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文档简介
仅供科研使用,不得用于临床检验。口蹄疫A型抗体定性检测试剂盒(ELISA)说明书【产品名称】通用名称:口蹄疫A型抗体定性检测试剂盒ELIS)英文名称TestKitforAntibodiestoFootandMouthDiseaseVirusAELISAKIT【包装规格】96人/盒【预期用途】仅供科研使用,口蹄疫是由口蹄疫病毒(FootandMouthDiseaseViru,FMD)引起的偶蹄动物的一种急性、热性、高度接触性传染病,其特征为口腔黏膜、蹄部、乳房皮肤发生水泡和烂斑。本试剂用于检测牛、羊血清中口蹄疫A型抗体,可用于口蹄疫A型疫苗免疫效果评价。【检验原理】本试剂盒系由预包被口蹄A型抗体的酶标板抗体工作液抗原液酶标记物及其他配套试剂组成,应用阻断酶联免疫法(ELISA)原理检测牛、羊血清样本中口蹄疫A型抗体。实验时将稀释的样本与抗原液同时加入酶标板中孵育样本中的抗体与酶标板上的抗体竞争抗原,阻断抗原与板的结合;经洗涤后,再加抗体工作液孵育;经洗涤后加入酶标记物孵育;再经洗涤除去未结合的酶标记物,在孔中加底物液,与酶反应形成蓝色产物,显色深浅与样品中在m长疫A。【主要组成成分】主要成分组分 数量 主要成分阴性对照 1.0m×1 --阳性对照 1.0m×1 --包被微孔板 96THRP标记抗体 6mL样本稀释液 6mL底物液A 6mL底物液B 6mL终止液 6mL2×浓缩洗涤液 30mL说明书 1份自封袋 1个不干胶 2片
预包被固相抗体HRP标记的检测抗体--过氧化脲工作液TMB工作液--含0.15%Tween20的PBS------需要但未提供的材料及耗材1、酶标仪2、精密移液器及一次性吸头3、蒸馏水4、洗瓶或者自动洗板机5、37℃水浴锅或恒温箱6、500ml量筒7、无粉一次性乳胶手套【储存条件及有效期】1、2-8℃保存,切勿冷冻,有效期6个月。2回2-8℃冰箱。3和P为4,科不临。 2其他成分在标签标明的有效期内是稳定的。【适用仪器】半自动的酶标仪,如ThermoMK,或者国产酶标仪。【样本要求】样本类型和采集以下只是列出样品采集的一般指南所有样本采集过程中不得使用叠氮钠做为防腐剂。14000rpm条件下离心20min在-0。2、用和试过任刺4pm条件下心20n,小血在-20℃下复。3、素,EDA,或作。在40m条离心20分钟上清存在-20℃以复。样稳性样在28℃下存7h,者在-20℃存6个月收是次检测完,请按一次用量分装冻存,避免反复冻融,使用时在室温下解冻,确保样品均匀充分解冻。【样品准备】1取动物全血按常规方法制备血清,要求血清清亮,无溶血、无污染。样品1周内可于2~8℃保存,长期需-2℃保存。2浓缩洗涤液使用前应恢复至室温使沉淀溶解,然后用蒸馏水或去离子水作20倍稀释。3用已稀释的洗涤液将待检血清按64倍稀(如5μl血清加入31μl洗涤液中混匀。阴、阳性对照不用稀释。【检验方法】1使用前将试剂盒置室温30分钟,恢复至室温。2取所需用量酶标板条设空白对照1孔阴/阳性对照各2孔未用的板条尽快密封,2~8℃保存。科不临。 33阴、阳性对照孔分别加入阴、阳性对照5μl,样品孔每孔加入稀释后的样品5μl;每孔再加入抗原液5μl(空白孔除外。注:加入抗原后样本稀释比例相当于1:128。4震荡混匀10秒,置3℃反应30分钟。5扣去孔内液体,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,重复洗涤5次,拍干。6每孔加抗体工作液5μl(空白孔除外,置37℃反应30分钟。7洗涤,同步骤5。8每孔加酶标记物50μl(空白孔除外,置37℃反应30分钟。9洗涤,同步骤5。10每孔依次加底物液A、底物液B各5μl,混匀37℃避光反应15分钟。11每孔加终止液5μl于(用630nm定(A。】实验正的情况,阴对照A值≥1.0,阳性照A值≤50%×阴性对照A值。【检验果的释】1.P(断率(1-样本A值/阴性对照孔均A值×10%PI≥5%为阳性PI<50%为阴性。2.本实验测结为阳时表明检样中含口蹄疫A型抗,效价于1:28,达到护平。3.本实检结为阴时明检本中含口疫A于8,。.如需了解样本抗体的最终效价,可将样本进行梯度稀释,使PI≥50%的最高稀释比例即为该样本抗体的最终效价。【试验方法的局限性】该试验仅作为定性牛、羊血清中口蹄疫A型抗体,根据PI值高低可作抗体水平强、中、弱的粗略评估。【保存条件】℃-8℃保存,有效期6个月。【注意事项】生物安全科不临。 41废。2有0烟。3成。示1。2,。3。4。5为黄色。6、实验中,用剩的板条,应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。7行。理所有使用或
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