岛津气相色谱仪教材

岛津气相色谱仪基础知识第一部分色谱原理和基本构成色谱起源石油醚碳酸钙颗粒色素色谱组分3色谱法：利用组分在两相间分配系数不同而进行分离的技术流动相：携带样品流过整个系统的流体固定相：色谱柱固定相，静止不动的一相色谱是一种分离技术色谱主要是对混合物中的目标物进行分离和定量色谱定义4

液相色谱：以液体作为流动相的色谱分离方法适用于高沸点、大分子、热稳定性差的化合物的分析流动相具有运载样品分子和选择性分离的双重作用

气相色谱：以气体作为流动相的色谱分离方法

适用于沸点较低、热稳定性好的中小分子化合物的分析流动相只具有运载样品分子的作用

GCvsHPLC5

分离效率高分析速度快检测灵敏度高样品用量少选择性好多组分同时分析易于自动化色谱法特点6载气控制：手动、数字进样口：分流/不分流进样口、填充柱进样口、程序升温进样口色谱柱：填充柱、毛细柱检测器：FID、TCD、ECD、FPD、FTD数据处理：GCsolution、GCsolutionLite

进样口色谱柱

检测器

温度控制区气相色谱主机钢瓶He,N2载气控制数据处理气相色谱构成示意图7气相色谱基本流路图隔垫吹扫出口分流出口载气玻璃衬管F2F1空气400-600mL/min氢气40-60mL/min石英棉FID检测器分流/不分流进样口毛细柱尾吹气约35mL/min8温度压力（流量）温度、压力（流量）的时间程序气相色谱基本控制参数9第二部分载气部分载气不纯带来的问题：载气中氧的存在导致固定相氧化，损坏色谱柱，改变样品的保留值。载气中水的存在导致部分固定相或硅烷化担体发生水解，甚至损坏柱子。气体中有机化合物或其它杂质的存在产生基线噪音和拖尾现象。气体中夹带的粒状杂质可能使气路控制系统失灵。载气纯度的重要性11

保证载气纯度在99.999%以上加装载气净化装置

10%的钢瓶气保有量保证载气纯度的措施12100kPa＝1bar1kPa＝1.02×10-2kgf/cm21kgf/cm2＝98.1kPa1kPa＝1.45×10-1psi1psi＝6.89kPa压力单位换算13第三部分进样口部分

分流/不分流进样填充柱进样冷柱头进样程序升温进样分流/不分流进样是GC最为常用的进样方式GC进样方式15

GC-2010PlusGC-2014GC-2014C进样口配置SPL-2010PlusWBI-2010PlusOCI/PTV-2010SPL-2014WBI-2014SINJ-2014DINJ-2014SPL-2014CDINJ-2014C

GC进样口的配置16

分流/不分流进样口结构F1F2

进样方式：分流进样（Split）不分流进样（Splitless）导针器载气O型圈石墨垫圈螺母玻璃衬管色谱柱隔垫隔垫吹扫分流出口什么是分流进样?46mL/min0.25mmI.D.x30m,df=0.25µm1mL/min50mL/min47mL/minP分流3mL/min隔垫吹扫分流比

分流流量和色谱柱流量之比

当柱流量为1mL/min、分流流量为46mL/min-->分流比＝46:1

载气为什么要分流进样?(Ⅰ)

防止色谱柱过载前沿峰

减小色谱峰展宽为什么要分流进样?(Ⅱ)0.25mmI.D.x30m,df=0.25µm1mL/min4mL/min1mL/min载气Ｐ分流3mL/min隔垫吹扫20e.g．SPL-2010(Split)

25mm石英棉5-10mm(10mg)34mm分流进样注意点_石英棉的装填避免分流歧视，提高重现性

不适合微量组分的分析（μg/mL以下）未知样品分析时，初始分流比采用50:1或者100:1使用分流衬管正确装填石英棉定期更换分流出口的捕集阱分流进样操作要点22什么是不分流进样？（Ⅰ）0.25mmI.D.x30m,df=0.25µm1mL/min50mL/min47mL/min载气Ｐ46mL/min分流初始柱温：溶剂沸点-10℃待机状态和进样后1min内1mL/min0mL/min分流流路关闭后总流量变为4mL/min3mL/min（进样时间设为1min时）隔垫吹扫0.25mmI.D.x30m,df=0.25µm1mL/min

进样时的4mL/min

1mL/minCarrierGasP0mL/min分流

50mL/min47mL/min46mL/min什么是不分流进样？（Ⅱ）进样1min后打开分流流路3mL/min隔垫吹扫分流流路1min后打开电磁阀的作用n-C11n-C13n-C15n-C17n-C18n-C11n-C13n-C15n-C17n-C18进样后1min打开电磁阀未打开电磁阀进样时间内色谱峰展宽的影响0.25mmI.D.x30m,df=0.25µm1mL/min4mL/min载气Ｐ初始柱温：溶剂沸点-10度1mL/min0mL/min3mL/min如何减小色谱峰展宽：1）溶剂聚焦效应2）高压进样分流隔垫吹扫溶剂聚焦效应进样口初始柱温：溶剂沸点-10℃溶剂在柱头重新冷凝溶剂聚焦对峰形的影响色谱柱：Rtx-530m×0.25mm×0.25um进样量：1.0µL样品：5µg/mL农药混标（溶剂为正己烷）柱温程序：150℃to275℃@4℃/min.色谱柱：Rtx-530m×0.25mm×0.25um进样量：1.0µL样品：5µg/mL农药混标（溶剂为正己烷）柱温程序：40℃to150℃ @25℃/min.然后275℃@4℃/min.280.25mmI.D.x30m,df=0.25µm1mL/min9mL/min载气分流初始柱温：溶剂沸点-10℃6mL/min0mL/min3mL/min隔垫吹扫高压进样待机状态和进样后1min内（高压时间设为1min时）1mL/min6mL/min100Kpa250Kpa

进样1min后，柱压回到100Kpa，柱流量恢复为1mL/min29主要用于分析微量组分（数十

µg/mL或更低）使用不分流衬管或去活性不分流衬管衬管中可装填少量石英棉以提高重现性如样品有强吸附性，最好不加石英棉必须使用程序升温方式，初始温度低于溶剂沸点10～20℃建议使用高压进样方式不适合气体样品和低沸点溶剂类样品的分析不适合分析在溶剂峰之前出峰的组分不分流进样操作要点

填充柱进样口

宽口径进样口GC进样方式31

冷柱头进样口

程序升温进样口GC进样方式32热进样(分流/不分流进样口，宽口径进样口)存在歧视现象和样品热分解冷进样(冷柱头进样口，程序升温进样口)进样是在较低温度下进行歧视效应和热解效应的影响小歧视效应和热分解33

