琼脂糖凝胶电泳完整整理版教学课件

琼脂糖凝胶电泳完整整理版11、不为五斗米折腰。12、芳菊开林耀，青松冠岩列。怀此贞秀姿，卓为霜下杰。13、归去来兮，田蜀将芜胡不归。14、酒能祛百虑，菊为制颓龄。15、春蚕收长丝，秋熟靡王税。琼脂糖凝胶电泳完整整理版琼脂糖凝胶电泳完整整理版11、不为五斗米折腰。12、芳菊开林耀，青松冠岩列。怀此贞秀姿，卓为霜下杰。13、归去来兮，田蜀将芜胡不归。14、酒能祛百虑，菊为制颓龄。15、春蚕收长丝，秋熟靡王税。分子生物学实验技术专题凝胶电泳技术·琼脂糖凝胶电泳·聚丙烯酰胺凝胶电泳分子杂交技术SouthernblotNorthernblot质粒提取、细菌总DNA提取电泳技术简介◆什么是电泳技术?电泳法,是指带电荷的供试品(蛋白质核苷酸等)在惰性支持介质(如纸、醋酸纤维素、琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等)中,于电场的作用下,向其对应的电极方向按各自的速度进行泳动,使组分分离成狭窄的区带,用适宜的检测方法记录其电泳区带图谱或计算其百分含量的方法。如何认识新课标倡导的“问题情境—建立模型—解释应用和拓展”这一教学模式中的“问题情境”？对于这个话题，已有多年教学经验的学员进行了热烈的讨论，亦可称为是对该问题的一场辩论，下面结合在平时听课中整理的问题情境的片段，谈谈对有效创设问题情境的一点认识与大家共勉。一、创设问题情境的案例（教学实录稍有整理）师：大家思考一下，如果一个三角形的两条边长分别为6和8，第三边长确定吗？生：不确定。师：你能说出它的范围吗？生：第三边长大于2且小于14。师：如果告诉你这两条边的夹角，那么第三边长确定吗？你能求出它的长吗？生：（讨论）确定！但不会求。师：如果告诉你这两条边的夹角是90°，请你画图先测量一下第三边的长度，再想办法验证。（以下略）二、案例中创设问题情境的分析勾股定理是欧式几何中最重要的定理之一，执教者抛弃了教材中从古希腊邮票引入课题的情境，而是从数学内部知识间的联系出发创设了一个思维情境，把学生已有的知识与新学知识的联系点作为教学的出发点，遵循从特殊到一般，从具体到抽象的认知规律，逐步把学生的思维空间进行延拓从而实现教学目标。应该说这种创设情境的方式能体现“数学味”，设计较好但应注意学生的数学基础素质。从课堂教学效果看，由于学生的基础素质较低，对教师的很多问题是“启而不发”，课堂教学仿佛就是在完成教案。三、对于数学课堂教学中创设问题情境的几点思考（一）什么是问题情境，问题情境创设的目的是什么？1.我们在教学中常讲的问题情境可以从教师和学生两个方面来理解，首先从教师方面讲问题情境是教师为实现教学目标而精心设计的客观条件，如提供学习材料、组织实践活动、引导学生思考、创设学习氛围进而促使学生产生积极探究的状态等。从学生方面讲问题情境为学习应用新知识而已储备的主、客观的条件，如已有的生活知识经验、学习时的情感态度、师生之间及生生之间的交往等。2.问题情境的创设是为有效展开学习服务的。教师所创设的数学问题情境应以思维为核心，以情感为纽带，通过各种符合学生数学学习心理特点的情境问题，把学生的数学认知和情感结合起来从而实现教学目标。（二）从教师方面谈问题情境创设的要求1.问题情境创设的最重要因素是应具备有效性。所谓有效可以从下面两个方面来理解，一方面问题情境的素材要有针对性，必须针对学生身心发展的规律，结合学生已有知识经验和教材内容进行全面、科学的分析；另一方面，问题情境要有问题性且导向明确，问题情境必须为教学服务，在数学课堂教学中情境又必须为问题服务，因为问题是数学的心脏。