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文档简介
实验二食品防腐剂抑菌效果的测定第一页,共十一页,编辑于2023年,星期二一、实验目的了解山梨酸钾产生抑菌效果的原理学会利用管碟法(牛津杯法)测定食品防腐剂的抑菌效果了解不同浓度山梨酸钾对不同微生物抑菌活性的影响第二页,共十一页,编辑于2023年,星期二二、实验原理山梨酸钾是一种真菌抑制剂,防腐作用主要靠未解离的分子,在pH6.0以下对霉菌和酵母菌有明显的抑制作用,在pH>6.5时无效。牛津杯里的防腐剂向琼脂培养基扩散渗透,通过对试验菌的抑杀作用而影响细菌的生长繁殖,在牛津杯周围形成抑菌圈。依据抑菌圈的大小可以判断抑菌能力的强弱。第三页,共十一页,编辑于2023年,星期二三、实验器材(一)培养基及试剂葡萄糖蛋白胨琼脂培养基山梨酸钾溶液(0.20%、0.30%、0.40%、0.50%)(二)菌种1、啤酒酵母2、金黄色葡萄球菌第四页,共十一页,编辑于2023年,星期二(三)其他1、无菌陶瓦盖培养皿2套2、无菌生理盐水1瓶3、无菌牛津杯10个(四)仪器1、超净工作台2、1mL移液枪第五页,共十一页,编辑于2023年,星期二四、实验步骤1、熔化培养基2、制平板
将熔化培养基倒入平皿内约25mL(培养皿底约一半高度),待其凝固。3、涂布平板接种用移液枪吸取0.1mL菌液加到上述平板中,用无菌三角玻璃涂棒涂布均匀。第六页,共十一页,编辑于2023年,星期二第七页,共十一页,编辑于2023年,星期二4、加牛津杯和药液:标记药液浓度后,用无菌镊子将牛津杯等距离放置在培养基上,用移液枪在每个牛津杯中加入不同浓度的药液0.2mL。如下图:
1:0.20%2:0.30%3:0.40%4:0.50%0:空白注意:(1)牛津杯内加入药液后不要再移动(2)不能在陶瓦盖上做记号12340第八页,共十一页,编辑于2023年,星期二5、正置培养:细菌37℃真菌28℃6、结果判定:根据牛津杯周围有无抑菌圈及其直径大小,来判断该菌对山梨酸钾的敏感程度。用直尺测量抑菌圈大小,并记录。第九页,共十一页,编辑于2023年,星期二五、实验结果及分析山梨酸钾浓度(%)0.200.300.400.50抑菌圈直径(mm×mm)啤酒酵母金黄色葡萄球菌分析:第十页,共十一页,编辑于2023年,星期二六、思考题1、山梨酸钾抑菌的机理是什么?2、山梨酸钾在食品中
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