第六章 无菌动物悉生

第六章

实验动物微生物控制

的特点及应用

按对微生物的控制的程度，可以将实验动物分为五类，即：

（１）无菌动物（GF）；

（２）悉生动物（GN）；

（３）无特定病原体动物（SPF）；

（４）清洁动物（CL）；

（5）普通动物（CV）。

无菌动物和悉生动物饲养于隔离器中（隔离系统），无特殊病原体动物饲养于屏障系统，通常动物饲养于开放系统。 近交系动物遗传均一、个体差异小、实验结果比较准确。但是只从遗传上加以控制，如不进行微生物控制，没有排除自然感染的微生物和寄生虫的影响，实验结果仍可能不准确。因此，在精度要求高的实验中，无菌动物、悉生动物和无特殊病原体动物就成了理想的实验动物。

种类饲养方法说明附记无菌动物隔离系统以封闭的无菌技术取得，用现有方法不能检出任何微生物和寄生虫的动物无法检出任何生命体悉生动物隔离系统确知所带的微生物丛（植物的和动物的）经特殊饲养确知所带有的微生物SPF动物屏障系统没有指定的致病性微生物和寄生虫的动物。确知不带有的微生物清洁动物半屏障系统除普通动物要求外，没有对动物危害大和对研究干扰大的微生物确知不带有的微生物普通动物开放系统不得带有主要人畜共患和烈性传染病病原体的动物对微生物带有情况不明确按微生物控制程度的实验动物分类原则第一节无菌动物

一、无菌动物的基本概念

所谓无菌动物，就是指在机体的任何部位均检不出任何活的微生物和寄生虫的动物。

无菌动物的“菌”主要是指细菌，而严格来说，还包括真菌、立克次氏体、支原体和病毒等微生物及各种寄生虫。 用大量抗菌素可以使普通动物暂时无菌，但是这种动物不是无菌动物。因为这种无菌状态往往是一过性的，某些残存的细菌在适当的条件下又会在体内增殖。 即使能把体内细菌全部杀死，它们给动物造成的影响却是无法消除的，例如：特异性抗体的存在、单核吞噬细胞系统的活化、某些组织或器官的病理变化等。

因此，无菌动物必须是生来就无菌的动物。 现在无菌动物的品种已经很多，不仅小鼠、大鼠、豚鼠和家兔等小动物已有无菌动物，而且狗、猫、猴、猪、山羊、绵羊和牛等大动物以及鸡、火鸡、鹌鹑、青蛙、蛇甚至蚕、苍蝇、白蚁等也都有了无菌动物。这些都是为了适应科学发展的需要而培育的，其中的小鼠、大鼠、豚鼠，国外一些发达国家已能大量生产，并比较方便地应用于日常研究中了。三、无菌动物的特征

只要饲料配备适当，无菌动物发育正常，外观和普通动物相同，但是其机能、结构和普通动物有很大的不同。无菌动物受两个因素影响，即微生物和因饲养比较聚集而致的肾上腺增大。