低沸点组分百分比偏高

进针退针高沸点组分残留歧视效应的产生34快速进样法

溶剂冲洗法热针法减少歧视效应的方法—样品注入方面35概念样品是在冷状态--低于样品沸点的温度下进样(依据溶剂)气化室快速升温使样品气化PTV（程序升温）进样方式分流进样(高浓度样)无分流进样(低浓度样)大体积进样—LVI(痕量分析)OCI（冷柱头）进样方式

一般适用于0.53内径的柱子没有分流流路，不能分析高浓度样品（污染柱子），进样量一般小于2μL减少歧视效应的方法—冷进样36注意事项-

样品气化不完全进样口温度过低，将导致高沸点化合物气化不完全，并且不能有效转移到色谱柱中。进样口温度：200℃进样口温度：300℃37进样口温度过高，导致热稳定性差的化合物分解。进样口温度：280℃进样口温度：200℃注意事项-

样品分解38注射速度快选择合适的注射器取样准确，重现减少注射针尖歧视，每次进样速度尽量一致选择合适溶剂清洗注射器，避免污染注意事项-

手动进样39第四部分色谱柱

毛细柱柱材：熔融石英、不锈钢内径：0.1mm--0.53mm长度：10--100m固定相种类：OV-1，PEG- 20M，OV-17等固定相膜厚：0.1--5μm

填充柱柱材：不锈钢、玻璃内径：2.6--3mm长度：0.5--6m填料：担体和固定液的种类固定液的浓度1-30%

担体有硅藻土、玻璃、石英、塑料担体(TPA)等色谱柱类型41固体：活性炭、氧化铝、硅胶、分子筛等，用于无机气体及低碳烃的分析

应用比例约占10%液体：聚甲基硅氧烷、聚乙二醇、聚脂等，用于液体样品及高沸点化合物分析

应用比例占90%以上气相色谱的固定相42熔融石英–

合成高纯石英

外表面涂覆聚酰亚胺内表面经化学处理不锈钢

用于高温分析最不易断裂内表面经特殊处理毛细管柱管材43大多数固定相为聚合物毛细管柱:

聚甲基硅氧烷（Polysiloxanes,silicones）聚乙二醇（Polyethyleneglycols,PEG）毛细管柱固定相44siloxanebackbone固定相—聚甲基硅氧烷45苯基基团键入硅氧烷聚合物主链Rtx-5msDB-5msBPX-5e.g.温度稳定性更好固定相—“ms”或低流失柱46“WAX”or“FFAP”类固定液e.g.Rtx-WAX，Stabilwax-DA，DB-FFAP温度稳定性比聚硅氧烷类差，最高使用温度低于聚硅氧烷类固定液固定相—聚乙二醇47固定液类型RestekJ&WSGEAlltechMacherey－Nagel100%dimethylpolysiloxaneRtx-1Rtx-1msDB-1DB-1MSBP1AT-1AT-1MSOptima195%dimethyl/5%diphenylpolysiloxaneRtx-5Rtx-5msRxi-5msDB-5DB-5MSBP5BPX5AT-5AT-5MSSE-54Optima565%dimethyl/35%diphenylpolysiloxaneRtx-35Rtx-35msDB-35DB-35MSBPX35BPX608AT-35-50%dimethyl/50%diphenylpolysiloxaneRxi-17Rtx-50DB-17DB-608BPX50AT-50Optima176%cyanopropylphenyl/94%dimethylpolysiloxaneRtx-1301Rtx-624DB-1301DB-624BP624AT-1301AT-624Optima1301Optima62414%cyanopropylphenyl/86%dimethylpolysiloxaneRtx-1701DB-1701BP10AT-1701Optima1701trifluoropropylmethylpolysiloxaneRtx-200DB-200DB-210AT-210Optima21050%cyanopropylmethyl/50%phenylmethylpolysiloxaneRtx-225DB-225BP225AT-225Optima225polyethyleneglycol(PEG)Rtx-WAXDB-WaxBP-20AT-WAXCarbonWAXOptimaWAXpolyethyleneglycol2-nitroterephthalateStabiwax-DADB-FFAPBP21AT-1000OptimaFFAP常用商品化毛细柱对照表48

选择与目标化合物极性相近的固定相(“相似相溶”原则）

-->峰形和分离变好

分析非极性化合物—非极性柱(e.g.

Rtx-1)

分析极性化合物—极性柱(e.g.Rtx-WAX）

按照分析目的选择固定相

当组分沸点差异大时：-非极性柱(e.g.

Rtx-1)

当组分沸点差异不大时，如异构体：-极性柱(e.g.Rtx-WAX）

固定相选择49按所需分离状况选择

需要高分离时：

-->[内径:细、长度:长」柱

分离已足够，要缩短分析时间时：

-->[内径:粗、长度:短、膜厚：薄」柱

按分析目的选择

分析低沸点化合物时：

-->[长度:长、膜厚：厚]柱

分析高沸点化合物时：

-->[长度:短、

膜厚:薄]

柱柱内径、长度、膜厚选择50

恒温分析程序升温分析适用于沸程窄样品组分适用于沸程宽样品组分恒温分析与程序升温分析的比较51序号名称固定液名称应用领域（RestekGC应用数据集）1Rtx-1100%dimethylpolysiloxane空气样品、芳香族化合物、氯氟烃类化合物、香精油类、脂肪酸、香味挥发物、香味化合物、烃类、有机磷农药、氧化物（醚、醇等）、臭氧前体、溶剂、含硫化物、挥发物2Rtx-55%dimethyl/95%diphenylpolysiloxane醇类、联苯胺类、丁基锡类、消毒副产物、氯代烃类、有机氯农药、柴油中有机物、成瘾药物、香精油类、汽油中有机物、卤代乙酸、卤代醚类、烃类（易燃物）、亚硝胺类、硝基芳香烃类、PCBs、基本药物、酚类、多环芳烃、邻苯二甲酸酯类、硅氧烷、溶剂、类固醇类3Rtx-6246%cyanopropylphenyl/94%dimethylpolysiloxane挥发性化合物4Rtx-170114%cyanopropylphenyl/86%dimethylpolysiloxane丙烯酸酯、甲醛、有机氯农药、香味化合物、有机磷农药、药物（酸性/中性）、基本药物、溶剂5Rtx-WAXpolyethyleneglycol(PEG)醛类、芳香族化合物BTEX、香精油、FAMEs（酸酯顺反化合物）、二醇类、溶剂6Stabiwax-DACarboWAXpolyethyleneglycol脂肪酸（游离）、香味挥发物、有机酸、溶剂色谱柱固定相典型应用52

