乙肝、HIV、梅毒检测技术

乙肝、HIV、梅毒(méidú)实验室检验技术甘肃省妇幼保健院临床检验(jiǎnyàn)中心：赵翠生第一页，共九十五页。综合(zōnghé)产前检查服务+检测孕产妇参加(cānjiā)产前检查服务检测(jiǎncè)前信息HBV检测梅毒检测HIV检测全血细胞计数和其它检测取血样2第二页，共九十五页。整理课件

梅毒(méidú)的实验室检测3第三页，共九十五页。整理课件梅毒(méidú)病原体为梅毒螺旋体，属于(shǔyú)密螺旋体属，苍白密螺旋体苍白亚种(Treponemapallidumsubspeciespallidum)

苍白亚种

梅毒

苍白螺旋体

地方亚种

地方性梅毒

极细亚种雅司病密螺旋体属

品他螺旋体品他病第四页，共九十五页。整理课件梅毒血清学试验基本(jīběn)实验室设备检方法检测样本类型必要设备血清血浆全血RPR/TRUST√√水平旋转仪TPPA√√震荡仪ELISA√√酶标仪、洗板机POCT检测√√√无需特殊设备5第五页，共九十五页。整理课件筛查时间(shíjiān)梅毒检测方法非梅毒螺旋体抗原血清学试验（RPR或TRUST检测）梅毒螺旋体抗原血清学试验（TPPA、ELISA或梅毒快速检测）检测时间第一次产检（孕早期）或下一次产检时如有必要，孕晚期再次检测此前无检测结果，则在分娩时检测6第六页，共九十五页。整理课件梅毒(méidú)的实验室检测方法显微镜检测法（诊断技术）：

（1）暗视野显微镜检查（2）镀银染色检查血清学检测法（筛查技术）

非梅毒螺旋体抗原血清试验：检测非特异性抗体(kàngtǐ)：抗心磷脂抗体、即非特异性抗体、反应素梅毒螺旋体抗原血清试验：检测特异性梅毒螺旋体抗体

第七页，共九十五页。整理课件

梅毒(méidú)早期诊断的依据之一是病原学检测，即在组织或分泌物中检测到苍白螺旋体：暗视野显微镜镀银染色镜检梅毒(méidú)检测技术8第八页，共九十五页。整理课件非梅毒螺旋体抗原血清学试验RPR（快速血浆反应素环状卡片试验）TRUST（甲苯胺红不加热血清试验）VDRL（性病研究(yánjiū)实验室试验）梅毒螺旋体抗原血清学试验TPPA（梅毒螺旋体颗粒凝集试验）ELISA（酶联免疫吸附试验）POCT（胶体金技术，快速检测、一站式检测）梅毒(méidú)检测技术9第九页，共九十五页。整理课件围产期梅毒检测(jiǎncè)方法特点

用于诊断产检、临产及分娩的孕产妇是否感染梅毒梅毒血清学检测——筛查试验应具有的特点具有较高的灵敏度和特异度操作简单、容易获得、便宜(biànyí)尽可能在“当日”获得结果10第十页，共九十五页。整理课件非梅毒螺旋体抗原(kàngyuán)血清学试验

梅毒螺旋体感染可产生非特异性抗体（非梅毒螺旋体抗体）非梅毒螺旋体抗体又称之为反应素，是抗心磷脂等抗原(kàngyuán)的抗体随菌体和宿主细胞的类脂质抗原量升高除梅毒外，其他医学情况会造成非梅毒螺旋体抗原血清学试验假阳性结果，包括结核、疟疾、妊娠和风湿关节炎、狼疮及硬皮病等自体免疫性疾病11第十一页，共九十五页。整理课件非梅毒螺旋体抗原(kàngyuán)血清学试验的特点非梅毒螺旋体抗原血清学试验：快速、简便、便宜

