基因表达和基因重组_第1页
基因表达和基因重组_第2页
基因表达和基因重组_第3页
基因表达和基因重组_第4页
基因表达和基因重组_第5页
已阅读5页,还剩95页未读 继续免费阅读

下载本文档

版权说明:本文档由用户提供并上传,收益归属内容提供方,若内容存在侵权,请进行举报或认领

文档简介

基因重组和基因工程

GeneticRecombinationandGeneticEngineering第十四章概论基因重组:不同的DNA分子间发生共价连接形成重组DNA分子。重组DNA质粒DNA基因片段重吃组针D索N刻A姨技猜术季发啄展匀史p热S适C讯1齿0时1E昼c躁o周R辜IB播o胳y堤e宏r描和洞C丸o障h挖e舍n臣的慌实剑验B昏o奥y吧e享r长和你C园o翅h波e堡n活的宁实倚验p允R6蛙-蠢5大陕肠返杆弃菌p惩S泡C庄1华0炮1p肤R6吩-家5抗诉四酱环宵素抗命卡蚂那塞霉刺素E姿c任o哀R奔I抗触卡竿那络霉染素姜基弄因D雷N君A膀连称接汪酶重驳组煮D轻N激A姿分梦子培牧养沾平础皿四环素平板卡那霉素基因四环素\卡那霉素基因大芒肠古杆仿菌人膏体集生很长荡激响素掏释裙放误激念素但(悟S冻S朋)抑则制才和凭调显节煮多承种烘激苦素蜻的衫作啄用从仍动狠物宵脑戒中蓄提探取塞:5穴m羽g倒-孙-狗-5钳0牌万身只技羊强脑基哈因边工伞程9槽升炒大搁肠基杆牧菌培助养主液S拣S齿基近因基券因毯载叉体重耳组笑体分切接转筛表S食S第时一匆节D才N悉A的璃重梯组D洒N炼A垮R请e坝c蛙o纺m走b蝇i须n给a壳t黑i插o罚nD驾N搭A费重缩慧组接夕合喘作销用新(想c劳o玻n革j泼u璃g球a膝t池i辈o饭n泊)转录化龙作强用滚(未t刃r携a督n辩s票f凑o章r戚m削a戚t袖i尤o分n呀)转由导霉作哗用黎(攀t枯r悠a马n答s饼d似u叨c抓t辫i妨o授n饮)转阿座换(滤t勉r疤a德n猫s焦p钥o茄s层i东t继i碎o肆n烧)同赖源产重旁组舌(借h庸o桶m液o息l筝o帆g芹o谦u社s范r楼e悼c店o丙m愁b稳i忽n泉a筋t盘i处o皇n称)位叼点庙特瓣异私的帅重货组典(故s利i浆t猾e茫-都s腿p聋e廉c层i筒f赛i壳c锈r苍e肠c疑o游m妻b康i利n牧a刻t炎i段o弦n住)发济生雀在振同甩源艇序双列泰间迅的急重偷组棕称乡丰为备同乞源共重渣组方(晚h毒o炼m迅o越l房诚o舌g床o折u觉s围r愉e坚c课o池m友b老i飘n致a勤t绵i阻o大n塌)恢,朴又贪称局基游本割重拉组滩。思是疑最价基嘱本腊的副D越N泛A房诚重傲组钱方帝式顶,果通迎过方链晌的臂断狂裂订和炮再默连快接沫,绍在陶两润个唐D中N摄A政分依子抓同刺源帖序纯列胞间苍进约行弦单江链纵或拴双趣链桶片咬段派的州交填换英。一片、集同恰源办重核组二陕、究细赵菌恋的桂基困因奋转筐移弄与旷重熄组(馋一题)牌接逝合滑作触用当烤细溪胞宁与留细眠胞保、枪或厌细语菌钳通强过质菌可毛机相唱互油接见触度时摊,服质冤粒汇D奸N花A轧从邪一筋个椒细君胞拴(食细鞋菌犁)油转袜移元至布另恭一芦细柿胞哈(指细穷菌泛)界的吴D带N岂A自转咱移盆称衣为屿接撕合吊作神用匙(跟c绒o厘n域j除u湖g半a兰t数i窄o案n厘)掘。可前接扑合评质蹦粒骑如露F烈因支子治(贴F接f贫a顷c讨t山o积r知)质镜粒—逢—细水菌狂染歪色让体街外老的欲小扮型足环渔状旧双挣链阁D拘N狐A住分疑子(波二列)婚转联化缎作连用通惊过唱自粪动聚获塔取抵或畏人给为粗地筐供柜给艺外社源晨D遣N箭A吃,陕使再细苦胞胜或谅培急养水的蒸受伐体伙细稿胞醋获戏得犬新挤的裳遗亩传遮表陵型迈,注称旅为等转汪化抓作司用限(谨t夫r滔a恰n溪s提f悦o稀r浓m员a围t只i防o量n为)氧。例咬:受溶淡菌宴时岛,排裂蹦解革的皮D弊N凭A搬片凯段坚被倡另关一控细尝菌申摄苹取钓。(州三舍)狐转启导影作殿用当欺病电毒满从朴被觉感锐染蛙的堂(执供摄体虚)持细花胞工释安放通出添来洲、糠再位次蚊感浪染改另抛一飞(嘴供裁体礼)这细蚁胞蒙时俊,陪发梢生泡在迟供选体杀细衫胞冬与厨受窄体掠细胀胞贩之让间馅的贷D两N啄A林转解移钥及渠基晴因托重葱组域即民为素转午导械作承用旁(鞭t她r绸a洁n殊s躲d污u恐c吉t腾i星o漫n慰)摔。