柱内径

流量(推荐)0.25mm

1~2mL/min0.32mm2~4mL/min0.53mm5~8mL/min毛细管柱流量设定53恒流控制（使用填充柱和宽口径毛细管柱时)

不管色谱柱温度如何变化，载气流量始终恒定。

(柱温上升时柱头压力自动调整)恒压控制(通常用于毛细管柱)

载气柱头压力始终恒定。

(柱温变化时柱内流速同时改变)

恒线速度控制(用于毛细管柱，GC-2010Plus/2014具有此功能）

柱内平均线速度维持不变。

(色谱柱温度变化时柱压自动调整)载气控制方式54HETP曲线（Rtx-1，30m，0.25mmi.d.，0.25µm）线速度（cm/sec）柱箱130℃，样品n-C15H320.0200.0400.0600.0800.01000.01200.01400.0010203040506070HETP(µm)柱箱130℃，样品n-C15H32，k=7.6

N2HeH2载气线速度与理论塔板高度关系55

采用恒线速度方式，通常能得到最高的柱分离效率。0.25mmIDx30m,df=0.25μmHe:150kPa,

2.32mL/min,

45.1cm/sec柱温平均线速度载气不同控制方式比较560.00.51.01.52.02.53.03.54.04.5min02500050000750002.4652.9803.8334.0544.3344.5815.1140.51.01.52.02.53.03.54.04.5min02500050000750001.8672.3053.1173.3333.5943.8444.3310.51.01.52.02.53.03.54.04.5min02500050000750001.2651.6002.3322.4892.5382.7723.0333.512线速度:15cm/s线速度:20cm/s线速度:30cm/s恒线速度应用数据57为什么必须进行色谱柱老化？

新色谱柱含有溶剂和高沸点物质，所以基线不稳，出现鬼峰和噪声；旧柱长时间未用，也存在同样问题。一般采用升温老化，即从室温程序升温到最高温度，并在高温段保持数小时。

新柱老化时，不要连接检测器。每天都要进行老化吗？ 视仪器基线情况，确定是否需要老化及老化时间。色谱柱的老化58第五部分检测器检测器载气种类测定浓度应用氢火焰离子化（FID）氦气、氮气数ppm以上有机化合物电子捕获（ECD）氮气数ppb以上有机卤素等化合物火焰光度（FPD）氦气、氮气约0.1ppm硫、磷化合物火焰热离子（FTD）氦气、氮气数ppb以上氮、磷化合物热导（TCD）氦气、氢气、氮气、氩气50ppm以上无机气体、有机化合物常用检测器60FID检测器61FID检测器进样过程62

氢气、空气的比例1:10。检测器温度设置高于色谱柱实际工作的温度，建议使用温度≥250℃。在未接上色谱柱时，不要打开氢气阀门。必须在温度升高后再点火，关闭时，应先熄火再降温。因故障导致火焰熄灭，应尽量关闭氢气阀门，排除了故障重新点火时，再打开氢气阀门。FID检测器使用事项63ECD检测器64ECD检测器进样过程65

气路要安装气体过滤器和氧气捕集器。

ECD使用温度为250～350℃，否则检测器很难平衡，建议使用温度为300℃。

ECD升温前通载气约10min，先升检测器温度再升进样口、柱温。

ECD电流最大为2nA，通常为0.5～1nA。ECD检测器使用事项66FPD检测器67FPD检测器进样过程68

建议FPD使用温度≥250℃。

FPD的氢气、空气流量与FID不同。必须在温度升高后再点火，关闭时，应先熄火再降温。滤光片表面应清洁无污物，勿用手触摸其表面。FPD检测器使用事项69FTD检测器70FTD检测器进样过程71铷珠：避免样品中带水。气源：载气N2或He，要求纯度99.999%。一般He的灵敏度高。空气最好是选钢瓶空气，无油。氢气要求纯度99.999%。使用FTD时，不推荐使用含氰基固定液的色谱柱，比如OV-1701。FTD检测器使用事项72TCD检测器73

载气中含有氧气时，热丝寿命会缩短，所以载气中必须彻底除氧。用氢气作载气时，气体排至室外。检测器通电之前，一定要确保载气已经通过了检测器，防止热丝烧断。检测器电流越高，灵敏度越高，但灯丝寿命会缩短。使用应注意尾吹气不能关闭，默认值为8mL/min。关机时一定要先关检测器电源，然后关载气。TCD检测器使用事项74第六部分数据分析良好的峰面积重现性，一般RSD%在0.5～3%工作曲线具有良好的线性峰形正常，避免拖尾峰和前沿峰

(柱选择恰当、衬管无污染、温度及流量设定)色谱峰分离良好(分离度>1.5)数据可靠性判断761.检查是否漏气 用检漏液检查各连接部位，并确认峰面积重现性。2.检查色谱柱是否良好 长时间使用，因吸附、固定液流失、固定液分解及污染，造成柱劣化，更换新柱。3.检查衬管是否正常 确认衬管有无破损、污染，确认石英棉的位置。4.样品性质，是否易分解 对于不稳定的样品应注意保存温度，要避光并注意存放时间。数据不良时的检查措施77峰处理参数（半峰宽，斜率，漂移，变参时间等）定性：保留时间及允许误差（时间窗％，时间带）定量： 定量方法：

面积归一法、外标法、内标法等工作曲线的制作：曲线点数：一点、两点及多点曲线计算：线性、折线、二次曲线、三次曲线

计算方法78峰面积处理参数79Slope：斜率，用来判断出峰起点、终点以及滤除低平噪声Drift：漂移，判断相邻峰的积分方式Width：半峰宽，峰的半高宽，排除峰宽小于最小峰宽的峰T.DBL：变参时间，根据时间自动改变峰宽和斜率Minimumarea：最小峰面积，排除面积小于该值的峰

基本积分参数80Slope-斜率的设定81DriftDriftDriftDriftDriftDrift注：1)设定值为0时，工作站将自动判断

2)如Drift与基线至峰谷连线较接近时，积分面积值可能变化较大

Drift-漂移值的设定82控制斜率测试时间：10×半峰宽推荐值：填充柱5s

毛细柱2s或3s半峰宽：设为最窄峰的半高宽，单位：秒Width-半峰宽的设定83变参时间：根据时间自动改变峰宽和斜率

等度洗脱时，出峰时间越长，峰越宽

设定值为0时，根据宽度自动判断默认值为1000，此时该参数不起作用

在实际使用中，一般使用默认设定T.DBL-变参时间的设定84

保留时间允许误差：时间窗(%)：相对允差 一般设为5%时间带：绝对允差 一般设为0.05~0.25min

绝对保留时间、相对保留时间定性参数85面积归一法校准面积归一法外标法内标法定量方法861、面积归一法 各组分浓度以面积百分比表示，该结果可以确认大概的浓度，但有误差。2、校准面积归一法 用质量响应因子对峰面积进行修正，用该法测定的浓度比前者准确，但前提是样品中所有组分都出峰，否则也有误差存在。