敏感性和特异性较高

硬下疳后1-2周变为阳性

可用于筛查样本

评估(pínɡɡū)对治疗的反应

鉴别复燃还是再次感染12第十二页，共九十五页。整理课件确保非梅毒(méidú)螺旋体抗原血清学试验

质量的关键点按照标准操作程序（SOPs）进行操作推荐使用评价(píngjià)特性较好的试剂*按照统一的标准报告结果开展实验室质控（QC）和参加室间能力验证（PT）*由中国疾病预防控制中心性病中心国家(guójiā)参比实验室提供13第十三页，共九十五页。整理课件非梅毒(méidú)螺旋体抗原血清学试验抗体滴度通常与疾病活动度有关治疗后（可能几个月）非梅毒(méidú)螺旋体抗原血清学试验通常转变为不反应如果用同一种实验，相同试验滴度4倍变化（如从1:16下降到1:4或从1:8上升到1:32）为临床显著变化有些病人，抗体滴度可始终处于较低水平，有时可持续终生（血清固定）注意：病人血清学监测应在同一个实验室使用同一种检测方法（RPR、TRUST）进行连续多次检测；RPR和TRUST方法均有效，但检测的滴度结果不能直接进行比较14第十四页，共九十五页。整理课件治疗后非梅毒螺旋体抗原血清学试验

抗体(kàngtǐ)滴度变化的临床意义一期梅毒和二期梅毒：成功治疗，抗体(kàngtǐ)滴度应3个月后下降2倍6个月后下降4倍一期梅毒：1年后抗体滴度转阴

二期梅毒：2年后抗体滴度转阴晚期梅毒：治疗后抗体滴度缓慢下降50%的病人2年后抗体滴度仍为阳性15第十五页，共九十五页。整理课件梅毒螺旋体抗原(kàngyuán)血清学试验梅毒螺旋体抗原血清学试验检测梅毒螺旋体抗原特异性抗体可用于确认非梅毒螺旋体抗原血清学试验的阳性结果，排除(páichú)其假阳性

阳性结果可持续存在，即使治疗后仍可为阳性。*梅毒螺旋体抗原(kàngyuán)血清学试验与疾病的活动度无关，不能用于鉴别现症感染还是既往感染，也不能用于判断疗效*一期梅毒治疗病人中，15%-25%可在2-3年后转为血清学阴性16第十六页，共九十五页。整理课件妊娠期梅毒(méidú)检测

所有孕产妇应进行梅毒筛查检测：

孕期尽早（如果可能，在孕早期时）以及

如果在分娩前/临产时没有筛查检测结果(jiēguǒ)，在分娩时检测筛查检测可应用以下任何一类方法：非梅毒螺旋体抗原血清学试验（滴度）或

梅毒螺旋体抗原血清学试验

所有筛查检测结果阳性的孕产妇都应用另一类检测方法进行复检确认是否为现症

梅毒

所有产妇及所生婴儿出院前，产妇梅毒检测结果都应记录在病历中，以确保需要时给予治疗17第十七页，共九十五页。整理课件孕产妇梅毒检测(jiǎncè)流程非梅毒螺旋体抗原血清学试验梅毒螺旋体抗原血清学试验孕产妇治疗后，随访监测非梅毒螺旋体抗原血清学试验非梅毒螺旋体抗原血清学试验梅毒螺旋体抗原血清学试验每3个月进行非梅毒螺旋体抗原血清学试验如果需要进行治疗报告：非梅毒螺旋体抗原血清学试验阴性报告：两种检测均阳性治疗病人报告：

梅毒螺旋体抗原血清学试验阴性报告：非梅毒螺旋体抗原血清学试验阳性梅毒螺旋体抗原血清学试验阴性报告：梅毒螺旋体抗原血清学试验阳性非梅毒螺旋体抗原血清学试验阴性阳性反应阴性反应阴性反应阳性反应阳性反应或阴性反应阳性反应阴性反应阳性反应第十八页，共九十五页。整理课件HIV感染(gǎnrǎn)病人的梅毒血清学试验一些HIV感染病人，其梅毒(méidú)血清学试验结果不典型，包括滴度超常高或超常低滴度不断变动如果临床表现提示早期梅毒，而血清学试验结果与此不一致，考虑病灶活检