λ胆噬琴菌微体伟的志生垄活成史溶饲菌宴生率长总途出径(ly餐s格i贯s觉p折a枝t霜h驾w伶a谎y挽)溶梅源钉菌油生神长织途秒径(热l酷y询s辫o风g申e圣n隶i宾c封p环a芦t掏h趴w剂a议y箩)例第诊二缝节介重贵组D裂N妻A技援术D土N绘A叹R佩e志c茎o廊m本b泻i佳n窃a仇t百i电o女n筑T蕉e晋c满h石n患i凝q维u恋e相挎关膏概专念D择N捆A惊克真隆工唤具培酶目荡的缓基借因基婶因焰载依体基雕本瓜原痛理重暖组托D滔N德A谋技办术绕与位医已学且的甚关敲系本痛节洗主晴要寨内赠容一洒、任重夜组承D药N刑A惭技效术枯相死关紫概塌念克驰隆求(与c唤l质o雨n垂e鼻)来枯自跟同兆一端始乘祖刻的写相倚同绸副别本滚或硬拷岗贝秆的基集灭合待。获椒取朱同砖一西拷们贝滚的店过摄程当称泳为克驻隆顷化(题c思l料o施n报i灿n锡g摇),膀即无嘴性检繁米殖。(你一伙)宋D领N荣A翁克苦隆技晚术拘水负平率:分骂子言克偏隆阳(刮m善o尺l顷e物c鼓u昏l菊a障r踢c畏l稀o扛n揉e慰)即D膝N箱A第克辜隆细财胞古克滥隆个浅体粮克妨隆的(诱动油物公或腹植斯物臂)D度N肚A减克乎隆应摇用板酶籍学晌的务方丛法诸,原在饿体啊外溜将络各题种辜来榜源筋的格遗漆传怨物裁质废(屯同邪源责的跑或抚异棕源辽的衬、伍原界核抹的糖或遇真漂核奥的系、拾天物然灾的碎或肥人键工扇的羡D浇N敌A弦)结与围载前体京D待N架A亏接然合防成掀一蛛具躲有劲自姻我冰复虹制机能索力获的伐D窗N冬A宪分劣子捏—坊—谨复及制因子哄(炭r岔e监p败l孩i负c脏o兄n稀)降,喇继召而躬通夏过剖转蚁化霜或武转批染泪宿恰主旷细蔬胞南,获筛厘选堂出肺含艇有判目烟的燥基捧因悉的羽转测化良子蜜细下胞大,粥再父进搅行乒扩岩增猫提畏取蔬获信得甩大豆量逐同喊一粘D遮N盯A坦分虫子森,仪也省称基凭因浑克尖隆您或魄重龙组敏D腾N诊A馒(烟r即e忆c剑o返m禾b味i慕n症a谎n览t雷D斑N平A方)。生暖物栗技诊术捷工热程滑:基企因堤工仇程斧、据蛋铅白永质宿工愧程传、别酶购工刊程景、逢细雹胞王工政程巧等目灯的①岁分纲离永获械得测某层一渗感告兴竖趣谷的刮基忘因还或盾D存N昌A②弯获胁得注感丙兴寸趣道基臭因墓的项表选达傍产文物自(喝蛋父白占质仙)基签因膜工邀程钻(辣g脸e棕n必e丢t访i魔c湾e余n蛋g踩i哀n酬e闲e烫r任i乡丰n担g破)—载—或实治现送基晒因声克丢隆怨所鞭用溪的钳方选法予及攻相在关志的禽工奶作恋称内基早因题工寄程犹,骆又革称重师组躺D肉N饭A磨工额艺圆学。(铁二裙)崖工珍具栏酶限店制替性填核挪酸改内爸切半酶D袍N达A伯聚肌合舱酶邻Ⅰ逆篇转列录杏酶T矩4范D夸N州A执连愈接幕酶碱针性该磷沈酸坏酶末填端掌转量移退酶T批a抱qD续N磁A桌聚袭合错酶重虾组铺D扶N气A瞧技右术皆中惊常朱用照的斑工敏具虹酶工具酶功能限制性核酸内切酶识别特异序列,切割DNADNA连接酶催化DNA中相邻的5´磷酸基和3´羟基末端之间形成磷酸二酯键,使DNA切口封合或使两个DNA分子或片段连接DNA聚合酶Ⅰ合成双链cDNA分子或片段连接缺口平移制作高比活探针DNA序列分析填补3´末端Klenow片段又名DNA聚合酶I大片段,具有完整DNA聚合酶I的53聚合、35外切活性,而无53外切活性。常用于cDNA第二链合成,双链DNA3末端标记等反转录酶合成cDNA替代DNA聚合酶I进行填补,标记或DNA序列分析多聚核苷酸激酶催化多聚核苷酸5´羟基末端磷酸化,或标记探针末端转移酶在3´羟基末端进行同质多聚物加尾碱性磷酸酶切除末端磷酸基限睛制愉性羞核柄酸易内外切行酶定野义限蜂制锡性糖核耽酸滋内牢切驳酶(江r颗e走s敬t余r纯i蹲c稼t成i图o剩n川e立n铅d君o孝n灶u迁c继l柳e遣a死s绒e报,俭R嫁E样)是识怖别插D浊N饥A撒的份特眉异闯序垮列沿,透并昼在篇识悟别光位翁点庆或较其伴周膊围存切筐割桶双挨链构D秧N援A桑的惩一咐类费内帆切冒酶责。GGATCCCCTAGGGCCTAGGATCCG+B评a志mH退Ⅰ作怎用与症甲挨基欠化俱酶垒共钥同驴构宵成宫细销菌拆的父限寻制溜修春饰惊系炼统幻玉,序限轿制誉外屑源溉D酱N怒A班,选保教护贵自并身仪D剃N筑A赔。分跳类Ⅰ乔、煮Ⅱ仅、沸Ⅲ(毛基油因层工恨程薪技守术爬中界常云用昂Ⅱ户型澡)第爪一惠个哈字捏母痒取颤自尝产侍生剖该供酶渐的斩细例菌百属定名蹈,驾用隆大委写腹;第只二谣、晚第锋三党个斩字僚母恋是爹该好细赠菌湿的并种钩名四,喷用沉小烫写跟;第城四上个鹿字狗母蜻代令表娃株臭;用察罗语马夺数骡字钟表间示妨发摘现宪的砖先猪后及次每序补。命哥名Hi填ndⅢ属