创设数学情境的实质不在于它本身是不是多姿多彩，而应关注它是否有利于诱发学生提出数学问题，有利于使学生的思维趋向于某一确定的方向，而不是让学生感到力所不及，从而失去继续探究学习的愿望。2.趣味性与数学味相结合。兴趣是最好老师。著名心理学家希尔博士说过：人与人之间只有很小的差异，但这种差异往往造成巨大的差异。人与人之间很小的差异是指对事物有无兴趣，巨大的差异就是学生今后的发展。学生对学习有浓厚的兴趣，是其获取知识的最大动力。教师可通过情境把问题设在学生有疑之处，这样的问题才能引起学生的认知冲突，激发学生探究的兴趣。而问题一旦得以解决，学生就会有“柳暗花明”的感觉，有极大的成就感，从而激起进一步探究的欲望。在注重情境的趣味时决不能忽略数学教学的目的。时常可以看到一些教师的课堂上气氛热烈，学生趣味浓厚，但数学味少了，弱化了数学的本质知识与技能教学，把数学课搞得不伦不类，丢了西瓜捡了芝麻。（三）问题情境设计与运用中应注意的问题1.防止过重关注现实生活情境。一般问题情境可分为三类：一是真实的问题情境，二是虚拟的问题情境，三是个体头脑想象中的问题情境。有些教师片面理解课标中“数学教学，要紧密联系学生的生活实际”，挖空心思使每堂课都带有所谓的现实生活情境，忽视了情境创设的有效性，结果产生了许多形似神离的问题情境。数学学科有其自身的特点，并不是所有的数学知识都源于现实生活，数学问题情境不能过度关注现实生活情境。2.创设民主、和谐的师生关系，让学生在问题情境中敢发问。心理学研究表明，学生在民主、和谐的环境中学习，有利于解放思想，焕发自尊、自强和自我实现的需要，使学生敢于质疑，形成问题意识与习惯。在课堂教学中教师可以引导学生对同一个问题发表自己的见解，在加深对问题理解的同时要体现大家的互相合作。有时学生的观点是不完善的，甚至是可笑的，但这确实是重复着某些数学知识发现的历程，他们在体验知识的发现过程中经历着思维探索，强化了思维、分析和语言表达等能力。美国著名的教育家波利亚曾经说过：“教学必须为发展做准备，或至少给一点发明的尝试。无论如何，教师不应该压制学生中间发明的萌芽”。总之，一种思想与另一种思想的交换使得每个人得到了两种甚至两种以上思想。参加关于创设问题情境的大讨论引发了我上述思考。显然，创设有效的问题情境已成为数学教学的一个焦点，是实施有效教学的一种策略，而教学又是一门永无止境的艺术。大家的共识是：只要是有利于学生学习数学的思考，有利于实现教学目标、有利于培养学生创新精神的问题情境都是好的问题情境。要想做一名合格的体育教师，我认为应做好以下几点：一、热爱体育教学工作我认为这是做一名合格的体育教师的前提条件，随着教师的日益增多，体育行业的竞争也是日益激烈，而有的学校的教学条件很一般，尤其是出生在城市的老师，这样就会给体育老师特别是新教师在心理上造成打击，觉得“英雄无用武之地”，慢慢形成得过且过的懒散心理，出现放羊式的教学现象，如此的恶性循环只会让我们体育教师的教学质量越来越差，教学水平停滞不前。所以作为体育教师要坚持自己的信念，勤勤恳恳地工作，更多地和学生沟通、交流，从中发现体育教学中的乐趣，进而感受到这个职业的美好和快乐，从而提高教学水平和教学质量，培养出一批批的体育人才。二、有较高的指导水平体育教师伴随着教学的全过程，成为一种感性的潜移默化的内在力量，从知、情、意几方面影响着学生的成长。