或暗视野显微镜检查注意：对于大多数HIV感染病人而言，梅毒血清学试验是诊断梅毒感染、随访观察疗效准确、可靠(kěkào)的检测方法19第十九页，共九十五页。整理课件梅毒血清学检测(jiǎncè)结果的解释非梅毒螺旋体试验梅毒螺旋体试验临床参考意义+

-RPR假阳性–考虑其他医学状况*++现症梅毒-+既往感染或极早期梅毒--排除梅毒感染由于免疫缺陷，也可发生于艾滋病晚期*包括结核、疟疾(nüèji)、风湿性关节炎或妊娠。20第二十页，共九十五页。整理课件暴露(bàolù)婴儿的梅毒检测21第二十一页，共九十五页。整理课件梅毒暴露婴儿先天(xiāntiān)梅毒检测

母体非梅毒螺旋体和梅毒螺旋体IgG抗体可通过胎盘，所以应谨慎地对婴儿梅毒血清学试验结果进行解释婴儿需要接受预防性治疗还是规范的抗梅毒治疗应根据：母亲确诊梅毒感染母亲治疗情况婴儿梅毒感染的临床表现、实验室或放射线检查结果母亲及婴儿非梅毒螺旋体抗原血清学试验滴度水平的比较（尽可能在同一个实验室使用(shǐyòng)相同的试验方法）22第二十二页，共九十五页。整理课件先天梅毒(méidú)的诊断先天梅毒的诊断标准：梅毒暴露婴儿具有以下(yǐxià)条件之一：

任何先天梅毒临床表现暗视野显微镜检梅毒螺旋体阳性（+）梅毒螺旋体IgM抗体阳性*RPR/TRUST检测阳性，滴度比母亲分娩前最近一次滴度高4倍及以上RPR/TRUST监测随访中，任何一次滴度不下降或反而上升满18月龄后，TPPA检测阳性*IgM抗体反映近期感染(gǎnrǎn)，可帮助鉴别婴儿先天梅毒，但我国尚不能广泛开展23第二十三页，共九十五页。整理课件梅毒(méidú)暴露婴儿的评估梅毒暴露婴儿：婴儿RPR检测婴儿RPR检测不能使用脐带血，因其易被母体血液污染，从而出现假阳性结果检查先天梅毒临床表现：非免疫性水肿、黄疸(huángdǎn)、肝脾大、鼻炎、皮疹、末端肢体假性麻痹对可疑病灶或体液进行暗视野显微镜检查24第二十四页，共九十五页。整理课件先天梅毒检测(jiǎncè)流程

婴儿非梅毒螺旋体抗原血清学试验定量检测梅毒暴露婴儿母亲、婴儿非梅毒螺旋体抗原血清学试验定量检测（应同时进行梅毒螺旋体抗原血清学试验，用于随访诊断）组织或分泌物暗视野显微镜检，有条件进行IgM抗体检测报告母亲、婴儿非梅毒螺旋体抗原血清学试验检测滴度水平报告婴儿非梅毒螺旋体抗原血清学试验检测滴度水平报告暗视野显微镜检或IgM抗体检测结果阳性阴性没有梅毒感染的症状有梅毒感染的症状25第二十五页，共九十五页。整理课件梅毒检测(jiǎncè)小结早期梅毒诊断可根据在组织或分泌物样本中通过显微检测(jiǎncè)到苍白螺旋体而诊断应用梅毒血清学试验进行梅毒筛查非梅毒螺旋体抗原血清学试验检测梅毒感染过程中产生的非特异抗体。滴度通常与疾病的活动度有关，因此可用于监测对治疗的反应梅毒螺旋体抗原血清学试验检测对抗梅毒螺旋体抗原的特异性抗体，可用于确认临床诊断或非梅毒螺旋体抗原血清学试验的阳性结果，可反映任何阶段的梅毒暴露先天梅毒的诊断复杂，应根据：母亲梅毒感染状态母亲梅毒治疗情况婴儿梅毒感染的临床表现、实验室或X线检查结果母亲、婴儿非梅毒螺旋体抗原血清学试验滴度水平的比较随访26第二十六页，共九十五页。整理课件HIV和HBV的实验室检测(jiǎncè)第二十七页，共九十五页。HIV和HBV筛查检测(jiǎncè)筛查检测用于诊断产检、临产及分娩的孕产妇是否感染HIV和HBVHIV抗体检测乙肝表面抗原（HBsAg）检测

