第二章第二节第一部分细菌的营养与生长繁殖

（一）细菌生长繁殖的条件主要环境因素：营养物质、温度、pH值、氧气等1.营养物质：提供原料、能量当前第1页\共有31页\编于星期六\16点细菌的化学组成(chemicalcomponents)当前第2页\共有31页\编于星期六\16点细菌需要的营养物质营养物质nutrient碳源carbonsource氮源nitrogensource无机盐inorganicsalt生长因子growthfactor水water当前第3页\共有31页\编于星期六\16点（1）碳源：合成菌体的必需原料，获取能量的来源

无机碳源和有机碳源

各种有机碳源中，容易被细菌吸收的是糖类物质如：葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、果糖、甘露醇等（2）氮源：合成菌体蛋白（结构、功能）、核酸

无机氮源、有机氮源和氮气分子大多数利用前两种

固氮菌有固氮作用，可以借助特殊的酶将分子态的氮转化成氨和其他氮化物当前第4页\共有31页\编于星期六\16点（3）无机盐：细胞生长必需的各种金属元素及微量元素酶或辅酶的组分调节酶活性调节胞内渗透压、氧化还原电位特殊类型细菌的能源维持生物大分子和细胞结构的稳定性

当前第5页\共有31页\编于星期六\16点（4）生长因子：菌体自身不能合成或合成量不足,需要外源加入的、微量即可的营养物质。如：维生素、氨基酸等

营养缺陷型细菌

流感嗜血杆菌需X（高铁血红素）,V因子（辅酶Ⅰ或Ⅱ），而金葡可产生，两者共培养时出现卫星菌落现象

（5）水：菌体重要成分

功能细胞组分、溶媒、参与代谢、适宜反应温度的保障、维持大分子构象稳定

当前第6页\共有31页\编于星期六\16点2.酸碱度：即pH值细菌细胞借此调节胞膜的状态以保证酶促反应的进行大多数细菌的最适pH值是

特殊如：偏酸性的结核杆菌，PH为

偏碱性的霍乱弧菌，PH值为当前第7页\共有31页\编于星期六\16点3.温度：对细菌的生长速度影响最大致病菌一般37℃，过高杀菌，过低抑菌细菌以此分为：嗜冷菌：－5℃-30℃海洋细菌、鼠疫杆菌（30℃）嗜温菌:10℃-50℃最适30℃-37℃

嗜热菌：25℃-80℃极端嗜热菌

当前第8页\共有31页\编于星期六\16点4、必要的气体环境：

氧气和二氧化碳（1）专性需氧菌：结核分枝杆菌

微需氧菌：幽门螺杆菌、空肠弯曲菌（2）专性厌氧菌：破伤风芽胞梭菌（3）兼性厌氧菌：葡萄球菌(大多数)

当前第9页\共有31页\编于星期六\16点（二）细菌的繁殖方式细菌多无性繁殖

细菌以简单的二分裂方式进行繁殖，繁殖一代所需时间约20~30min；但少数细菌代时较长，如:结核分枝杆菌代时为18h-24h。当前第10页\共有31页\编于星期六\16点

当前第11页\共有31页\编于星期六\16点（三）细菌的生长繁殖规律

—生长曲线生长曲线（growthcurve）

描述细菌群体在整个培养期间的菌数变化规律的曲线。典型的生长曲线可分为延迟期、对数期、稳定期和衰亡期。当前第12页\共有31页\编于星期六\16点2、细菌群体的生长繁殖

迟缓期

(lagphase):适应、活化期

对数期

(logphase)：迅速生长期，典型性

稳定期

(stationaryphase)：新生、死亡平衡特征产物积累期

衰亡期

(declinephase)：营养少，代谢物蓄积，菌体死亡当前第13页\共有31页\编于星期六\16点总菌数活菌数培养时间Ⅱ.对数期Ⅲ.稳定期Ⅳ.衰亡期Ⅰ.迟缓期细菌数目（个/ml）对数ⅡⅢⅣⅠ细菌的生长曲线当前第14页\共有31页\编于星期六\16点1.迟缓期特点生长速率常数等于零（数目不变）菌体粗大

代谢活力强对不良条件抵抗能力降低ＲＮＡ含量增加当前第15页\共有31页\编于星期六\16点2、指数期(对数期)(exponentialphase)

特点①活菌数呈对数增加②酶系活跃，代谢旺盛③生长速率最大④细胞的化学组成及形态，生理特性比较一致当前第16页\共有31页\编于星期六\16点稳定期特点活菌数保持相对稳定，总菌数达最高水平。细菌代谢物积累达到最高峰。芽胞杆菌这时开始形成芽胞。这是生产收获时期。3、稳定期(stationaryphase)当前第17页\共有31页\编于星期六\16点4、衰亡期(declinephase/deathphase)特点细菌死亡数大于增殖数,活菌数明显减少,群体衰落细胞出现多形态,大小不等的畸形,变成衰退型细胞死亡,出现自溶现象。当前第18页\共有31页\编于星期六\16点三、细菌的人工培养（一）培养基(medium)

人工配制的满足细菌及其他微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质。配制注意事项合适配方注意成分浓度比例pH适宜

无菌当前第19页\共有31页\编于星期六\16点培养基的类型按主要营养物质的来源：天然培养基和合成培养基按物理状态：固体、液体、半固体培养基按用途：基础培养基营养培养基选择培养基鉴别培养基厌氧培养基当前第20页\共有31页\编于星期六\16点（二）细菌在培养基中的生长现象P121、液体培养基:

混浊生长、沉淀生长、菌膜生长

当前第21页\共有31页\编于星期六\16点在液体培养基中的生长情况

多数呈均匀混浊状态少数链状菌呈沉淀生长专性需氧菌则在表面生长，常形成菌膜菌膜当前第22页\共有31页\编于星期六\16点液体培养基中沉淀生长混浊生长表面生长当前第23页\共有31页\编于星期六\16点菌膜菌沉淀均匀浑浊对照当前第24页\共有31页\编于星期六\16点2、半固体培养基:检查细菌动力有鞭毛的细菌：可扩散，呈放射状或云雾状无鞭毛的细菌：沿穿刺线生长当前第25页\共有31页\编于星期六\16点在半固体培养基中的生长情况：常用于观察细菌动力

有鞭毛的细菌可沿穿刺线呈羽毛状或云雾状混浊生长无鞭毛细菌则只能沿穿刺线呈明显的线状生长当前第26页\共有31页\编于星期六\16点混浊生长沿穿刺线生长无鞭毛细菌半固体培养基中有鞭毛细菌当前第27页\共有31页\编于星期六\16点3、固体培养基:

形成菌落。菌落：单个细菌分裂繁殖后形成的肉眼可见的细菌集团。菌苔：多个菌落融合成片。纯培养：挑取一个菌落转种