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胃癌中stathmin表达及其与血管生成的关系指导教师：于建宪研究生：孙雪课题研究的必要性胃癌是人类最常见的恶性肿瘤之一，胃癌的发病率在我国居恶性肿瘤之首，在世界居第二位。探索胃癌发生及演进的分子机制，筛选新的癌变监控靶点，促使胃癌治疗的策略和方法不断优化，为胃癌的预防和治疗提供新的思路和方法。临床试验与动物实验已证实，如果没有新生血管形成来供应营养，肿瘤在达到2mm直径或厚度后将不再增大，新生血管不仅为肿瘤生长供应营养，也为肿瘤的转移准备了有利条件。同其他多种肿瘤一样，血管生成是胃癌得以生长浸润和转移的重要前提。因此揭示肿瘤血管形成的分子机制、发现新的有效治疗靶点、抑制肿瘤血管形成是提高胃癌疗效和患者生存率的重要策略。Stathmin蛋白又称癌蛋白18(oncoprotein18，opl8)，stathmin最初是从淋巴瘤中筛选出的特征性的表达基因，stathmin的表达在恶性肿瘤发生、发展及肿瘤细胞对化疗的敏感性上具有重要意义。

Stathmin蛋白是一种重要的微管解聚蛋白,其作用靶点就是微管蛋白。血管内皮细胞的分裂、增殖以及移动对毛细血管的生成至关重要，而微管系统的稳定性正好在这些方面发挥关键作用，微管动力学的状态涉及黏附、移行和形态学变化等许多细胞学过程。Stathmin的活性动态平衡决定了微管动力学的状态。国内外研究动态Stathmin蛋白在多种肿瘤中表达异常,其表达水平与肿瘤的侵袭、转移以及临床分期密切相关。但国内研究stathmin与胃癌侵袭、转移关系的报道甚少。Yoshie等在研究子宫内膜周期性再生中发现

stathmin的表达导致了HIF-1α与VEGF的累积；从而刺激子宫内膜血管生成；Miyashita等发现stathmin能上调血管内皮锌指蛋白（Vezf1），而Vezf1是胚胎血管形成的重要转录调控子，暗示stathmin参与了血管形成的过程。此外，Mistry等在对人脐血管内皮细胞研究中发现,小剂量紫杉醇联合抗stathminRNA核酶在很大程度上抑制了血管的生成,较两者分别单独使用效果更加明显。提示stathmin可能参与血管的形成。课题设计与研究内容课题设计内容1.收集临床和病理学资料完整的病例，分别取新鲜的癌组织和相对正常胃粘膜组织（据癌组织＞

5cm）；2．应用RT-PCR检测stathmin

mRNA的表达；3.应用免疫组化PV9000法检测stathmin蛋白的表达；4.

应用CD34标记血管并检测微血管密度(MVD)；5.

分析MVD与stathmin表达的关系。研究方法与技术1.免疫组织化学法2.RT-PCR法预期成果1.胃癌组织stathmin的表达与临床病理学特征和新生血管形成密切相关。2.为以stathmin为靶点的胃癌抗血管治疗提供研究思路与实验依据。本实验所收集的标本将主要来自青岛市立医院病理科，我院病理科具有免疫组化及分子病理学的基本实验条件和设备。本研究所需的全部试剂均可在国内买到，拥有完成该课题的全部条件。可能出现的问题和解决方案1.RT-PCR试验部分难度较大，方法需要提前学习，熟练技术操作及相关理论，保证实验顺利进行。2.免疫组化实验时应根据文献选择购买合适的抗体。3.实验中会出现各种问题，因此严格实验设计，预实验摸索合适条件，并按进度尽量提前进行。4.加强文献阅读及理解，课题进行中不断完善，在实践中去摸索，去认识。计划进度2011.10—2012.2

文献检索,撰写综述，收集整理标本实验设计和预实验实验阶段及实验结果的2012.3

—2012.42012.5

—2012.7记录2012.8

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