这两种方法应用的必须条件是：

1）样品中所有组分都出峰。

2）所有峰面积计算必须准确。

定量方法（一）87未知样

组分

A峰面积

1000

2000

5001000总面积:4500

++=+10004500

=22.2%

组分A的浓度为：

不需标样组分的灵敏度相近

得到大致浓度(不能用于精确定量)面积归一法88标样

(等量组分混合)峰面积

1000

1500

1000500+++组分A的浓度为未知样组分A峰面积

100020005001000校正后的总面积:2417

+

+

=+

相对灵敏度2321:

::

相对灵敏度

232

15002417

=20.7%

需要所有组分的标样校准面积归一法893、外标法 该法是应用最广泛的方法之一，其误差来源主要是进样误差，因此，分析前一定要做面积重复性（即进样重复性）实验。4、内标法 在样品中添加内标物，通过组分与内标峰的面积比，对组分进行定量。 该方法减小了进样误差对定量结果的影响。定量方法（二）90100浓度

(ppm)1000峰面积70070未知样

1uL

组分A

峰面积:

700标样1uL（组分A

100ppm）组分A峰面积:

1000组分A的浓度为

70ppm

需要标样

目标组分被检测到，就可定量进样量的误差直接影响定量结果外标法91未知样+IS:100ppm

1uL组分

A1浓度比1.2面积比0.70.58标样1uL

组分A:100ppm

内标:100ppm组分

A峰面积

12001000面积比

1.2内标：IS内标：IS峰面积

7001000面积比

0.7组分

A的浓度为：

未知样中的内标浓度:100ppmX浓度比:0.58

=58ppm

需要标样和内标物。目标组分和内标物被检测到，就可定量。可减小进样量的误差对结果的影响。

-->定量结果最为准确内标物必须准确添加入所有未知样品中。内标法92

内标物峰与试样中所有成分的峰完全分离。内标物峰与目标成分峰保留时间不应差太远。内标物具有与分析目标成分类似的化学性质。内标物的选择93开机：连好流路，先开载气再开电源，开辅助气设定流量、温度、检测器参数用默认处理参数进行单一标品分析，确定单一标品保留时间分析混合标品，根据图谱调整分析条件，直至得到理想谱图确定定量方法（外标、内标等）选择校正点数，编辑ID表（输入组分的保留时间和标样浓度）选择校正次数（每浓度取几次均值）选择曲线计算方式（直线、最小二乘或折线）按从低浓度到高浓度的顺序，分析完所有标样，完成曲线制作进行未知样分析，每次分析结束，自动计算定量结果分析完了，关机，系统降温后，关电源，关载气总结–气相色谱分析步骤94岛津气相色谱仪日常维护岛津企业管理（中国）有限公司分析中心FID进样口色谱柱微量进样针二、进样口外围部件

气体选择

气路附件捕集阱分子筛过滤器四、色谱柱

五、检测器一、自动进样系统

进样针维护

进样针更换捕集阱

三、进样口

进样隔垫

玻璃衬管

石英棉

O形圈、石墨压环维护主要包括哪些内容？确认针杆的灵活性，针杆拉到满刻度，将针杆推回，如很紧或时紧时松时，需清洗针杆。拔出针杆，用干净滤纸沾丙酮擦拭针杆。将进样针针头浸入丙酮内，然后来回拉动针杆，直到针杆可以灵活顺畅移动，如有细小颗粒洗出，请更换丙酮后再次清洗。一、自动进样系统-微量进样针的维护正常

不正常状况重现性差的原因及对策使用后用溶剂清洗干净推杆应该很顺畅样品应该连续、垂直地从进样针头喷出微量进样针的维护打开自动进样器AOC-20i的前门。按［STOP］键，推杆推动器将会停止工作。

拧松固定推杆的螺母。微量进样针的更换拉动推杆传动带，使推杆固定部分向上移动。取下推杆固定器。分开进样针固定钩与进样针。微量进样针的更换取下进样针。安装进样针固定器。将进样针安装在注射器驱动装置上。微量进样针的更换用固定钩将进样针固定。在推杆上安装推杆固定器。向下拉出推杆固定部分，使推杆顶部固定器插入上方孔中。按[RESET]键复位。微量进样针的更换向下轻轻地按推杆固定器。在确定推杆尖端在零点后，用螺母紧固注射推杆。关上自动进样器AOC-20i的前门。微量进样针的更换1、GC外围的组成2、气体的选择和检查3、气路附件的检查4、气路附件的更换5、气路附件信息表6、其他二、进样口外围部件GC气体过滤器干燥器空压机（助燃用）载气管路尾吹气管路N２(He)钢瓶

(载气、尾吹气用)氢气钢瓶（燃烧用）气体过滤器FID、FPD、FTD检测器用FID、FPD检测器FTD检测器空气钢瓶GC外围的组成载气的选择辅助气、尾吹气的选择纯度的选择气体压力的调整气体的选择和检查根据分析的要求选择合适的载气参考分析流量的要求选择载气载气的选择辅助气、尾吹气的选择FID、FPD、FTD工作时需Air、H2辅助使用毛细柱时需在检测器端加上尾吹气检测器所用的尾吹气:ECDN2

FIDN2FTDHe、N2FTD、FPD使用的辅助气均需使用钢瓶气，ECD的尾吹气需用钢瓶高纯气，气路中加装分子筛和氧气捕集阱。使用高纯度气体一般性分析：

99.995％以上

高灵敏度分析：

99.999％以上

高灵敏度分析：载气、尾吹气、Ｈ２、空气，需经气体过滤器过滤后使用。气体纯度的选择

GC-2010Plus使用压力范围300~980kPa，供气压力主要取决于分析需要的压力及流量。

FID、FPD、FTD用H2

300~500kPa

FID、FPD、FTD用Air300~500kPa载气一般要求压力500~600kPa气体压力的调整检查气体的纯度和供气压力检查气体的气密性检查气路中的过滤器是否需要更换