无菌动物的形态特征系统改变消化系统盲肠肥大（5-6倍），肠壁菲薄，常因盲肠扭转或肠壁破裂而死亡。肠粘膜绒毛增多。肝脏重量下降。血液循环系统心脏相对缩小。白细胞数少。数值恒定免疫系统脾脏缩小，无二级滤泡，单核吞噬细胞功能降低，胸腺内以小淋巴细胞为主，吞噬细胞内泡状结构和溶酶体少，胸腺和淋巴结处于功能不活跃状态。白细胞数恒定无菌碰动物狗的功谨能特休征功能改变免疫功能吞噬细胞系统、淋巴组织发育不良，淋巴小结内缺乏生发中心，产生丙种球蛋白的能力很弱，血清抗体水平低，免疫功能处于原始状态，应答速度慢，过敏反应和排异反应及自身免疫现象消失或减弱生长率因种属而不同。无菌鸟类生长率升高，大小鼠无变化；豚鼠和兔生长率变慢。因无菌不能帮助消化纤维素所致生殖大鼠和小鼠繁殖率高；豚鼠及兔繁殖力低，代谢肠管对水的吸收率低，代谢周期比普通动物长.营养体内不能合成维生素B和K，故易缺乏抗辐射能力抗辐射能力增强，受辐射后存活时间较长寿命无菌动物比普通者长寿四、陡无菌荷动物役的应锐用1、在捎微生店物研崖究中附的应光用：论⑴吹某些璃疾病茶的病翼原研类究；饥⑵揭微生私物间海的拮须抗作泪用；哑⑶呆病毒毒病的况研究捷；伏⑷鱼细菌其学研判究：携如霍浮乱弧取菌、做福氏诵痢疾富杆菌恢；蚀⑸真膝菌感双染研橡究；男⑹封原虫轧感染骄研究捧。2、在望免疫膝学研鸟究中姜的应玩用：怠无柄菌动曾物血崭中无通特异屈性抗西体，摸很适垃合于胀各种数免疫耐现象滑的研色究；3、在栋放射贼医学誓研究估中的屠应用雾；4、在短营养阻代谢画研究修中的译应用山；5、在搭胆固阅醇代帽谢研练究中巴的应泳用；6、在数毒理朴学研见究中踏的应摄用；7、在狗肿瘤险研究恨中的烈应用钢；8、在令老年霉病学行研究斗中的涌应用陵；9、在甜宇航宜学研冰究中谋的应坏用；10、在披寄生肯虫研约究中止的应猜用；11、在冻口腔昼医学李研究定中的膝应用。健康均动物依处死浸在37垫℃灭菌跨液中恒送进痕无菌路隔离侨器剖腹桑手术拉切除困子宫将子拖宫浸饥消毒睬液即伟送到邀另一希只隔厅离器乒中切开剑子宫妥取胎脏，用灭酒菌纱企布揩愉拭仔曾体并鸭电刀爹断脐放入庙隔离蚁器内揉人工座喂乳捷或保幅姆代疯养。五、差无菌舍动物绕技术豚鼠榜因在禽一定智程度威上能东自力恶饮乳栏，故杏人工始哺乳初较容垄易。滤另外常，禽伏类、宫鱼类识、昆吃虫类剪等，别因是财在卵估中无圾菌的南前提聚下作胞出的袖，故耐用药榆物将钢卵周火围灭锻菌后采移入欲灭菌生隔离贞器内创使其垂孵化饱即可恭，而拳且，打这些帆动物有，一计般在伸出生神后就测能自吩力采围食，骄故较铁易育弯成。挎无菌程动物漆的理最论基委础和新实践橡依据泡在于幼胎盘较屏障渠和屏货障观秆念，僵根据色这个值基础女开展使了无鼻菌动窑物工自作。圆在无宇菌条记件下燥取仔育，一浪切操箱作在匠无菌赤隔离候器内稳进行挣。塑料剪无菌花隔离楼器犯大小草为1.六80米×0示.6缸5米×0似.5米第二策节估悉粒生动震物一、汤悉生帽动物词的概绕念悉生板动物伴（Gn男ot扩ob可io哲ti锈cAn武im掩al雀s）也称品已知遵菌动励物或柔已知多菌丛矩动物，是指近用与姻无菌剃动物峰相同岂的方敬法取袍得饲绪养（享剖腹有取胎饰，在招隔离见器内裳饲养洲）、喘但明袭确体释内所地给予影的已锅知微输生物僵的动承物，剖即凡皱含有夹已知恭的单焰菌、双泻菌、三菌握或多在菌的哪动物欧。一跳般是缓将1～3种已迹知的各微生拌物人掉工接柄种于唱无菌竖动物斧体内盘定居僚。以此路类推延。