筛查检测应具有较高的灵敏度和特异度操作简单、容易获得、便宜(biànyí)尽可能在“当日”获得结果28第二十八页，共九十五页。整理课件何时(héshí)使用何种检测？HIVHBV检测方法

HIV快速检测和/或

ELISA

HBsAg检测如果有条件，其他乙肝

标记物检测检测时间第一次产检（孕早期）或下一次产检时此前未检测，分娩时应检测第一次产检（孕早期）或下一次产检时此前未检测，分娩时应检测29第二十九页，共九十五页。整理课件

HIV试验(shìyàn)和检测30第三十页，共九十五页。整理课件HIV检测(jiǎncè)：抗体检测(jiǎncè)

一个(yīɡè)人感染了HIV病毒后，体内将产生特异性抗体

对抗HIV病毒*HIV抗体通常在感染后4–6周出现，但也有时也会

在感染后3个月才出现从感染HIV病毒到出现特异的HIV抗体的一段时期

称为“窗口期”标准的HIV诊断检测是识别(shíbié)HIV抗体**注意：*与其他大多数疾病不同，HIV抗体没有保护性作用。31第三十一页，共九十五页。整理课件HIV抗体检测(jiǎncè)类型快速检测ELISA免疫印迹（WB）准确性灵敏度特异度非常高几乎100%>99%非常高几乎100%>99%因为特异度极高，用于检测结果不确定样本的确认试验成本++++++结果报告时间<1小时<3天<10天需要专门实验室设备否是是对检验人员技术要求高否是是32第三十二页，共九十五页。整理课件HIV检测：病毒(bìngdú)核酸检测这些检测检测HIV感染者血液或血浆中的病毒必须由经过专门培训的实验室人员操作实验室需有资质，并配备专门设备昂贵，不是针对所有人进行的常规(chángguī)检测方法PCR（多聚酶连反应法）检测HIVDNA定性检测血液中是否含有病毒，用于诊断18月龄内婴儿是否感染HIVHIVRNA定量检测病毒载量，用于监测对抗病毒治疗的反应33第三十三页，共九十五页。整理课件HIV筛查检测结果(jiēguǒ)的含义HIV筛查检测结果“阴性(-)”：受检者没有感染HIV或者受检者已经感染了HIV，但处于窗口期：3个月后再次进行检测HIV筛查检测结果“阳性(+)”：病人可能已经感染HIV,但应再次重复(chóngfù)检测、另一种方法复检或确诊检测34第三十四页，共九十五页。整理课件HIV确认(quèrèn)试验结果的含义

如果筛查检测结果(jiēguǒ)阳性，两次重复检测中1次或2次检测结果为阳性，需要进行确认试验免疫印迹法（WB）确认试验结果：-阳性，病人确认感染HIV阴性，受检者没有感染HIV不确定，结果为“不确定”，受检者必须在4周后再次采血，重复前述所有步骤进行检测35第三十五页，共九十五页。整理课件中国(zhōnɡɡuó)预防艾滋病、梅毒和乙肝母婴传播HIV检测流程在产前检查服务中开展整合的检测(jiǎncè)咨询所采用的HIV检测流程36第三十六页，共九十五页。整理课件产时HIV抗体检测(jiǎncè)流程中国预防艾滋病、梅毒(méidú)和乙肝母婴传播HIV检测流程37第三十七页，共九十五页。整理课件儿童(értóng)HIV检测38第三十八页，共九十五页。整理课件HIV暴露婴儿和儿童(értóng)的HIV抗体检测

不是所有HIV感染母亲所生儿童都会感染HIV，但是如果对12-18个月以内的婴儿进行HIV抗体(kàngtǐ)检测，所有HIV感染母亲所生婴儿都有可能是HIV检测结果阳性。