如：载气流路中的分子筛过滤器和氧气捕集阱

空气流路中的干燥硅胶气路附件的检查部件号部件名221-42559-92SPLIT/PURGE

捕集阱221-34121-93分子筛过滤器更换分子筛过滤器和捕集阱部品名称部品编号用途捕集阱（分流）221-42599-92分流流路用捕集阱（吹扫）221-42599-92吹扫流路用缓冲管221-48441-91分流流路用分子筛过滤器221-34121-93除去载气中杂质管路，MN2-GN2

L-500201-48560-50分子筛过滤器联接进样口用配管铝垫片201-35183-84配管联接用气路附件信息表

FTD检测器必须使用空气钢瓶，空压机会导致使用灵敏度不稳定，同时会造成FTD铷珠寿命变短。FID和FPD检测器作高灵敏度分析时也需使用空气钢瓶，降低基线噪音及漂移。空气钢瓶

1、进样口检查内容进样隔垫/衬管/石英棉/O形圈/石墨压环2、进样口部件的维护与更换3、进样口常用耗材三、进样口检查的内容：进样隔垫玻璃衬管石英棉氟橡胶O形圈或石墨O形圈进样口检查内容白色：标准部品硅橡胶隔垫201-35584(20个/包)蓝色：长寿隔垫（LL）低流失长寿隔垫221-48972-91(20个/包)红色：高温隔垫（HT）高温时比LL型流失更少221-48398-91(20个/包）绿色：低流失隔垫（LB-2）增塑剂少，质地较硬221-35507-01

进样隔垫的类型进样100次后应更换进样隔垫。

（载气漏气造成保留时间及面积的重现性变差）更换进样隔垫后，将进样隔垫螺母拧到底后，回拧1/4~1/2圈。进样隔垫污染导致出现鬼峰。不同种类的进样隔垫引起的鬼峰，大小、数量、出峰时间也是不一样的。进样口部件的维护与更换-进样隔垫拧紧后，回拧半圈进样隔垫的更换衬管、石英棉在干净的环境下保存，避免污染。衬管上可能有石英棉残渣或样品的污染，使用前用溶剂清洗干净。石英棉的量、位置对重现性、灵敏度有很大的影响。进样口部件的维护与更换-玻璃衬管玻璃衬管的更换石英棉棒玻璃衬管蘸有溶剂的纱布2.取出石英棉后，用包裹纱布的细棒蘸溶剂（丙酮等）

清洗衬管内壁。1.用细棒将石英棉顶出。玻璃衬管的清洗将玻璃衬管污染部分浸于溶剂（丙酮等）中放置数小时或用超声波进行清洗。如上述方法无法清洗干净，可将玻璃衬管浸泡于1N硝酸溶液中7～8小时。玻璃衬管的清洗装填石英棉现象：部分农药的峰重现性差、偏差大，吸附、分解、峰变小。原因：进样口内的玻璃衬管或石英棉活性过高，产生吸附、分解。

DMCS（二甲基氯硅烷化）处理(1)玻璃衬管、石英棉用丙酮等有机溶剂清洗，晾干后在5%DMCS正己烷溶液中浸泡12小时。(2)取出浸泡一夜的玻璃衬管、石英棉，立即用甲醇清洗2、3次，然后再在甲醇中浸泡一小时左右。(3)从甲醇中取出，晾干后，放在干燥条件下保存。玻璃衬管的去活石墨压环被挤压后，压环中间的间隙消失了需及时更换－防止载气漏气ー石墨压环的老化:

将石墨压环放入气体喷灯的蓝色火焰中，烧成赤热1-2秒钟。注：气体喷灯使用时，注意防止烧伤。石墨压环的确认石墨压环有2种尺寸：毛细柱内径0.32mm以下用：P/N221-32126-05毛细柱内径0.53mm用：P/N221-32126-08石墨压环新的石墨压环间隙消失需要更换的石墨压环石墨压环石墨压环老化与未老化的实例比较

先确认进样隔垫及玻璃衬管无污染，再对进样口的其他部分进行整体老化。进样口升高进样口温度方法：将进样口的温度升高，超过通常分析时的温度，另柱温设定值超过平时分析条件使用的最高温度20~30℃以上。此时色谱柱的出口放空。进样口的处理部品名称部品编号备注进样隔垫

201-35584标准进样隔垫

221-35507-01高温用氟橡胶O形圈

036-11203-84GC-2010Plus分流衬管

221-41444-01GC-2010Plus不分流/WBI

衬管

221-48335-01GC-2010Plus硅烷化处理不分流衬管

221-48876-03通用惰性化石英棉

221-48600通用进样口的常用消耗品色谱柱出现问题时的表现:基线漂移变大基线噪音变大峰形异常（峰分叉等）分离度变差四、色谱柱

1、色谱柱的老化2、色谱柱的切割3、色谱柱的使用注意事项4、色谱柱的安装5、消耗品色谱柱的维护柱温箱温度逐渐上升到色谱柱的最高使用温度以下20℃

左右或高于正常使用温度，高沸点成分被汽化后释放。

（这个过程大约需要1~2小时，色谱柱可接在检测器上观察基线变化。）

注意：

1.新柱老化时，不要连接检测器。

2.监测时最好使用FID检测器。3.检测器的温度必须高于柱的使用温度。4.色谱柱污染很严重时，切掉进样口侧色谱柱

30～50cm左右，老化时检测器一侧色谱柱放空，并将检测器堵上。色谱柱的老化使用专用毛细柱割刀色谱柱的切割①色谱柱的使用温度要比柱的最高使用温度低。（可延长柱的使用寿命，降低检测器的基线噪音。）②

除去载气中的氧（特别是使用极性柱时）。

－使用高纯度的气体（99.999％以上）。

－气瓶更换时特别注意不要混入空气。

－在GC进气口前加装氧气捕集管。③

不让难挥发的成分进入色谱柱内。

－充分做好样品的前处理。

－使用衬管和石英棉。

－在色谱柱前安装短的预柱来保护色谱柱

(仅在使用毛细柱时)。色谱柱的使用注意事项毛细柱割刀工具：10×12扳手，6×8扳手2把，毛细柱割刀毛细柱的安装方法石墨压环的尖端到毛细柱顶部的长度（以GC-2010Plus为例）SPL：34mmFID、FTD：69mm

TCD：50mmFPD：82mmECD：37mm毛细柱的安装方法部品名称

部品编号备注石墨压环0.5221-32126-05内径0.32mm及以下毛细管柱用石墨压环0.8221-32126-08内径0.53mm宽口径毛细管柱用柱螺母221-16325-01进样口侧使用开口螺母221-32705检测器侧使用色谱柱常用消耗品FID喷嘴的检查更换FID检查维护前确认:

