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文档简介

•流式细胞仪（FlowCytometer简称FCM）是一项集激光•22FACScan也是最早可用于临床诊断的仪器。另一类为大型机，其特点为可快速将所感的细胞分3 BD4455661934年 ---Coulter计数1959年B型Coulter1972年:BD(Becton-第一台流式细胞仪,7 流式细胞仪主要由三部分组成：流动室和液液流系统：依次传送待测样本中的细胞到激光路系统：细胞由激光激发，通过光学滤片88在流式细胞仪中，细胞被传送到液流中的激光照射区。任何存在于悬液中的直径为0.2-150微米的粒子或细胞都适用于流式分析。在实际工作中，用实体组织进行流式细胞分析往往是不可能的，分析之前必须对其进行分解。被液滴包绕的粒子称为细胞液柱，当粒子经过激光照射区时，通过激光激发产生散射光。含有荧光的粒子的透镜，滤片和探测器）收集。分光器和滤光片引导散99统的部件，台式机中流动室称为样品槽，大型机称之为FlowFocusedForwardAngleLightFALS90DegreeLightScatterFALS90LS上述两种信号都是来自于激光原光束，目前采用这两个参数组合，可区分不同种类的细胞亚群，同时可获得细胞相关的重要信息，下图（图3-2）为FSC和SSC组成的二维散点图，从图中可以很容易把全血样本中淋巴细胞、单荧光物质吸收符合其波长范围的光能量，内部电子受激上升到高能级。然后受激电子迅速回基态，释放过剩能量成为光子。这种能量的转换能够激发荧光物质的波长范围称为激发光谱。因为的能量消耗在吸收转换而不是荧光转换中，所以发射光波长要高于激发光波长。荧光物质的发射3-3488nm非常接近FITC的激发光谱的400

500 600 700FluoresceinFluorescent400

500

600 700300

457488 610400 500 600

700

PE-TR

不同的荧光区分细胞亚群。每个亚群的染色。而且，还可以对感的细胞进行再分选。FALSFluorescenceExampleChannelLayoutforLaser-basedFlow

4Flow

2

31

直方图可直观单个参数的细胞数量。阴性对照用于决定直方图中单参数的左右边界。左图中M1为对照峰。右图中M2为CD3FITC阳性峰。 性百分含量的统计结果为：M2： 下象限（LR）为X轴阳性细胞（CD3FITC），右上象限如图5-7所示，淋巴细胞亚群双阳性细胞（CD19+/CD3+）• •488nm Singlecellssortedintotesttubes

FALSFluorescence+PurdueUniversityCytometry 及抑癌 耐药蛋白的分析等等。 NormalCellG G C G2M

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