教师必须精通体育知识及相关学科的基本知识，正确熟练地掌握运动技术和战术。因而教师的学习也是无止境的。例如：从事篮球教学的教师应当通晓篮球运动的发展史、比赛知识、技战术、场地器材设备、规则裁判方法及其修改变化。要成为合格的体育教师，还应当了解生理学、解剖学、心理学、教育学体育理论、生物学、体育测量与评价等学科的基本知识及其发展。美国学者麦克洛瓦诺对当代体育师资提出新的观点，他说，体育教师不再是传统概念的体育教师，而必须扩大领域，掌握各种知识，适应各种需要。三、了解学生、走进学生体育教师要了解学生，对学生的家庭情况、性格特点、兴趣爱好、体育技能、生活习惯等方面了如指掌。热心帮助他们找到体育学习成绩不好的原因，特别是心理的障碍，为他们设置明确、具体、现实、可测的目标，制定出实现目标的方法、途径，指导他们的体育锻练，发展他们的体育能力。要经常给他们进行测试，以获得他们肯定的自我意象和体育学习的信心。对体育差生要有针对性地合理安排教学，让他们能体验到体育成功和肌肉锻练的乐趣，并要加强课内外的技术辅导，因人而异地布置“体育家庭作业”利用各种机会进行补差。对体育差生不能歧视，更不能对他们的缺陷和问题进行讽刺、讥笑和人身污辱，同时对他们也不能放松要求。要加强他们的意志品质训练，克服娇、懒、软、怕的不良习惯，养成自我严格要求、不怕吃苦的好品质，磨练出坚强、果断、顽强和坚忍的良好性格。四、要善于调动学生的积极性上课是教与学两者构成的一个整体。若教师不能善于启发调动学生学习的积极性，想使教学达到预期的目的是很难设想的。在体育教学中，如何提高学生学习的积极性，不仅是教学原则问题，而且也是教师教学艺术问题。怎样有效地调动学生的积极性，首先要让体育课的组织变化多样。不同的教材内容有不同的组织方法，整堂课的组织要严谨新颖，教材内容的搭配要多样化。从开始上课到整队，甚至进入准备活动和基本内容这一系列的组织都要进行周密的考虑。从队形的调动、场地的布置、器材的摆放都要新颖多变清晰，使学生一看就想练，激发锻炼的积极性。此外要根据学生的心理特点和体育课的本身特点，在教学中尽量使枯燥的教材通过竞赛和游戏提高学生学习的积极性，活跃锻炼情绪。教师要努力钻研教材，改进教法，认真备课，讲解生动、示范正确、语言形象等都会调动学生学习的积极性。五、要精讲多练体育教学不仅要教会技术动作，让学生掌握正确锻炼身体的方法，而且还要让学生懂得一定的体育理论知识，因此教师的讲解、示范和学生的动作练习都是完成教学任务的重要手段。教学任务完成的好与坏，教学质量的优与劣，很大程度上取决于是否能够真正做到精讲多练。因此教师必须对大纲要求、教学内容合格技术动作进行全面细致地分析和研究，并加以提炼加工，为精讲多练打好基础。教学时，突出重点抓住关键，教学安排要质重于量，练多于讲，切实做到精简多练。六、及时做好教学反思教师成长过程中知识结构包括理论性知识和实践性知识，两者都至关重要，关于理论性的一般性知识，可以在传统的教学书籍或他人的文章中获得。但对于教师教育教学技能的提高来说，更为重要的是实践性知识，而这类知识的获得和改善，只能靠教师对自我实践的反思，靠他人的传授或给予是不可能的，因此可以说，反思是教师专业发展的重要基础，是非常重要的，理论和实践的研究表明，教学反思对教师专业的成长有着重要的作用，美国心理学家曾提出教师的成长公式是“经验+反思=成长”；我国心理学家林崇德也提出“优秀教师=教学过程+反思”的成长公式。由此也可以看出教学反思的重要性。