1.FID检测器熄火，关闭氢气

2.检测器温度降到40℃以下

3.关闭GC电源并拔出电源插头

4.移除FID侧色谱柱

＜注意＞FID高温时拆卸螺母可能会损坏螺纹。五、检测器-FIDFID喷嘴的检查更换移除收集极①

取下收集极固定支架的螺丝②

将收集极固定支架和收集极部分一起取下③

断开信号线使用工具：十字螺丝刀、镊子、套筒扳手检测器-FIDFID喷嘴的检查更换移除高压极④断开高压电缆⑤向上取出高压极压板⑥将高压电极和弹簧一起取出检测器-FID

⑦拧松FID喷嘴套筒扳手

⑧取出FID喷嘴喷嘴套筒扳手FID喷嘴检测器-FIDFID喷嘴的检查更换FID喷嘴清理检测器-FID更换滤光片1.关闭系统。2.水平缓慢拉出光电倍增管部分并将其取下。3.手动旋转滤光片，将其取下。检测器-FPD4.仔细用软布擦干净滤光片表面的任何污物。5.检查滤光片的O形环，如果有损坏的话将其更换。6.安装滤光片。7.慢慢地装上光电倍增管部分。检测器-FPD更换滤光片使用毛细管柱：载气氮气：纯度99.999%以上氦气：纯度99.999%以上尾吹气氮气：纯度99.999%以上检测器-ECD使用气体ECD池的老化将检测器柱子端堵上，在340℃下，尾吹流量30~60mL/min，老化若干小时。检测器-ECD关于使用气体

载气：氦气：纯度99.999%以上氮气：纯度99.999%以上尾吹气：氦气：纯度99.999%以上氮气：纯度99.999%以上检测器-FTD氢气:（供气压力：300~500kpa）纯度99.999%以上空气:（供气压力：300~500kpa）干燥空气（钢瓶气）

检测器-FTD关于使用气体

更换收集极注意事项:维护工作必须在每一部分的温度降到50℃以下。用合适的工具进行维护工作，工具使用前用蘸丙酮的纱布或其他物品擦干净。检测器-FTD(1)关闭系统，停止检测器载气供应。(2)拧下收集极的2个固定螺丝。检测器-FTD更换收集极(3)取下收集极的盖子。检查是否有来自于碱源的硅氧化物沉积于收集极盖子里面阻塞排气孔。如果有许多硅氧化物沉积，将会增加噪音水平和降低灵敏度。用干净滤纸擦干净。检测器-FTD更换收集极(5)取下FTD收集极。(4)手动旋转FTD收集极将其拧松。检测器-FTD更换收集极(6)旋转装上新的FTD收集极即可。请注意不要拧得太紧否则会引起断丝。(7)装上收集极盖子。(8)交换几次拧紧收集极顶部和底部的固定螺丝。螺丝必须被重复上紧几次，因为拧紧一个螺丝有可能使另一个螺丝变松。检查以确定已经正确安装。如果螺丝松了，碱源在加热时将不会发光，有可能导致灵敏度降低。(9)开启系统。

检测器-FTD更换收集极注意事项1.检测器部分存在空气时，灯丝通电流会导致氧化。防止这点，仪器装有保护电路，但是为防万一，需确认检测器部分流动的气体完全置换成载气后，灯丝再通电流。2.TCD温度和载气确定电流值的上限。当电流值超过设定电流值的上限时会造成灯丝的损坏，因此必须遵守。3.虽然通过的电流越大，TCD灵敏度越高，但在电流值大的状态下持续分析时会缩短灯丝寿命。当其检测器温度设定低或分析氯等腐蚀性气体时，也会缩短灯丝寿命，务请注意。检测器-TCD使用气体纯度的确认色谱柱老化FID喷嘴检查更换气体过滤器更换分子筛过滤器更换变色硅胶常见故障分析-基线噪音基线跟着空压机启动变化的情况下，安装调压器空气使用钢瓶气更换分子筛过滤器色谱柱老化石墨压环老化有脉动的情况下检查Ｈ２、尾吹气使用的减压阀常见故障分析-基线波动更换变色硅胶FID喷嘴的检查（清通、更换）气体配比的检查氢气：40mL/min空气：400mL/min尾吹气：30mL/min色谱柱安装是否正确检查点火线圈常见故障分析-FID点火困难更换进样隔垫检查玻璃衬管上的O形圈检查色谱柱两端接口衬管内石英棉的量及位置衬管惰性化处理更换分流/吹扫流路捕集阱维护微量进样针常见故障分析-重现性差更换进样隔垫更换或清洗玻璃衬管老化石墨压环更换分流流路捕集阱清洗缓冲管老化/切割色谱柱清洗微量进样针常见故障分析-鬼峰前延峰：色谱柱过载，进样口温度低分叉峰：载气不纯