株序Ha涉e轮m质o冬p围h本i睬l逆u柔si裳nf桐l获u污e稳n逢z击a竿ed株流猴感闸嗜缘瑞血赔杆批菌d株光的灰第陈三驴种爱酶Ⅱ敌类酬酶气识痒别浩序秀列乘特建点—犯—回所文而结章构(徐p颂a焰l各i茄n揉d间r爆o吼m避e嗓)切累口篮:平爆端怎切咳口、粘推端弄切丽口GGATCCCCTAGGB不a泳mH眨ⅠGTCCAGGCCTAGGATCCG+GGATCCCCTAGGH用i吵nd讽ⅡGTCGACCAGCTGGACCTG+平娘端奸切程口粘债端功切馒口同弃功碗异跌源升酶来丹源订不但同娇的性限诱制约酶择,骨但嘴能铜识岁别彻和盖切胀割摇同仆一字位拖点译,召这榜些翠酶库称同捷功劲异有源辽酶。GGATCCCCTAGGGCCTAGGATCCG+B喇a蹈mH燃ⅠGGATCCCCTAGGGCCTAGGATCCG+B辜s鹿tⅠ有坛些那限闲制虹性孔内对切浸酶冠虽拳然符识金别箭序趟列握不肌完评全秃相跨同疯,克但卫切帐割恭D票N恼A蚊后吧,印产散生颠相投同栏的堵粘评性僻末个端张,备称台为同凉尾抛酶。故这悔两菊个氧相哄同衫的竟粘版性袍末砖端残称辩为配稳伍脏未赌端塔(系c泼o头m肝p革a忍t淹i贼b中l蜻e厅e狭n颠d保)。B团a陕mH愤ⅠB背gl导ⅡGGATCCCCTAGGAGATCTTCTAGAGCCTAGGATCCG++ATCTAG

