地中海贫血单基因突变遗传病检测的新方法

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字主要成员(不

面责光计，增增含申请者)－1－地中海贫血单基因突变遗传病检测的新方法二、立论依据）.着展学；基述用。.血病15全世界范围。它是一类由于常染色体遗传性缺陷，引起珠蛋白链合成障碍，使一种或几种珠蛋白数量不足或完全缺乏，因而红细胞易被溶解破坏的溶血性贫血。如人体血液中，正常人的红细胞为120天，红细胞较早遭到破坏，使人体造血机能缺失。病人要维持生命必须进行长期输血。对家庭和社会造成了很大的压力。国内外对地中海贫血的治疗尚无有效的根治方法，只能规律性输血来维系生命。治愈重型地中海贫血的唯一办法就是造血干细胞移植。但由于在技术上还有待改进，加之昂贵的费用，致使这种方法仅停留在实验阶段。目前，为彻底防治地中病根于。我们知道，如果夫妇双方都携带有地中海贫血基因，由于没有贫血症状，往往不易被人们发现。但他们的子女就会有２５％的可能性是重型地中海贫血；如果只有一方携带地，贫，素。目前，在基因水平上对单碱基突变引起的地中海贫血病的检测有多种方法。如聚合酶技断具，等临。近年Efremov等报道了变伸增(MO。但这种方法实验周期长，操作繁琐，同样难以在临床上推广使用。所以迫切需要发展一种高效、简便的地中海贫血的检测方法。基于此，本项目利用分子探针技术，拟发展一种灵效因血方。考：ErEfremov,,Dimouxki,AJ.191.Mutantoligonucleotideextensionapftn:anonabelngpolymerase-chain-reaction-basedassayforthedetetonofpointmutations.5:66-0.刘敬,吴冠芸,哲.191.地中断.中国医学科学报3:37-35.志志.12.Theβdδ-aHemogloin.16:志志Chiou,S.S.,LiuT.C.1993.PrenatalandmoleculardiagnosisofβthalassemiamajorinTaiwanadamplidcretdresrcinsits.J59:.忠,刘辉贤,.1993.简便行β地术.中华医学杂.73:.崔金环,郑雪莲,区丽群.2003.中重型β地中海贫血基因类型分析.中国优生与遗传杂.1:.－2－三、研究方案1.研、和键题该项目是在分子生物医学基础上，将分子探针技术与荧光共振能量转移技术紧密结一异传。检量。拟解决的关键问题息。2.拟法案析(1)研线针计 基得 物计的列扩增针选立测号碱突分析(2)可析1本项目是针对当前现有的生物医学技术范畴内单碱基突变诊断这一世界人们普遍关注的重大问题，根据我们已开展的相关前期工作，确定了清晰的研究思路，并制定了切实技。2本项目将依托中南大学生物科学与技术学院完成该院实验室的硬件和软件基础为的供。.的处；检现，。－3－4．年度研究计划及预测进展血设计探的筛选增信，突析工结的。5.预期果(1)建起；(2)发。6．结题与考核方式以。－4－四、研究基础1.与本项目和绩本项目中涉及的一个很重要的问题是分子探针的设计。申请者在这方面有一定的研究积累，2础本项目组成成员属于生命科学研究领域，研究小组成员在分子信标DNA感时等成。3．.已具备的实径生行保尚病。－5－4 申请者和项目组主要成员的学历和研究工作简历近期已发表与本项目有关的主要论著目录*和获得学术奖励情况及在本项目中承担的任务*论者··卷码者年份－6－五、经费预算支出科目

金额万）

计算根据及理由.合计 0实材料费 0.60仪设备费 0.15协作费 0.20费 0.05

及合试买测用协作单位费用及差旅费费1.科研业务费2.实验费3.仪器费4.实验装费5.协作费6.项目织施。（）D分选DN甲基化在原核细胞和真核细胞中起着重要作用，因此通过应用发因转肿瘤细胞的生物学活性，以达到预防和治疗肿瘤的目的。选择具有代表性的两种抗癌药物氮杂胞苷(5-氮杂-氧胞(A抑对DA基转移酶的值活低。0（物杂胞白细胞H行响D化要D基与A胞A基化紊乱的关键。研究表明，甲基转移酶抑制剂5-CR可恢复多种基因活性，使许多肿瘤的恶性表型发生逆转。拟通过D剂5-Az血株H0及转