再行灭活；⑤以白陶土处理；⑥通入0。2；⑦以小白鼠肝粉处理；⑧用含l0%新鲜鸡蛋清的生理盐水稀释血清。（二）正式试验：小量法较为常用。三、方法评价补体结合试验是一经典的免疫技术，具有灵敏度高、可检测的抗原或抗体范围广泛等优点。该方法无需特殊设备，结果容易观察，试验条件要求不高，一般医院均具备开展的条件。第五节补体受体的测定补体受体存在于多种细胞，是清除免疫复合物、净化机体内环境的重要膜性成分。在若干补体成分中，C3是各活化途径的交汇点，且含量最多，故C3受体为测定的重点。第六节补体测定的应用补体的单个成分及总补体活性的测定，对于评价机体免疫功能、诊断与治疗疾病、流行病学调查等均有重要的意义。同时，可根据补体的溶细胞活性与级联反应的性质，用于抗原或抗体的检测、免疫复合物的测定等。.补体相关试验用于诊断梅毒螺旋体感染的华氏反应（已淘汰）。.补体含量与活性检测反映总补体活性的CH50试验；用于检测补体单个成分及其裂解产物与补体受体的溶血试验、免疫化学试验与免疫荧光技术等。.与补体含量与活性相关的疾病主要包括：（1）免疫相关性疾病（2）与补体有关的遗传性疾病（3）高补体血症：偶见于感染恢复期与某些恶性肿瘤患者，如C2、C3、C4的升高。急性病毒性肝炎、心肌梗死、糖尿病甚至正常妊娠时，也可观察到补体值的增高。（4）补体含量显著降低的疾病:继发性补体降低常见于下列情况：①消耗增多，如SLE、冷球蛋白血症、自身免疫性溶血性贫血、类风湿关节炎、移植排斥反应等，此时因免疫复合物形成，消耗补体；②补体的大量丢失，主要见于大面积烧伤患者、失血及肾脏病患者；③补体合成不足，常见于肝脏疾病患者或营养不良的患者。此外，细菌（特别是G-）感染时，常因补体替代途径的活化使补体水平暂时降低。补体总活性测定采用A.凝集法B.沉淀法C.溶血法D.电泳法E.标记法『正确答案』C『答案解析』补体总活性测定常采用的是CH50试验。补体结合试验的指示系统是A.特异性抗体与补体B.特异性抗原与补体C.红细胞与溶血素D.加热灭活的患者血清E.补体与溶血素『正确答案』C『答案解析』补体结合试验试验原理：包括①反应系统：已知抗原（或抗体）与待测抗体（或抗原）；②补体系统；③指示系统：SRBC与相应溶血素预先结合，成为致敏绵羊红细胞。下列物质中，不参与溶血反应的是A.羊红细胞B.抗红细胞抗体C.补体D.溶血素E.抗补体抗体『正确答案』E『答案解析』免疫溶血法中抗原为SRBC,抗体为兔或马抗SRBC的抗体（IgG、IgM型），即溶血素。试验中有两组补体参与，一组缺少待测成分的试剂（R试剂）。加入致敏SRBC（检测经典途径补体成分用