GATCTA同湖尾话酶(辟三都)供目劳的狂基茅因目垮的字基刺因需闲要厘克葵隆论的便D弱N贪A彻片煌段幼。编汽码赢某拥种衬蛋毕白嘱质研梦究忙某通基价因鸭结庭构净和未功裤能撞的峡关迁系研已究请某枣基占因抹与饥疾罗病绞的物关掠系按支照蜓人迟的枯愿饱望痛设沙计吓和目建便造哭非绳天桐然佳的管基浪因唐表果达批体省系滤。某功能蛋白宿主细胞基瓶因臣工搏程轮产万品重组体目的基因c武D臂N恒A萝:经康反问转国录虽合赞成粘的醉、竭与该m阁R鼓N口A忧互哄补巡寿的病D欠N到A炮链裕。基长因阳组聋D兴N讯A:代脆表似一缎个亡细应胞伯或宿生箩物攀体垫整仓套争遗界传妹信扫息遇的熔所糖有效D踏N早A摊序章列黑。(读四甘)喜基始因凶载判体定橡义队:为诊携党带苦目鸦的饿基天因念,卖实缝现屈其逼无亭性蛙繁虑殖倘或屈表帐达犬有食意准义谊的港蛋闪白月质沫所庆采梳用高的就一宰些母D症N缴A哥分瞧子警。克医隆罚载乌体(冲c北l睡o送n舒i挤n伸g膜v压e漆c编t迷o反r章)-若-惰-该-玻-愤为怨使梯插疗入手的敌外生源肺D蝴N千A冰序绪列黄被减扩转增纤而染特斥意填设剖计椅的位载鸣体奶。表样达夸载吵体(朽e沾x恭p编r筐e虫s识s甲i影o滚n樱v暂e卧c肉t柿o罩r喉)-富-咬-捐-倡-别为恋使奔插嫌入控的汉外着源蛋D傅N钓A奖序逝列犯可倘转宣录改翻葵译犹成狭多蹲肽址链着而厉特守意梅设海计喇的挽载允体勾。常列用甩载悄体质沿粒鬼D葡N号A与、犬噬窜菌六体墙D先N欣A问、没病莫毒扭D拌N迁A宿主细胞基因载体载户体评的仅选深择豪标带准能也自皱主朱复禽制叠;具拐有冈两福个枪以纯上歼的除遗桶传歪标呈记陈物娘,冶便孕于吨重屠组旬体筒的精筛联选虎和堆鉴蒜定因;有消克糠隆席位冰点婚(跨外位源筛D糟N轧A惩插剑入蛇点揪)强即靠多兽个雷单坡一携酶惊切玩位宗点覆;分派子浊量刺小捡,旅以滥容抗纳挽较膀大啊的姥外疤源溉D伤N盲A姿。存雷在愚于姑细缠菌享染越色塔体弊外奔的小睁型环池状轮D倒N缺A洗分振子赢。具胸有自尿我耳复居制功脂能广。带倾有冒抗牲性宜基角因胖及嘉表赢型羽识接别抢等遗草传令性惩标日记酷物。经敬改痰造乏后令具辜有多意克舍隆海位灵点。举页例筹:架p仓B脱R财3脱2捡2痕质冶粒质唉粒宿接主蔑细鄙胞o慌r魂i抗壳A舟m浴p宿歉主亦细傅菌含乓A码m绣p艇培欺养狗基多克隆位点+多种酶切口多克隆位点限制性内切酶单一酶切口多辨克覆隆总位赌点o结r芦i复鸦制责起朵始勇点遗传传俘标胁记A刃m役pp童o类l坝y桨l损i话n注k觉e殊r基疮因骡载举体λ哈噬胸菌汽体宿D荣N参A斩改倍造帆系采统λ贝g罢t代系茫列俗(园插疑入节型都,搭适挑用歼c鼠D洒N气A答克臭隆你)E辆M胁B吧L球系卵列牌(嚼置挥换受型砍,伤适慈用昨基饼因查组锁克遥隆睬)噬高菌链体遮(溪p唯h台a眉g箱e刃)M仇1谷3伯噬版菌捞体恢D徒N抄A灭改县造幅系耳统测(卵含肉l阳a讲c乓Z石基冶因或)M偏1廊3升m席p鼓系界列p拐U草C抬系毛列粘个性你质瞒粒速(携c设o购s垄m节i跳d行)酵晃母拴人始工泊染终色男体(自y舒e剖a欠s端t新a根r友t集i客f困i固c潮i统a洞l粮c嘉h绸r滚o凉m削o麻s遵o恋m朽e食,贺Y宫A精C跨)细枕菌踢人别工林染尾色莫体(搁b够a闷c岩t打e辈r笑i蛙a彼l纲a驳r束t违i最f沈i恳c纪i滨a熟l期c粥h临r脂o截m桥o矩s锋o亡m纲e配,笑B袋A横C躺)动蜓物尖病现毒诵D忠N宫A袋改码造赌的扶载蓝体(桐如滩腺哗病遣毒项,瓣腺蓄病毒毒绞相攻关弹病剪毒痛,办逆极转产录庙病逢毒伴)其护他二脊、泻重碌组久D展N垦A匆技嗽术折基笛本宏原鲜理基本原理目的基因的获取DNA导入受体菌外源基因与载体的连接克隆载体的选择和构建重组体的筛选克隆基因的表达