两组分不能分离(流量、柱温、进样量、分流比、柱长不足等)拖尾峰：柱温太低，进样口温度低，衬管损坏，色谱柱污染常见故障分析-峰形不正常谢谢！安全阀基本知识如果压力容器(设备/管线等)压力超过设计压力…1.尽可能避免超压现象堵塞(BLOCKED)火灾(FIRE)热泄放(THERMALRELIEF)如何避免事故的发生?2.使用安全泄压设施爆破片安全阀如何避免事故的发生?01安全阀的作用就是过压保护!一切有过压可能的设施都需要安全阀的保护!这里的压力可以在200KG以上,也可以在1KG以下!设定压力(setpressure)安全阀起跳压力背压(backpressure)安全阀出口压力超压(overpressure)表示安全阀开启后至全开期间入口积聚的压力.几个压力概念弹簧式先导式重力板式先导+重力板典型应用电站锅炉典型应用长输管线典型应用罐区安全阀的主要类型02不同类型安全阀的优缺点结构简单,可靠性高适用范围广价格经济对介质不过分挑剔弹簧式安全阀的优点预漏--由于阀座密封力随介质压力的升高而降低,所以会有预漏现象--在未达到安全阀设定点前,就有少量介质泄出.100%SEATINGFORCE75502505075100%SETPRESSURE弹簧式安全阀的缺点过大的入口压力降会造成阀门的频跳,缩短阀门使用寿命.ChatterDiscGuideDiscHolderNozzle弹簧式安全阀的缺点弹簧式安全阀的缺点=10090807060500102030405010%OVERPRESSURE%BUILT-UPBACKPRESSURE%RATEDCAPACITY普通产品平衡背压能力差.在普通产品基础上加装波纹管,使其平衡背压的能力有所增强.能够使阀芯内件与高温/腐蚀性介质相隔离.平衡波纹管弹簧式安全阀的优点优异的阀座密封性能,阀座密封力随介质操作压力的升高而升高,可使系统在较高运行压力下高效能地工作.ResilientSeatP1P1P2先导式安全阀的优点平衡背压能力优秀有突开型/调节型两种动作特性可远传取压先导式安全阀的优点对介质比较挑剃,不适用于较脏/较粘稠的介质,此类介质会堵塞引压管及导阀内腔.成本较高.先导式安全阀的缺点重力板式产品的优点目前低压储罐呼吸阀/紧急泄放阀的主力产品.结构简单.价格经济.重力板式产品的缺点不可现场调节设定值.阀座密封性差,并有较严重的预漏.受背压影响大.需要很高的超压以达到全开.不适用于深冷/粘稠工况.几个常用规范ASMEsectionI-动力锅炉(FiredVessel)ASMEsectionVIII-非受火容器(UnfiredVessel)API2000-低压安全阀设计(LowpressurePRV)API520-火灾工况计算与选型(FireSizing)API526-阀门尺寸(ValveDimension)API527-阀座密封(SeatTightness)介质状态(气/液/气液双相).气态介质的分子量&Cp/Cv值.液态介质的比重/黏度.安全阀泄放量要求.设定压力.背压.泄放温度安全阀不以连接尺寸作为选型报价依据!如何提供高质量的询价?弹簧安全阀的结构弹簧安全阀起跳曲线弹簧安全阀结构弹簧安全阀结构导压管活塞密封活塞导向不平衡移动副(活塞)导管导阀弹性阀座P1P1P2先导式安全阀结构先导式安全阀的工作原理频跳安全阀的频跳是一种阀门高频反复开启关闭的现象。安全阀频跳时，一般来说密封面只打开其全启高度的几分只一或十几分之一，然后迅速回座并再次起跳。频跳时，阀瓣和喷嘴的密封面不断高频撞击会造成密封面的严重损伤。如果频跳现象进一步加剧还有可能造成阀体内部其他部分甚至系统的损伤。安全阀工作不正常的因素频跳后果1、导向平面由于反复高频磨擦造成表面划伤或局部材料疲劳实效。2、密封面由于高频碰撞造成损伤。3、由于高频振颤造成弹簧实效。4、由频跳所带来的阀门及管道振颤可能会破坏焊接材料和系统上其他设备。5、由于安全阀在频跳时无法达到需要的排放量，系统压力有可能继续升压并超过最大允许工作压力。安全阀工作不正常的因素A、系统压力在通过阀门与系统之间的连接管时压力下降超过3%。当阀门处于关闭状态时，阀门入口处的压力是相对稳定的。阀门入口压力与系统压力相同。当系统压力达到安全阀的起跳压力时，阀门迅速打开并开始泄压。但是由于阀门与系统之间的连接管设计不当，造成连接管内局部压力下降过快超过3%，是阀门入口处压力迅速下降到回座压力而导致阀门关闭。因此安全阀开启后没有达到完全排放，系统压力仍然很高，所以阀门会再次起跳并重复上述过程，既发生频跳。导致频跳的原因导致接管压降高于3%的原因1、阀门与系统间的连接管内径小于阀门入口管内径。2、存在严重的涡流现象。3、连接管过长而且没有作相应的补偿（使用内径较大的管道）。4、连接管过于复杂（拐弯过多甚至在该管上开口用作它途。在一般情况下安全阀入口处不允许安装其他阀门。）导致频跳的原因B、阀门的调节环位置设置不当。安全阀拥有喷嘴环和导向环。这两个环的位置直接影响安全阀的起跳和回座过程。如果喷嘴环的位置过低或导向环的位置过高，则阀门起跳后介质的作用力无法在阀瓣座和调节环所构成的空间内产生足够的托举力使阀门保持排放状态，从而导致阀门迅速回座。但是系统压力仍然保持较高水平，因此回座后阀门会很快再次起跳。导致频跳的原因C、安全阀的额定排量远远大于所需排量。

由于所选的安全阀的喉径面积远远大于所需，安全阀排放时过大的排量导致压力容器内局部压力下降过快，而系统本身的超压状态没有得到缓解，使安全阀不得不再次起跳频跳的原因阀门拒跳：当系统压力达到安全阀的起跳压力时，阀门不起跳的现象。安全阀工作不正常的因素1、阀门整定压力过高。2、阀门内落入大量杂质从而使阀办座和导套间卡死或摩擦力过大。3、弹簧之间夹入杂物使弹簧无法被正常压缩。4、阀门安装不当，使阀门垂直度超过极限范围（正负两度）从而使阀杆组件在起跳过程中受阻。5、排气管道没有被可靠支撑或由于管道受热膨胀移位从而对阀体产生扭转力，导致阀体内机构发生偏心而卡死。安全阀拒跳的原因阀门不回座或回座比过大：安全阀正常起跳后长时间无法回座，阀门保持排放状态的现象。安全阀工作不正常的因素1、阀门上下调整环的位置设置不当。2、排气管道设计不当造成排气不畅，由于排气管道过小、拐弯过多或被堵塞，使排放的蒸汽无法迅速排出而在排气管和阀体内积累，这时背压会作用在阀门内部机构上并产生抑制阀门关闭的趋势。3、阀门内落入大量杂质从而使阀瓣座和导套之间卡死后摩擦力过大。安全阀不回座或回座比过大的因素：4、弹簧之间夹入杂物从而使弹簧被正常压缩后无法恢复。5、由于对阀门排放时的排放反力计算不足，从而在排放时阀体受力扭曲损坏内部零件导致卡死。6、阀杆螺母（位于阀杆顶端）的定位销脱落。在阀门排放时由于振动使该螺母下滑使阀杆组件回落受阻。安全阀不回座或回座比过大的因素：7、由于弹簧压紧螺栓的锁紧螺母松脱，在阀门排放时由于振动时弹簧压紧螺栓松动上滑导致阀门的设定起跳值不断减小。

8、阀门安装不当，使阀门垂直度超过极限范围（正负两度）从而使阀杆组件在回落过程中受阻。

9、阀门的密封面中有杂质，造成阀门无法正常关闭。

10、锁紧螺母没有锁紧，由于管道震动下环向上运动，上平面高于密封面，阀门回座时无法密封安全阀不回座或回座比过大的因素：谢谢观看癌基因与抑癌基因oncogene&tumorsuppressorgene24135基因突变概述.癌基因和抗癌基因的概念.癌基因的分类.癌基因产物的作用.癌基因激活的机理主要内容疾病：

——是人体某一层面或各层面形态和功能（包括其物质基础——代谢）的异常，归根结底是某些特定蛋白质结构或功能的变异，而这些蛋白质又是细胞核中相应基因借助细胞受体和细胞中信号转导分子接收信号后作出应答（表达）的产物。TranscriptionTranslationReplicationDNARNAProtein中心法规Whatisgene?基因：