即使婴儿并没有感染HIV

由于母体自身抗体可通过胎盘进入胎儿体内母体传入的抗体可在婴儿体内持续18个月，所以12-18月龄以内的婴儿不能应用抗体检测方法进行(jìnxíng)诊断。39第三十九页，共九十五页。整理课件婴儿感染早期(zǎoqī)诊断（EID）

HIV病毒检测（DNA-PCR）HIV病毒检测（DNA-PCR）检测细胞内的HIV病毒，

能够检测低至1–10拷贝前病毒DNA，以及

可在HIV暴露(bàolù)婴儿出生后6周内诊断HIV感染

用于HIV暴露婴儿HIV感染早期诊断（EID）40第四十页，共九十五页。整理课件应用DNA-PCR方法进行

婴儿感染(gǎnrǎn)早期诊断（EID）（1）

如果可以开展HIVDNA-PCR检测，应用干血斑（DBS）在婴儿6周龄时进行PCR检测如果PCR检测结果阳性尽快再次(zàicì)采血再次(zàicì)进行DNA-PCR检测如果第二次PCR检测结果阳性，婴儿确定感染HIV如果PCR检测结果阴性婴儿出生后3个月再次进行PCR检测41第四十一页，共九十五页。整理课件应用(yìngyòng)DNA-PCR方法进行

婴儿感染早期诊断（EID）（2）出生后3个月再次进行HIVDNA-PCR检测如果PCR检测结果阳性尽快(jǐnkuài)再次采血再次进行DNA-PCR检测如果第二次PCR检测结果阳性，婴儿确定感染HIV如果PCR检测结果阴性，婴儿视为未感染HIV考虑在婴儿满12月龄时进行HIV抗体检测（如有必要，在18月龄时再次进行检测）检测(jiǎncè)结果阴性的婴儿接受母乳喂养，必须在停止母乳喂养后6周再次进行PCR检测，以确保婴儿没有在母乳喂养期间感染HIV。42第四十二页，共九十五页。整理课件婴儿HIV感染早期(zǎoqī)诊断流程43第四十三页，共九十五页。整理课件HIV暴露(bàolù)婴儿/儿童的HIV抗体检测所有HIV感染母亲所生儿童，在出生后6周或3个月未接受早期感染检测者，应进行HIV抗体(kàngtǐ)检测。检测时间：满12月龄和满18月龄（必要时，见HIV抗体检测流程）出生后3个月（接受早期感染检测者）检测结果为阴性的儿童也应接受HIV抗体检测满18月龄HIV抗体检测阳性，可确认(quèrèn)儿童HIV感染。44第四十四页，共九十五页。整理课件HIV暴露(bàolù)儿童HIV抗体检测流程45第四十五页，共九十五页。整理课件HIV感染(gǎnrǎn)的实验室监测46第四十六页，共九十五页。整理课件HIV感染(gǎnrǎn)的实验室监测实验室监测主要用于：决定开始抗病毒治疗还是预防性应用抗病毒药物是否有抗病毒治疗指征？效果监测抗病毒治疗有效吗？毒性监测抗病毒药物是否引起了其他(qítā)问题？47第四十七页，共九十五页。整理课件CD4+T淋巴细胞是HIV病毒攻击的靶细胞CD4+T淋巴细胞检测用于：决定开始抗病毒治疗还是预防性应用抗病毒药物