以质粒为载体的D柄N催A克隆过程(哈一昏)滑目猴的仍基吧因果的楼获区取1妇.乎化拜学哥合赖成堵法要夺求礼:短已酬知议目油的赤基柄因辨的泰核联苷疗酸器序随列茄或崖其纯产脊物痒的院氨容基缸酸汗序初列杂。2粉.需基将因梢组拣D笨N潮A宣文锯库瞒(梨g泰e觉n吴o常m悼i瓜c神D欠N冷A洪l哭i节b画r乖a昆r功y药)3奖.怖c参D垃N说A进文票库佳(爆c妙D捏N插A目l嘴i漆b晃r障a鸟r臣y柱)4宴.超聚汉合共酶拾链撕反叶应她(叙p糊o刚l拆y帝m地e严r锻a愿s穿e光c贝h径a蝴i弹n污r隐e区a可c沫t册i伶o祥n岛,呼P膊C恼R孩)(法见祖第源2蹄2昌章歉)*止化亮学躲合末成火法绳获数取砖目压的雄基咐因由际已伸知梁氨死基矩酸燃序讲列欢推披测顺可栗能尚的棋D大N饶A花序因列组友织耳或哀细烂胞笨染砍色秃体夏D砌N僚A基偏因硬片泄断克仪隆冻载泄体重狡组船D但N饥A扑分询子含倘重故组市分假子态的皆转幕化护菌限吨制陕性长内顺切旦酶受代体载菌基踏因扑组盲D些N徒A耗文废库存攀在营于匹转俗化另细圈胞狂内蒙由奴克孤隆遭载驶体截所烤携永带恨的门所塑有摘基谈因疏组别D宵N晋A怠的贿集廊合*思从衡基旷因迹组拒D或N幼A骂文滨库楼获睡取牺目按的桃基亩因c宽D民N汗A卡文河库以若m葛R母N兼A袭为枝模徒板肌,幕利泰用首反耀转厦录乖酶鲁合谈成再与御m惜R债N戒A稿互遥补狠的夹D油N索A愤,翻再真复愧制扫成梨双惧链进c你D禾N渣A赚,追与手适滴当拌载独体蛾连被接月后论转萝入泼受撑体霜菌滴,殖即康获刮得鼠c峰D狱N启A淡文棚库庆。DNAmRNAmRNA反转录酶c础D毙N伏Am犁R诵N讯A赖的狭提闷取副与浅纯租化从贞m嘉R答N暴A桐制戴备倾c愧D案N议A逆岭转害录生酶D蹲N苗A商聚锁合养酶m护R幸N浊Ac假D丈N荡A杂刃化盘双朝链c来D胸N黑A挺文拴库爱法cDNA基因重组转化核酸探针c师D漂N杠A烧文刑库聚颗合吴酶浩链理式路反望应芬(幸P疤C刮R员)目还的扬基吓因基患因忘载零体重测组懒体(兄二舍)常克致隆择载撕体屋的妖选音择本和妨构劲建(龄三组)敌外冈源蓝基部因润与豪载秃体耗的剩连洁接1型.夏粘姨性损末流端烧连疲接方地式斜:(庆1装)笑同叉一盟限怠制堡酶醒切体位影点狠连便接(多2也)羞不钥同劣限迹制挤酶欺切纸位捷点粒连佣接配略伍均末誉端寻连溉接非晃配使伍洪末蹈端贞连怒接B环a黑mH块Ⅰ稍切破割刷反讨应

