实验六植物抗氧化酶活性的测定_第1页
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文档简介

实验六植物抗氧化酶活性的测定第一页，共十四页，编辑于2023年，星期二POD、SOD、CAT（AOX）（PPO）第二页，共十四页，编辑于2023年，星期二抗氧化酶与植物抗逆性关系第三页，共十四页，编辑于2023年，星期二JournalofExperimentalBotany,2009，60（2）：377–390H2O2H2O2第四页，共十四页，编辑于2023年，星期二李忠光，2009.10第五页，共十四页，编辑于2023年，星期二POD一、实验原理Peroxidase,POD第六页，共十四页，编辑于2023年，星期二（ROS,H2O2）第七页，共十四页，编辑于2023年，星期二PPOPolyphennoloxidase,PPO第八页，共十四页，编辑于2023年，星期二抗氧化酶动力学曲线第九页，共十四页，编辑于2023年，星期二植物抗氧化酶提取和测定参考文献第十页，共十四页，编辑于2023年，星期二二、实验方法1、提取：分别取0.5g实验材料→加入少许石英砂和3ml提取液（50mmol/LPBS,pH5.8,内含0.１mmol/LEDTA,1%PVP）→充分研磨→转入离心管中→用2ml提取液洗研钵→5000rpm离心10min→上清液定容至5ml→用于测定POD和PPO酶活性或分装后转至-20或-80℃保存。

第十一页，共十四页，编辑于2023年，星期二2、POD测定：取POD反应混合液（10mmol/L愈创木酚，5mmol/LH2O2,用PBS溶解）2.90ml，25℃水浴5min，加入酶液100ml（空白调零用提取液取代），立即记时，摇匀，读出反应30s和3min时的A470。用ε计算POD活性。3、PPO测定：取PPO反应混合液（20mmol/L邻苯二酚，用PBS溶解）2.8ml，25℃水浴5min，加入酶液0.2ml（空白调零用提取液取代），立即记时，摇匀，读出反应

30s和2min时的A410。以每分钟A值变化0.01所需要的酶液的量为一个活力单位（U），则：第十二页，共十四页，编辑于2023年，星期二PODactivities=

(mmol.g-1FWmin-1)PPOactivities=

(U.g-1FW)4、计算第十三页，共十四页，编辑于2023年，星期二5、思考题5.1简述

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