为判断抗病毒治疗成功或失败提供定量依据

对调整抗病毒治疗方案提供指导孕期每3个月及产后4–6周应进行(jìnxíng)CD4+T淋巴细胞检测

急性感染时可适当推迟检测，(因为在急性感染期，CD4+T淋巴细胞通常会下降）CD4+T淋巴细胞检测(jiǎncè)48第四十八页，共九十五页。整理课件病毒载量测量(cèliáng)血浆中的病毒数量病毒载量检测可用于：是抗病毒治疗失败早期、最可靠的标记物监测对抗病毒治疗的反应诊断HIV感染后和孕晚期各进行一次病毒载量检测病毒(bìngdú)载量（RNA-PCR）检测49第四十九页，共九十五页。整理课件检测检测对象原因临床指导CD4+T淋巴细胞计数所有HIV感染孕产妇基线评估是否需要抗病毒治疗抗病毒治疗：CD4<350个细胞/mm3预防应用抗病毒药物：CD4≥350个细胞/mm3全血细胞计数（CBC）所有HIV感染孕产妇AZT(叠氮胸苷）可引起贫血或白细胞计数降低如果Hb<9g/dl，不用使用AZT转氨酶所有HIV感染孕产妇如果ALT或AST升高，NVP（奈韦拉平）肝损害副作用的风险较高如果ALT/AST升高超过3倍，不要使用NVP尿肌酐所有HIV感染孕产妇如果升高，需要调整抗病毒药物的剂量需要参考各种抗病毒药物剂量说明HIV感染孕产妇常规(chángguī)实验室监测（1）50第五十页，共九十五页。整理课件检测检测对象原因临床指导血糖所有HIV感染孕产妇PI类药物可致血糖升高糖尿病人避免应用PI（蛋白酶抑制剂）类药物血脂如果使用PI类药物PI类药物可致血脂升高如果血脂升高，避免应用PI类药物梅毒血清学试验所有HIV感染孕产妇筛查是否同时感染梅毒如果梅毒检测阳性，治疗梅毒HBsAg如果需要，丙肝血清检测所有HIV感染孕产妇筛查HBV/HCV感染HBV暴露婴儿出生后24小时内给予HBV疫苗和免疫球蛋白注射；如果HBV/HCV阳性，避免使用NVP胸部X线片和/或结核皮肤试验所有HIV感染孕产妇筛查结核进一步调查如果活动结核，治疗如果必要，考虑异烟肼预防性治疗（IPT）HIV感染(gǎnrǎn)孕产妇常规实验室监测（2）51第五十一页，共九十五页。整理课件

HBV感染(gǎnrǎn)的检测52第五十二页，共九十五页。整理课件妊娠期HBV感染(gǎnrǎn)筛查标记物描述作用动力学乙肝表面抗原（HBsAg）

感染过程中位于病毒表面的蛋白血液中可检测到提示感染无法鉴别急性或慢性感染暴露后3–5周后出现，持续到感染消除

所有孕产妇均应在孕期尽早(jìnzǎo)接受HBsAg检测筛查是否感染HBV如果分娩前尚未有检测结果，应在分娩前尽快进行检测

如果HBsAg检测阳性，有条件可考虑进行其他HBV标记物检测。

注意，暴露婴儿的处置不受母亲其他HBV标记物检测结果的影响53第五十三页，共九十五页。整理课件乙肝标记(biāojì)物列表抗原/抗体解释

临床意义

HBsAg 潜在感染出现症状前数周或之后数月可检测到慢性感染时持续存在感染HBVHBeAg病毒复制，传染性高有传染性抗HBs抗体对HBV免疫（疫苗或既往感染）对HBV免疫抗HBc抗体（总）急性、慢性或既往感染暴露抗HBcIgM抗体急性感染急性感染54第五十四页，共九十五页。整理课件HBV暴露(bàolù)婴儿的实验室检测HBsAg阳性母亲所生婴儿，出生时高效免疫球蛋白应用(yìngyòng)以及接受乙肝疫苗接种，并在完成全部3剂乙肝疫苗接种后的6个月接受HBsAg和抗HBs抗体检测（即出生后12个月时）结果解释：如果HBsAg阳性并持续6个月，婴儿慢性感染

如果抗Hbs抗体阳性（>1000IU/ml），婴儿有免疫保护如果HBsAg阴性和抗HBs抗体<1000IU/ml，婴儿应再次接受3剂乙肝疫苗接种55第五十五页，共九十五页。整理课件要点(yàodiǎn)-HIV