由陷于此族种动盒物和矮无菌径动物泡一样卸是放寨在无都菌隔现离器就内饲逗养的自，因杰此选鹿用此职种动廉物作枯实验渣准确姨性是穴很高申的，蜜可排狂除动造物体波内带盼有的优各种最不明鬼确的桐微生骄物对谦实验堤结果碧的干百扰，沸并可易按研伍究目惑的来惭选择柿某种导微生犯物，怠常用抽于研眠究微亮生物确和宿劈燕主动青物之细间的蹈关系拉。忆悉顾生动最物是胡使特岛定的遵微生精物定苗居于同无菌龙动物馅的动岔物，兽饲养京方法姑与无啊菌动应物相恰同。灵由于公这种帽动物粉是有稠菌的属，所甜以隔灾离器剩内也霉有这秆种微腔生物兴的存先在。二、苦悉生舞动物雨的发逆展随着躲科学楼的发李展，窄向实榜验动滚物提溉出了虽更高惜的要球求，赌就是骑如何芦消除洒实验匠动物伏自身蚁疾病气对实希验结遵果的骡干扰学，实坛验证麻明：诞除了揉剖腹咳产所滚获得昨的仔更畜，饶饲养限在严念格的绝无菌各隔离畅屏障邪内，慨没有箭另外买的办将法可眠以消莫除实困验动浓物本斑身所轻带的改传染劳性疾酸患，泪从而严使无贷菌隔圾离技文术的趴应用浮，从俗研究旷微生当物与详宿主瘦之间与的相哀互依会存关彼系，彼推广袜到高忠质量惹实验乡丰动物病的生卡产。悉生亲动物领大规塑模地年生产最和广瞒泛应零用于短医学皂研究拌的各拦个领躁域，牛取得最了普脂通动渗物实橡验所叛无法些发现啊的丰世硕成反果，手这就岔丰富庸了无姨菌动峰物的底研究掉内容苹。躁近楼二十踪蝶年来缓是无页菌动茎物研豆究的垄飞跃喇发展登阶段宇，形好成了灭跨越堵生物窄学、退医学判、兽齿医学淘的新茶兴学谜科一渠悉生评生物绣学。三、廉悉生咐动物北的特像性1、肠争道内顽存在戏能合社成维降生素丽和氨惹基酸刃的细必菌；2、悉骄生动凉物可验以弥茂补无俱菌动除物的喇某些炸缺点息。悉鸭生动豪物的慨生活奴力较粗强，染抵抗搬力明欧显增坡强，磨也易逗于饲虑养管程理，倒可代乏作无领菌动白物。3、所羞感染均的微林生物衡寄生巷虫的芒种类闷可以本根据肢实验钓目的帜需要粪而定蛛，因停此适袄宜作仇某些阶特定快的实像验，模如在跌免疫丑学实题验中艳，无耐菌动夸物不雅能发唱生迟拴发性惰过敏质反应帮，而阀感染蛇一种材大肠风菌的旷悉生督动物穗就可占以发脚生了编。四、陵悉生断动物竹在生却物医廉学研册究中性的应虎用悉生席动物已已在功生物行医学当的各锻个领百域中段得到宴了应粥用，跃取得抵了丰潜硕的颂成果厉。1、微霸生物献学研贞究：肢可根谎据实咬验研钱究的呜需要倾，将麻无菌每动物拥所培继育的含仔鼠催于其隔断奶跨前后血，有她目的络地喂壮给单青一的饱或多顶种的夏细菌欧，再撞来观诸察这懂些细啊菌对洒机体监的作秤用。观只有跌选用宝悉生乔动物诸，才走有可税能了科解到刷单一联微生收物和饰抗体笨之间月的关奥系。杂多种慎微生补物存幼在于润同一尖机体靠内，掠可以削观察储微生晴物与波微生洽物之赛间及辛机体弓之间买相互悄关系累和菌虾群失点调的冒现象萍。2、抗杯体制嚼备的众研究肆；3、克宣山病斤病因富学的买研究狐（镰鹊刀状摔黄曲饱霉菌柿说）辰；4、微里生物茧和寄匪生虫荷相互扇关系嘴的研舞究；5、其燥它方驴面的炼研究亏（骨款髓移跑植、低肿瘤行、病重毒学乒、免翻疫学篇、营台养代轨谢、苗外科驰的感色染控佣制等危）。第三疤节淘无特纹定病期原体痒动物一、浓无特谨定病诵原体篮动物隆的概吩念无特裳定病危原体（SP纯F）动物工是指蚕机体爸内无亩特定椅的微阁生物荣和寄僻生虫久存在货的动迎物，像但非筋特定赢的微锐生物含和寄呜生虫航是容裁许存屈在的靠。茧故邀实际悬上是直指无暗传染蛮病的挺健康口动物委。这阅类动廊物是剂目前灿国外聚使用旨最广抬泛的李实验愉动物晒。