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高效液相色谱法第一节概述高效液相色谱法(HPLC)是60年代末以经典液相色谱法为基础,引入了气相色谱的理论与实验方法,流动相用高压泵输送,采用高效固定相和在线检测等手段发展而成的分离分析方法。与相色谱法相比具有:适用范围广,样品预处理简单,分离效率高,流动相选择范围广,检测方法多为非破坏性的,流出组分可回收等优点。液-固吸附液液分魔正相色谱般反相色谱反相色谱离子对色谱键离子抑制色谱合般离子交换色谱相色离子交换色谱离子色谱谱PLC氨基酸分析凝胶渗透色谱空间排斥色谱凝胶过滤色谱胶束色谱假相色谱环糊精色谱亲合色谱,手性色谱,毛细管电泳正相色谱(normalphase)流动相极性小于固定相极性的分配色谱法称为正相分配色谱。常用的分析柱有氨基柱、氰基柱、硅胶柱常用流动相为极性小的有机溶剂反相色谱(reversedphase)流动相极性大于固定相极性的分配色谱法称为反相分配色谱法。常用的分析柱有ODS(C常用流动相为甲醇-水,乙腈-水离子抑制色谱(ionsuppressionchromatography)调节流动相的pH值抑制组分的解离,增加组分在固定相中的溶解度,改善峰形,以达到分离有机弱酸和弱碱的目的。离子对色谱(ionpairchromatography)将反离子加入流动相中,与呈解离状态的被测物作用,生成脂溶性的中性离子对络合物从而增加了被测物在非极性固定相中的溶解度,改善分离效果,达到分离目的。常用反离子有:季铵盐用于酸类烷基磺酸盐——用于碱类离子色谱法(ionchromatography)离子色谱是由经典的离子交换色谱发展起来的一种液相色谱技术,利用物质在离子交换柱上迁移的差异而达到分离,用于亲水性阴阳离子的测定根据是否采用抑制柱,可分为抑制型离子色谱和非抑制型离子色谱。空间排斥色谱(stericexclusion~)也称凝胶色谱,依据被分离组分分子尺寸与凝胶空径大小之间的相对关系而分离,类似于分子筛作用。在一定分子线团尺寸内,分子越大,保留时间越短。凝胶渗透——以有机溶剂为流动相凝胶过滤—以水溶液为流动相对于相同化学组成的高分子化合物,其分子尺寸大小与分子量成正比,因此凝胶色谱可以研究高分子化合物的分子量分布。胶束色谱(micellarchromatography)表面活性剂在水中超过某一浓度(临界浓度)时,多余的表面活性剂不再溶解,聚集而成胶束(胶粒)以胶束分散体系为流动相的色谱法称为胶東色谱法。它的流动相为胶束多相分散体系,不是真溶液;流动相中不含有机溶剂。因胶束色谱法的流动相是多相分散体系,在整个色谱体系中又增加了一相,故也被称为假相色谱(pseudophasechromatography)手性色谱(chiralchromatography)用于分离手性药物对映体的一种有效技术,可分为直接法和间接法两类直接法手性固定相法(chiralstationaryphase;CSP手性流动相法(chiralmobilephaseadditive,CMPA)间接法一手性试剂衍生化法

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