使用快速筛查试验诊断HIV感染。筛查检测结果阳性进行确认试验以保证结果的准确性。HIV感染抗病毒治疗应根据：CD4+T淋巴细胞计数检测结果，反映HIV对免疫系统的影响HIV病毒载量检测结果，反映血液中HIV病毒的数量如果有条件(tiáojiàn)，应用PCR方法检测HIV-DNA诊断婴儿是否HIV感染儿童满12-18月龄，HIV抗体检测方可确认儿童是否感染56第五十六页，共九十五页。整理课件要点(yàodiǎn)--HBV

通过筛查HBsAg诊断HBV感染

如有条件，筛查HBsAg结果阳性，可进一步检测其他HBV标记物

HBsAg阳性母亲所生婴儿，出生(chūshēng)时接受乙肝疫苗接种，应在出生(chūshēng)后12个月接受HBsAg和抗HBs抗体检测57第五十七页，共九十五页。整理课件婴儿艾滋病感染早期诊断检测标本(biāoběn)采集、运输及保存的要求临床(línchuánɡ)检验中心：赵翠生第五十八页，共九十五页。内容

干血斑标本的采集

干血斑标本的制作

干血斑标本的保存

干血斑标本的运输

合格和不合格的干血斑

注意事项

送样单的规范(guīfàn)填写第五十九页，共九十五页。整理课件什么(shénme)是干血斑（DBS）？干血斑是直接用滤纸收集一滴全血进行干燥用于血样本的长时间储存DBS是用HIVDNA-PCR方法进行婴儿HIV感染早期诊断检测的最佳采血方法HIVDNA和HIV抗体可稳定地保存(bǎocún)在干血斑中转运方便：无需冷藏60第六十页，共九十五页。整理课件

干血斑(xuèbān)（DriedBloodSpotDBS）

使用Whatman903滤纸片，患者的全血制备末梢血直接(zhíjiē)用于DBS的制作采集用EDTA抗凝的静脉血混匀滴在滤纸片上制备DBS；

第六十一页，共九十五页。整理课件采集(cǎijí)样本所需要的设备末梢采血针或静脉采血酒精棉血样本(yàngběn)采集卡片(滤纸片可密封的塑料袋湿度指示卡干燥剂（1-2g/袋）第六十二页，共九十五页。采集(cǎijí)末梢血DBS采集(cǎijí)部位：足弓（幼儿采血点）第六十三页，共九十五页。采集(cǎijí)末梢血DBS成人或1岁以上(yǐshàng)儿童手指采血点中指或无名指手掌面，非指尖或侧面第六十四页，共九十五页。采集(cǎijí)末梢血DBS用70％乙醇或酒精棉消毒采血部位用消过毒的针头小心刺破(cìpò)皮肤第六十五页，共九十五页。整理课件采集(cǎijí)末梢血DBS弃去第一滴

末梢(mòshāo)血第六十六页，共九十五页。整理课件采集(cǎijí)末梢血DBS将第二(dìèr)滴血直接点在滤纸片中央的圆圈而不是用毛细管转移血液第六十七页，共九十五页。整理课件采集(cǎijí)末梢血DBS大约每孔需要60-80ul全血保证圆圈滴满每个样品(yàngpǐn)应点满一张滤纸片的每个孔

第六十八页，共九十五页。整理课件采集(cǎijí)抗凝静脉血DBS

静脉血充分与EDTA混合采集后立即制备DB血浆与血细胞分层的全血在制备干血斑前，应轻柔(qīngróu)地上下颠倒采血管（避免血细胞破裂），血液混匀后制备第六十九页，共九十五页。用移液枪加代滤芯枪头移取50-80ul血液枪头对准印圈的中心缓慢将血液滴于滤纸(lǜzhǐ)上避免有气泡应滴满一张滤纸片的每个孔

采集(cǎijí)抗凝静脉血DBS第七十页，共九十五页。制作(zhìzuò)及干燥DBS避免触摸或涂抹血斑室温空气中水平干燥至少4个小时，（在潮湿

气候下至少24小时）避免阳光直晒

在干燥过程(guòchéng)中不允许加热、叠加或将DBS接触其他物体表面DBS上标记受检者编号、姓名和收集日期第七十一页，共九十五页。制作(zhìzuò)及干燥DBS第七十二页，共九十五页。DBS的保存(bǎocún)方法