GGATCCCCTAGGT屡4D驳N插A移连绸接阻酶1铸5º贫CGATCCGGCCTAG+目的基因用BamHⅠ切割载体DNA用BamHⅠ切割重组体载体自连目的基因自连同茄一婶限棍制震酶惑切当位姥点蛙连妨接不疲同网限嚷制愿酶肥切处位警点恢(介非捆配洁伍亏末酷端颤)厘的魔连篮接E常c纺oR讲Ⅰ庭切杂割蓝位短点B恶gl技Ⅱ祸切终割际位穷点+EcoRⅠ+BglⅡ双酶切EcoRⅠ+BglⅡ双酶切T4

DNA连接酶15ºC重组体配索伍版末遵端访的峰连愤接畜情罢况舰和伐同毒一牙限垫制驻酶逗切绍位弄点声连洪接纱相定似驾。2惠.夫平估端育连承接适瓜用选于显:限役制俯性贩内豆切鸟酶愧切师割滔产乘生识的短平诱端粘手端手补疗齐基或域切秤平恼形皇成瓶的沫平灵端目的基因载体限制性内切酶限制性内切酶T4DNA连接酶15ºC重组体载体自连目的基因自连3巩.纽奉同雾聚篮物钓加湾尾污连逝接在麻末紫端坟转白移援酶(若t无e谎r惧m生i筹n漂a谅l稠t厦r播a书n经s霉f颠e准r突a巷s异e狼)的轰作楼用列下拐,朝在料D披N杨A张片咬段凯末恒端肠加航上迷同差聚参物围序歪列泄、以制灯造工出料粘拳性福末阁端圣,即再滋进酸行留粘并端宴连葡接梢。5´3´3´5´载勾体虚D摇N挣A5´3´3´5´目尊的旋基疤因限摸制说酶膨或且机厌械这剪许切限薯制可酶5´3´3´5´5´3´T(T)nT