由于购用疫桐苗和涝药物沈进行馒预防慎及治蚁疗，朋或用讽淘汰买带菌淹动物趣来作社出SP雹F动物搏的方龟法并相不实克用（始既浪窜费时验间，撕又难窑保确丛除病寄原）蜜，故葵一般爱大多联先培扁育无趟菌动绍物或长悉生放动物医后，布再把而其移淘到有裹封闭倘系统攻设施鄙中去踢饲育盐繁殖托；亦眨或可卵剖腹贺取胎你后在健隔离俊屏障狼设施待中由SP怨F亲代罚动物紫抚育板，它梦不带业有对揭人或丝式动物裳本身悬致病梯的微富生物泰，但警不能漆排除炕可经厘胎盘斩屏障捧垂直扔传播购的微策生物排。为防救止由扇胎盘喝垂直骗传播歪的微甜生物妙，在混培育资无菌测动物恐和SP碧F动物皆之前护就应碌该严盲格选疯择剖音腹产瞒母体纯，该供动物贸应未负感染好上规厅定的槐各种密微生捐物和题寄生絮虫，念最好明是通际过连垄续几韵代剖碗腹来糖培育舟原种嚼无菌店动物骆，再岛培育SP劳F动物辞。“SP摔F”一词慎的含稻义是键不明坊确的洞，因诉为：1、在掌特定辰条件搜下，派“非园”病逆原体扛是可驱以成搅为病蒙原体饭的。2、有著些病真原体全目前兼缺乏革有效魔的检六查手局段。帽“SP序F”是多经年来邻使用狸的名托称。贝目前法还没览有更焰好的潮统一热的名稿称，趁所以诞仍沿慰用。魂现在有CO潮BS（经剖剂腹产灿取得沉并饲童养在申屏障段中的易）、BS（在屏清障系茂统中茶饲养做）、DF（无病影）等姜不同留名称秒，都贡是指野“SP朋F”动物菊。二、那无特域定病馆原体咐动物选的质猾量标低准由于SP觉F动物航的质态量标毫准看怨法不厘一，息所以历对动动物的功要求惑也就霞不同另。绢如歪有人互认为塞某种怒实验宴动物患没有冬某种垦病原认体，预不影阴响其五实验脂要求敲，就焦可称音为SP蛙F动物锄。亦赏有人君认为辨将常烂见的快病原盒体全宵部排简除，漏才算乱是真轿正的SP书F动物继。我邮们认明为这买两种属看法山都不烧够恰诱当，莲前者册要求煤过低师、太恨简单亮化，旋后者店又要挑求过焦高，闪复杂吨化。没有触统一纠标准诸，就通无所广适从黄。国摧外对忍动物汤的监哲测标酒准（防内容释和方解法）愁尚未鞠见公图诸于寨世，缸没有退统一哑的标软准。系如以脆小鼠界为典直型例赏子，筒综合爆英、略美、必日等买国有冒关资俊料，婶列于耻表，挖以资蒜借鉴兴。英、接美、涉日等赤国有章关实泥验小悦鼠微盆生物耍学监蝴测内烛容资料来源美日美日英英美日日美病原微生物种类

细菌性疾病沙门氏杆菌√√√√√

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√√假性结核杆菌

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病毒性疾病淋巴细胞性脉络丛脑膜炎√√

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鼠细小病毒√√

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√胸腺病毒√√

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啮齿动物腺病毒√√

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啮齿动物巨细胞病毒√

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