综上所述，要想成为一名合格的体育教师，必须要认清学校当前形势，努力从自身做起，改变落后的教学观念和简单的教学方法，树立“健康第一”的指导思想，以学生发展为中心，关注每一位学生的健康成长，根据学校具体情况，灵活安排教学内容和教学方法，从而提高体育教学成绩。分子生物学实验技术专题凝胶电泳技术·琼脂糖凝胶电泳·聚丙烯酰胺凝胶电泳分子杂交技术SouthernblotNorthernblot质粒提取、细菌总DNA提取电泳技术简介◆什么是电泳技术?电泳法,是指带电荷的供试品(蛋白质核苷酸等)在惰性支持介质(如纸、醋酸纤维素、琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等)中,于电场的作用下,向其对应的电极方向按各自的速度进行泳动,使组分分离成狭窄的区带,用适宜的检测方法记录其电泳区带图谱或计算其百分含量的方法。电泳技术的分类◆电泳法可分为自由电泳(无支持体)及区带电泳(有支持体)两大类。◎自由电泳包括Tise-leas式微量电泳、显微电泳、等电聚焦电泳、等速电泳及密度梯度电泳电泳(薄膜及薄板)、醋酸纤维薄膜电泳、非凝胶性支持体区带电泳(支持体有:淀粉,纤维素粉,玻璃粉,硅胶等)、凝胶支持体区带电泳(琼脂、琼脂糖、淀粉胶、聚丙烯酰胺凝胶)等。凝胶电泳技术」琼脂糖凝胶电泳聚丙烯酰胺凝胶电泳琼脂糖凝胶电泳:实验原理◆琼脂糖是由琼脂分离制备的链状多糖。其结构单元是D-半乳糖和3.6-脱水-L-半乳糖。许多琼脂糖链依氢键及其它力的作用使其互相盘绕形成绳状琼脂糖束,构成大网孔型凝胶。其本身不带有电荷。因此该凝胶适合于免疫复合物、核酸与核蛋白的分离、鉴定及纯化CHOHHOD半乳糖3,6-脱水一L一半乳糖琼脂糖凝胶电泳:实验原理◆DNA分子在碱性缓冲液中带负电荷,在外加电场作用下向正极泳动。◆DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时,有电荷效应与分子筛效应。不同DNA的分子量大小及构型不同,电泳时的泳动率就不同,从而分出不同的区带。DNA分子的迁移速度与相对分子质量的对数值成反比关系。凝胶电泳不仅可分离不同相对分子质量的DNA,也可以分离相对分子质量相同,但构型不同的DNA分子。琼脂糖与琼脂的区别◆琼脂是由琼脂糖(agarose)和琼脂果胶agaropectin)组成的。琼脂糖的结构单元是D半乳糖和3.6-脱水L-半乳糖;琼脂果胶是由许多更小的分子组成的异质混合物。它们的结构相似,但琼脂果胶带硫酸根和羧基组分,凝胶能力差在琼脂糖制备过程中需要把琼脂果胶尽量去除,否则琼脂糖有可能存在极微量硫酸根和丙酮酸取电离基团,就会造成电内渗,电内渗对质点的移动产生影响。质量较好的琼脂糖硫酸根含量比较低,通常在0.2%以下,电内渗比较小,通常在0.13%以下·简言之,琼脂糖是从琼脂中精细提取的,有自身独特的性质,所以琼脂糖要比琼脂贵得多。琼脂糖凝胶电泳特点优点缺点·因不含硫酸根和羧基,几乎消机械强度差,易破碎,浓度除了琼脂的电渗不能太低·对蛋白质吸附极黴,故无拖尾易被细菌污染,不易保存,现象。临用前配制·凝胶结构均匀,孔径较大,可琼脂糖支持层上的区带易于用来分离酶的复合物、核酸扩散,电泳后必须立即定病毒等大分子物质。染色透明度较妤,可直接或千燥成与PAGE相比,分子筛作用小薄膜后进行染色区带少·不吸收紫外光,可直接利用紫外光吸收法作定量测定·有热可逆性琼脂糖凝胶的配置根据电泳需要,配置合适浓度的电泳及制胶缓冲液。一般