最好一个样本(yàngběn)一个包装，多个样本(yàngběn)一个包装时，样本(yàngběn)间用称量纸隔开放入可密封塑料袋中

加2包干燥剂

加1片湿度指示卡标记包装中的内容物并密封第七十三页，共九十五页。整理课件DBS的保存(bǎocún)方法

避免阳关暴晒和加热完整包装的DBS样品可在室温下避光(bìɡuānɡ)储存2周2周后的DBS样品必须存放在-20℃或以下

第七十四页，共九十五页。NBS的包装(bāozhuāng)及运输第一层包装好的DBS放入结实的纸袋中放入对应的送样单将上述两样放入邮寄信封(xìnfēng)中并密封第七十五页，共九十五页。NBS的包装(bāozhuāng)及运输

包装运输时避免折压滤纸片干血斑样品如果DBS样品收集后存放在室温并在2周内运送，可常温下用特快专递运送已经保存在-20℃或以下(yǐxià)的样品，应在冷冻条件下运送第七十六页，共九十五页。整理课件血液充分吸收透过滤纸(lǜzhǐ)，填满印圈，不要在一个圈上重复采血，避免触摸或涂抹血斑合格(hégé)的DBS第七十七页，共九十五页。

合格(hégé)的DBS第七十八页，共九十五页。原因：1.血液未渗透滤纸或未填满(tiánmǎn)圆圈前将滤纸移走用毛细管转移血液在取样前或后用戴手套或不戴手套的手触摸滤纸，滤纸上粘有洗手液

原因：毛细管或其他(qítā)锐器移取血液不合格(hégé)DBS第七十九页，共九十五页。整理课件样本在干燥(gānzào)小于4小时前即寄出吸附(xīfù)血液过多双面贴第八十页，共九十五页。用力挤压针刺点周围采血前或后滤纸面沾染洗手液、滑石粉、酒精、化学试剂、杀毒剂、水等将血斑直接(zhíjiē)加热在针刺之前未将采血处酒精擦干4.用毛细管转移血液滤纸沾染酒精，洗手液5.过分挤压采血处不正确(zhèngquè)地干燥滤纸第八十一页，共九十五页。同一(tóngyī)采血圈多次滴血双面贴第八十二页，共九十五页。不合格(hégé)DBS第八十三页，共九十五页。整理课件注意事项

仅在滤纸的一面采血在一个印圈上不可追加滴血采末梢血时不要将滤纸片压迫(yāpò)针刺部位采血2个充分吸附的血液的印圈要比5个不完全吸附的印圈要好第八十四页，共九十五页。整理课件早期(zǎoqī)诊断检测标本送样单

此处由标本采集(cǎijí)机构填写标本采集机构名称：

省(直辖市、自治区)

地(市、州)

县(市、区)

婴儿编号：□□□□□□—□□□—□□□□—□□□—□（同个案登记卡编号）婴儿母亲姓名：

婴儿姓名：

性别：

出生日期：□□□□年□□月□□日

采样情况：第

次采血采血时月龄

采血日期：□□□年□□月□采血人：

标本制备人：

送样人联系电话：

送样人签字标本送出日期（指标本送至辖区妇幼保健机构的日期）：□□□□年□□月□□日第八十五页，共九十五页。整理课件送样单的填写(tiánxiě)标本采集机构：婴儿编号(biānhào)共计17位（个案登记卡编号）ABCDEA：地区行政编码，共6位B：单位(dānwèi)机构代码，共3位C：年份，共4位D:个人编码，共3位E：婴儿单双胎，1位（单胎为1，双胎为2）第八十六页，共九十五页。整理课件早期(zǎoqī)诊断检测标本送样单此处由送检妇幼保健机构填写标本送检机构名称：

省(直辖市、自治区)

地(市、州)

县(市、区)

妇幼保健院(所、中心)标本序号（前四位为年份，