—是遗传信息的载体

—是一段特定的DNA序列（片段）

—是编码RNA或蛋白质的一段DNA片段

—是由编码序列和调控序列组成的一段DNA片段基因主宰生物体的命运：微效基因的变异——生物体对生存环境的敏感度变化关键关键基因的变异——生物体疾病——死亡所以才有：“人类所有疾病均可视为基因病”之说注：如果外伤如烧伤、骨折等也算疾病的话，外伤应该无法归入基因病的行列。Genopathy问：两个不相干的人，如果他们患得同一疾病，致病基因是否相同？再问：同卵双生的孪生兄弟，他们患病的机会是否一样，命运是否相同？┯┯┯┯

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┷┷┷┷增添缺失替换DNA分子(复制)中发生碱基对的______、______

和

，而引起的

的改变。替换增添缺失基因结构基因变异的概念：英语句子中的一个字母的改变，可能导致句子的意思发生怎样的变化？可能导致句子的意思不变、变化不大或完全改变THECATSATONTHEMATTHECATSITONTHEMATTHEHATSATONTHEMATTHECATONTHEMAT同理：替换、增添、缺失碱基对，可能会使性状不变、变化不大或完全改变。基因的结构改变,一定会引起性状的改变??原句：1.基因多态性与致病突变基因变异与疾病的关系2.单基因病、多基因病3.疾病易感基因

基因多态性polymorphism是指DNA序列在群体中的变异性（差异性）在人群中的发生概率>1%（SNP&CNP)<1%的变异概率叫做突变基因多态性特定的基因多态性与疾病相关时，可用致病突变加以描述SNP:散在单个碱基的不同，单个碱基的缺失、插入和置换。

CNP:DNA片段拷贝数变异，包括缺失、插入和重复等。同义突变、错义突变、无义突变、移码突变

致病突变生殖细胞基因突变将突变的遗传信息传给下一代(代代相传),即遗传性疾病。体细胞基因突变局部形成突变细胞群（肿瘤）。受精卵分裂基因突变的原因物理因素化学因素生物因素基因突变的原因（诱发因素）紫外线、辐射等碱基类似物5BU/叠氮胸苷等病毒和某些细菌等自发突变DNA复制过程中碱基配对出现误差。UV使相邻的胸腺嘧啶产生胸腺嘧啶二聚体,DNA复制时二聚体对应链空缺，碱基随机添补发生突变。胸腺嘧啶二聚体胸腺嘧啶胸腺嘧啶紫外线诱变物理诱变(physicalinduction)

5溴尿嘧啶(5BU)与T类似，多为酮式构型。间期细胞用酮式5BU处理，5BU能插入DNA取代T与A配对；插入DNA后异构成烯醇式5BU与G配对。两次DNA复制后,使A/T转换成G/C，发生碱基转换,产生基因突变。化学诱变(chemicalinduction)碱基类似物(baseanalogues)诱变AT5-BUA5-BUAAT5-BU5-BU(烯醇式)

(酮式)GGC1.生物变异的根本来源，为生物进化提供了最初的原始材料,能使生物的性状出现差别，以适应不同的外界环境，是生物进化的重要因素之一。2.致病突变是导致人类遗传病的病变基础。基因突变的意义概述：肿瘤细胞恶性增殖特性（一）肿瘤细胞失去了生长调节的反馈抑制正常细胞受损,一旦恢复原状，细胞就会停止增殖，但是肿瘤细胞不受这一反馈机制抑制。（二）肿瘤细胞失去了细胞分裂的接触抑制。正常细胞体外培养，相邻细胞相接触，长在一起，细胞就会停止增殖，而肿瘤细胞生长满培养皿后，细胞可以重叠起生长。（三）肿瘤细胞表现出比正常细胞更低的营养要求。（四）肿瘤细胞生长有一种自分泌作用，自己分泌生长需要的生长因子和调控信号,促进自身的恶性增殖。Whatisoncogene?癌基因——是基因组内正常存在的基因，其编码产物通常作为正调控信号，促进细胞的增殖和生长。癌基因的突变或表达异常是细胞恶性转化（癌变）的重要原因。——凡是能编码生长因子、生长因子受体、细胞内信号转导分子以及与生长有关的转录调节因子等的基因。如何发现癌基因的呢?11910年，洛克菲勒研究院一个年轻的研究员Rous发现，鸡肉瘤细胞裂解物在通过除菌滤器以后，注射到正常鸡体内，可以引起肉瘤，首次提出鸡肉瘤可能是由病毒引起的。0.2m孔径细菌过不去但病毒可以通过从病毒癌基因到细胞原癌基因的研究历程：Roussarcomavirus,RSVthefirstcancer-causingretrovirus1958年，Stewart和Eddy分离出一种病毒，注射到小鼠体内可以引起肝脏、肾脏、乳腺、胸腺、肾上腺等多种组织器官的肿瘤，因而把这种病毒称为多瘤病毒。50年代末、60年代初，癌病毒研究成了一个极具想像力的研究领域，主流科学家开始进入癌病毒研究领域polyomavirus这期间，Temin发现RSV有不同亚型，且引起细胞恶变程度不同，推测RNA病毒将其遗传信息传递给了正常细胞的DNA。这与Crick提出的中心法则是相违背的让事实屈从于理论还是坚持基于实验的结果？VSTemin发现逆转录酶，1975年获诺贝尔奖TeminCrickTemin的实验设计：实验设计简单而巧妙：将合成DNA所需的“原料”，即A、T、C、G四种脱氧核苷酸，与破坏了外壳的RSV一起在体外40℃的条件下温育一段时间结果在试管里获得了一种新合成的大分子，它不能被RNA酶破坏，但却可以被DNA酶所分解，证明这种新合成的大分子是DNA用RNA酶预先破坏RSV的RNA，再重复上述的试验，则不能获得这种大分子，说明这个DNA大分子是以RSV的RNA为模板合成的1969年，一个日本学者里子水谷来到Temin的实验室，这是一个非常擅长实验的年轻科学家。按Temin的设想，他们开始寻找RSV中存在“逆转录酶”的证据DNA

RNA

ProteinTranscriptionTranslationReplicationReplicationRe-Transcription修正中心法规据说，1975年Temin因发现逆转录酶而获诺贝尔奖时，Bishop懊恼不已，因为早在1969年他就认为Temin的RNADNA的“前病毒理论”有可能是正确的，并且也进行了一些实验，但不久由于资深同事的规劝而放弃了这方面