艾肯菌的分离与鉴定

关于艾肯菌的分离与鉴定第1页，讲稿共32页，2023年5月2日，星期三

苛养菌(fastidiousmicroorganism)是一类生长需要特殊营养物质的细菌，与许多感染性疾病有关，其分离培养较为困难，由这些菌引起的感染发病率一直难以估计。因此，对苛养菌的分离鉴定和药敏试验不仅是临床迫切的需要，同时也是衡量一个细菌室技术水平的重要标志。第2页，讲稿共32页，2023年5月2日，星期三

其中“HACEK”细菌群生长缓慢且需CO2环境，所致感染有相关性。此群苛养菌系人类口腔、呼吸道、泌尿生殖道的正常菌群，在一定条件下可引起严重感染。H代表嗜血杆菌属(Haemophilus)；A代表放线杆菌属(Actinobacillus)；C代表心杆菌属(Cardiobacterium)；E代表艾肯菌属(Eikenella)；K代表金氏菌属(Kingella)。第3页，讲稿共32页，2023年5月2日，星期三

1.概述腐蚀艾肯菌（Eikenellacorrodens）系人类口腔及泌尿生殖道的正常菌群，是苛养菌群中的慢速生长菌，在一定条件下可引起严重感染，主要引起细菌性心内膜炎、菌血症和混合性细菌感染（尤其在人咬伤感染标本中多见）。第4页，讲稿共32页，2023年5月2日，星期三

腐蚀艾肯菌是艾肯菌属中的唯一菌种，属奈瑟菌科。腐蚀艾肯菌是人类粘膜表面固有菌群的一部分，经常从上呼吸道标本中分离出该菌，也可从胃肠道或泌尿生殖道标本中分离到，通常不致病，只形成带菌状态。当机体免疫力下降或粘膜表面破损时，此菌进入周围组织引起感染。第5页，讲稿共32页，2023年5月2日，星期三

腐蚀艾肯菌可引起人类的多种感染，如软组织脓肿、中耳炎、鼻窦炎、肺炎、心内膜炎、脑膜炎、败血性关节炎及术后感染等，但该菌常与其他细菌一起引起混合感染，此类感染常发生在头颈部或腹部。在人咬伤感染标本中经常分离到此菌。第6页，讲稿共32页，2023年5月2日，星期三2.镜下形态取菌落涂片，革兰染色后镜下见到无芽孢的革兰阴性多形态小杆菌。第7页，讲稿共32页，2023年5月2日，星期三第8页，讲稿共32页，2023年5月2日，星期三第9页，讲稿共32页，2023年5月2日，星期三3.生化特性触酶试验阴性，氧化酶试验阳性，靛基质及尿素酶试验阴性，硝酸盐还原试验阳性，鸟氨酸脱羧酶阳性，葡萄糖O-F阴性。第10页，讲稿共32页，2023年5月2日，星期三4.培养特性腐蚀艾肯菌是兼性厌氧菌，对营养要求较高，初代分离需要氯化血红素，在含3%~10%CO2的环境中生长良好。腐蚀艾肯菌不能在MH、HTM、营养琼脂及中国兰琼脂平板上生长。有文献报道，再添加了5mg/L克林霉素（或5mg/L氯洁霉素）的选择性培养基上可显著提高腐蚀艾肯菌的分离率，但要注意应与常规培养基一起使用，以免将其他致病菌丢失。第11页，讲稿共32页，2023年5月2日，星期三5.菌落特征在5%羊血琼脂平板上经24h培养后，可形成针尖大小的菌落。第12页，讲稿共32页，2023年5月2日，星期三第13页，讲稿共32页，2023年5月2日，星期三

培养48h该菌是没有形态特点的(形成光滑、湿润、圆形、半透明的小菌落)，不易与其它细菌相区别。第14页，讲稿共32页，2023年5月2日，星期三第15页，讲稿共32页，2023年5月2日，星期三

经过72h以上培养后方呈现出该菌的典型菌落形态特征来，即较干燥、扁平、中心凸起、有扩散生长边缘的菌落。第16页，讲稿共32页，2023年5月2日，星期三第17页，讲稿共32页，2023年5月2日，星期三第18页，讲稿共32页，2023年5月2日，星期三

典型形态一：经96h培养后，在5%羊血琼脂平板上呈干燥、扁平、圆形、透明、中间突起、边缘呈扩散生长、直径2~4mm的斗笠样菌落。第19页，讲稿共32页，2023年5月2日，星期三第20页，讲稿共32页，2023年5月2日，星期三

典型形态二：经96h培养后，在5%羊血琼脂平板上呈扁平、圆形、表面粗燥、半透明、中央凸起、边缘呈扩散生长、直径2~4mm的草帽样菌落。第21页，讲稿共32页，2023年5月2日，星期三第22页，讲稿共32页，2023年5月2日，星期三

典型形态三：经96h培养后，在5%羊血琼脂平板上呈光滑、圆形、半透明、中央突起、直径1~3mm的菌落。第23页，讲稿共32页，2023年5月2日，星期三第24页，讲稿共32页，2023年5月2日，星期三

形态四：经96h培养后，在5%羊血琼脂平板上呈光滑、圆形、半透明、淡黄色、直径2~3mm的菌落。第25页，讲稿共32页，2023年5月2日，星期三第26页，讲稿共32页，2023年5月2日，星期三

培养时间较长时菌落周围培养基可呈草绿色，用棉签抹取菌苔可见黄色。该菌的纯培养物有一种类似发霉的口腔菌群的特殊气味。以上特点应在实际操做中加以注意。第27页，讲稿共32页，2023年5月2日，星期三第28页，讲稿共32页，2023年5月2日，星期三第29页，讲稿共32页，2023年5月2日，星期三6.耐药性腐蚀艾肯菌对克林霉素天然耐药，但对其他如青霉素类、头孢菌素类、碳青霉烯类、喹诺酮类、四环素类、氨基糖甙类、大环内酯类、氯霉素类、复方磺胺等抗生素多呈高度敏感。菌株A1655对庆大霉素、红霉素、克拉霉素耐药，提