T(T)nT3´5´5´

3´3´5´5´3´A(A)nA

A(A)nA3´5´λ-核酸外切酶λ-核酸外切酶末端转移酶+dATP末端转移酶+dTTPT(T)nTA(A)nAA(A)nAT(T)nTT4

DNA连接酶15ºC重组体4很.描人复工案接钩头(刊l乡丰i横n堂k画e悦r熄)连凶接由怕平莲端血加涉上婚新炒的林酶决切兆位辩点钱,尸再秒用佳限蚕制潮酶侨切量除呀产丑生茶粘彻性非末择端稳,环而注进菌行骗粘士端零连涉接。人怪工首接昌头借及址其迈应青用CCGAATTCGGGCTTAAGC5´-3´-EcoRⅠEcoRⅠEcoRⅠEcoRⅠ受戴体舅菌墨条梦件安水全置宿屈主妇菌限不制甲酶啄和向重匹组怒酶席缺搬陷处未于听感宏受语态捕(盼c稻o拾m有p证e哭t墨e四n剖t寻)导肌入魂方睡式转伞化优(普t拘r齐a酬n介s显f包o剩r昼m许a锤t视i理o罗n众)转顾染仇(纤t现r兴a俯n窄s燥f签e颂c朋t乎i蔑o仁n湾)感薄染景(拢i售n爱f标e待c饶t科i昆o鞭n矩)(宿四支)乡丰重呢组相D槐N关A块导炮入瞎受惊体闭菌(漂五友)建重改组语体盖的苹筛融选1门.直搬接进选唇择僚法(渠1抛)抗援药浊性妙标吧记划选盏择(严2号)赶标包志森补掌救曲(虑m厦a奔r做k谢e躬r点r庭e糊s月c议u遣e肢)(凡3茫)巧分酷子班杂蛋交唇法原街位如杂球交S团o统u颤t刚h各e坟r健n瘦印肢迹2炉.丝式免英疫己学记方变法如钥免畅疫伴化击学傻方耗法臣及皇酶隐免废检穷测原分里析急等(糕插尖入蚀失淋活着法将)抗镰药言性颗标滚记萝选餐择α住互使补α行互误补辅的冶检杜测原蛾位伴杂生交S幕o讽u载t融h如e拾r身n土印锐迹鸡度的随β臂肌紧球沾蛋遍白在的掀克膛隆斤和位检遗出重并组赏D嚼N涨A欠技火术攻操违作谣过摇程延可绣形株象防归伟纳歉为小吓结分分离目的基因切限制酶切目的基因与载体接拼接重组体转转入受体菌筛筛选重组体重厌组域D嫂N疮A璃技鞋术涌操缸作突的惠主岸要较步患骤载体质粒噬菌体病毒目的基因(外源基因)基因组DNAcDNA人工合成PCR产物限制酶消化开环载体DNA目的基因连接酶重组体转化体外包装,转染带重组体的宿主筛选表型筛选酶切电泳鉴定菌落原位杂交表搅达点体获系孩的向建蒙立表茄达屋载警体清的蚁构丈建受样体朴细西胞绿的烘建虹立表章达临产役物欣的词分耍离磁纯辜化(推六龙)太克与隆总基蝴因刺的袖表建达1确.黎原灭核统表谷达有体手系(E脏.勾c霉o孝l馅i育表她达买体辰系却最否为爪常标用底)标婆准裹:选傲择旨标寸志英强表启出动胆子翻捎译杯调捕控敬序梁列把多啦接面头摊克忠隆耗位辩点E揪.寸c疫o凶l阀i安表与达吩体饱系乱的讯不铅足不帖宜生表明达今真辣核艰基够因谈组痕D爪N养A不着能踩加蕉工傻表沸达盯的枪真汽核耕蛋酬白硬质表蚂达议的拦蛋惕白呈质意常汁形赢成崇不椅溶迁性孕包连涵住体(问i摊n交c坚l对u退s昂i宁o痛n作b苗o筐d婚y嚷)很黎难自表班达毯大澡量颠可盐溶咳性魂蛋检白大匠鼠咱胰漏岛淹素淋原郊c械D加N饥A的谱表羽达欲和靠分糠泌优记点尾:可向表风达搂克纳隆答的布c螺D奥N肯A炸及嚷真冠核习基毒因晨组舅D唯N执A可果适俘当箭修逢饰孙表仔达楚的跑蛋遣白生质表相达顷产疲物维分挂区脑域狮积携累缺艺点晌:操株作划技特术刮难率、渠费却时手、挺经枯济转驼染—避—将挥表凭达搞载题体任导扒入退真据核单细偿胞争的欣过鞠程方茂法叛:磷搭酸鸭钙怪转肢染D畏E换A销E范葡计聚棵糖绸介蓬导狼转爽染电趁穿递孔脂匀质补体形转臣染显调微骡注袋射2仁.弊真批核柴表展达剪体喉系酵宜母前、裁昆退虫洁、卵乳航类枯动妇物绑细京胞表展达顾载唱体舌p片F瘦A市S量T可B煤A尽C卵I昼的湖物廊理淘图耻谱(注一边)触疾涝病亿基秃因烈的损发限现德与金克佣隆根裤据宣基段因右定津位全克暖隆差之菠并该研伐究缝其驾性姐质蹄,粘而鬼认眨

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明,都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等,如果需要附件,请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸,网页内容里面会有图纸预览,若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑,并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容,请与我们联系,我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

评论

0/150

提交评论